富血小板纤维蛋白结合冠向复位瓣在牙龈退缩中的应用

徐 丽，王 敏，刘 芳，张容秀，王婷婷

牙龈退缩(gingival recession,GR)是指牙龈冠方最顶端的边缘位于釉牙骨质界的根方，而正常的牙龈边缘应位于釉牙骨质界的冠方。可能的原因有刷牙方式不正确，牙周疾病，以及牙齿位置异常、牙槽骨开裂、咬合创伤、医源性因素等[1-2]。发生于前牙区域的GR会导致牙冠变长、黑三角等美学缺陷，以及牙齿敏感、根面龋坏甚至牙齿丧失等功能缺陷[1-2]，因此，大量的病人要求美学纠正来满足他们的美学需求以及功能要求。

目前根面覆盖的手术方法较多，如游离龈移植术(FGG)[3]、冠向复位瓣(CAF)[4]、结缔组织移植术(CTG)[5]、引导组织再生术(GTR)[6]和富血小板纤维蛋白(PRF)[7]等。CAF是GR中最常用的手术方式，手术过程是将软组织冠向迁移至暴露的牙根表面，目前为止是治疗Miller Ⅰ、ⅡGR较为有效的手术方式，也是根面覆盖中有效的膜龈手术[8]。PRF是第二代血小板浓缩物，是一种源于自身的白细胞和血小板聚集的纤维蛋白生物材料，是由CHOUKRON等[9]首先提出的，PRF基质合并有血小板、白细胞、生长因子和循环干细胞，且具有特殊的3D纤维聚合网结构，这种纤维蛋白网可以使细胞更有效地迁移和增殖，保护生长因子不被蛋白水解，从而延长生长因子的释放，延长作用时间，促进组织愈合[10-11]。本文将PRF结合CAF应用于GR中进行临床研究，现作报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年6月至2020年6月到蚌埠医学院第一附属医院口腔科门诊就诊的GR病人36例，男20例，女16例，年龄23～50岁。随机抽取18例病人共25颗患牙采用PRF膜+CAF方法为观察组，余18例病人共24颗患牙采用CAF方法为对照组。

纳入标准[12]：系统健康无疾病，病人年龄≥18岁；位于前牙或前磨牙的Miller[13]Ⅰ、ⅡGR，无牙槽骨缺损；有确定的釉牙骨质界；牙周探诊深度(probing depth,PD)≤3 mm。排除标准：抽烟；妊娠期；过去2年进行过牙周手术；患牙牙齿松动；龋病；患牙早接触等。

1.2 手术方法

1.2.1 术前准备 所有病人接受口腔卫生宣教，并进行全口龈上洁治、龈下刮治，去除牙根部的结石和菌斑，使牙根面光滑。

1.2.2 CAF的制备 按照DE SANCTIS等[15]的方式，术前先对术区进行消毒、铺巾，并用无菌伊红铅笔进行切割轮廓的标记，连接患牙釉牙骨质界(CEJ)至邻牙的牙龈边缘做倾斜水平切口，从切口至牙根面完全暴露处行半厚瓣，在其下方至膜龈联合处行全厚瓣，从膜龈联合至其下方行半厚瓣，直至其可以无阻力地将瓣覆盖至暴露的牙根面。翻起组织瓣，对牙面进行龈下刮治和根面平整，并对暴露牙根面用0.5%盐酸四环素溶液进行生物改性。水平切口下方的龈乳头被完全去上皮化以暴露其下方的结缔组织，所有的手术操作均在显微镜下操作。

1.2.3 PRF膜的制备 待CAF制备好后，用不含抗凝剂的试管抽取10 mL静脉血并立即离心，2 700 r/min 14 min。离心后将得到三层组织：最上层为贫血小板层，中间层为富血小板纤维蛋白层，最下层为红细胞层，用无菌镊将PRF夹出并制备成膜。

1.2.4 观察组 将PRF膜置于暴露的牙根面上，并将瓣冠向复位后缝合固定，并用牙周塞治剂保护创面。

1.2.5 对照组 直接将瓣冠向缝合固定，余与观察组相同。

1.2.6 术后医嘱 拆线前嘱病人不得自行去除牙周塞治剂，也不得对手术区域行任何清洁措施。术后服用抗生素3 d，并用0.12%氯己定漱口，10 d后拆除牙周塞治剂及缝线。

1.3 观察指标及结果判定 术后3、6个月病人创面愈合良好，并进行指标测定。(1)PD指使用牙周探针探查龈缘至袋底的深度；(2)垂直向GR高度(vetical gingival recession,VGR)指唇颊侧中央釉牙骨质界到牙龈边缘的距离；(3)角化龈宽度(keratinized tissue height,KTH)指从膜龈联合到牙龈边缘的距离；(4)牙龈厚度(gingival thickness,GT)评估颊侧中部附着牙龈的厚度，具体方法参照文献[14]：用含有1∶200 000肾上腺素的2%盐酸利多卡因进行局部浸润麻醉20 min后用带有橡胶挡片的UNC-15牙周探针在膜龈联合与游离龈沟中间一半处进行探查，最后用游标卡尺进行读数测量。(5)病人满意度：用视觉模拟量表(visual analog scale,VAS)来记录病人舒适度(patient comfort score,PCS)、病人美学指数(patient esthetic score,PES)、敏感度(hypersensitivity score,HS)以及病人的总满意度(patient satisfaction,PS)。具体方法为画一条10 cm长没有刻度的直线，线的初始端标示“失望”，线的末端标示“完全满意”，测量从初始点到病人标记的满意度之间的距离即为VAS值。并将VAS数值具体量化：其中1～3分为一般满意，4～6分为中等满意，7～10分为非常满意。总满意度为中等满意与非常满意之和除以总数的百分率。

1.4 统计学方法 采用t检验。

2 结果

2.1 临床观察指标 2组间术前PD、KTH、VGR、GT差异均无统计学意义(P>0.05)；术后3个月，观察组VGR低于对照组，GT高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05和P<0.01)；术后6个月，观察组GT高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。术后3、6个月，观察组与对照组的VGR、GT与术前相比，差异均有统计学意义(P<0.01)；PD、KTH术前术后相比差异无统计学意义(P>0.05)(见表1)。

表1 2组PD、VGR、KTH、GT的比较

2.2 病人满意度 病人满意度中，2组间术前PCS、HS、PES差异均无统计学意义(P>0.05)；术后3个月时2组HS比较，差异有统计学意义(P<0.01)。术后6个月时PCS、PES 2组间差异均无统计学意义(P>0.05)，而HS在2组间差异有统计学意义(P<0.01)。术后3、6个月时2组PCS、HS、PES与术前相比，差异均有统计学意义(P<0.01)；术后6个月时PES与术后3个月相比，差异有统计学意义(P<0.01)(见表2)。最后根据VAS量化后，算出病人总满意度，观察组病人总满意度高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)(见表3)。

表2 病人满意度的比较

表3 2组总满意率比较

3 讨论

牙周治疗的首要目的是消除牙周疾病并维持牙齿及其支持组织的健康和功能。最近，牙周治疗越来越注重美学效果，其范围已超过牙齿替换和牙齿颜色，而是包括了周围软组织的颜色。GR是牙周组织最常见的美学和功能问题之一。

CTG联合CAF被认为是目前治疗GR的手术金标准[16-18]，但CTG的临床应用仍有其局限性：(1)需要开辟第二术区来提供结缔组织瓣，增加了病人的痛苦及术后体验感；(2)对供区要求较高，一般来说，进行根面覆盖的结缔组织瓣的必要为厚度为1.5～2.0 mm，因此，供体部位的腭部软组织的厚度至少应有3 mm，因而对于薄龈生物型病人可能无法提供足够厚度；(3)若为带上皮的结缔组织瓣，则愈合后可能会出现与邻近区域颜色不一致的情况；(4)该手术精准度要求较高，术者必须经过严格的手术训练才可进行。CAF单独使用或联合其他手术被认为是治疗Miller Ⅰ、ⅡGR中最常用的手术方案,但在CAF+CTG联合使用后仅获得了有限的再附着的生成[19]。因此，许多能够刺激组织再生的材料被提出以获得更好的愈合效果[16,20-21]。

PRF是第二代血小板浓缩物，是血小板中PDGF、TGF-β、IGF等生长因子的浓缩悬浮液。众所周知，PRF可以加速伤口愈合，当与各种根面覆盖手术一起使用时，还可以加速硬组织和软组织的成熟[22-23]。分子研究[24]表明，PRF可以在21 d内持续释放生长因子，并在7 d内达到峰值。CTG是治疗Miller Ⅰ、ⅡGR的较为可靠的膜龈手术方法操作创伤小，既可减轻病人术后疼痛等不适感，又可减少因手术带来的美学缺陷。本研究结果显示，KTH在2组术前术后差异均无统计学意义，与ASTI等[25]研究结果相似，但有一项与此相反的结果显示KTH长期增加与膜龈联合的顶端移动相关[26]。这可能是由于评估时间过短而引起。

本次实验中，2组都获得了良好的根面覆盖，这包括了垂直牙龈高度的恢复和GT的增加，特别是GT在观察组比对照组有显著性的增加。有研究[27]称，GT的增加对于稳定的临床结果以及6～9个月后出现的爬行附着至关重要。

本次研究中，病人满意度方面观察组具有明显的优势。PES、PCS的研究结果与AGARWAL等[28]相似，认为PRF中的同质纤维蛋白网络被认为是含有血小板、生长因子和细胞因子的促进软组织愈合的生物材料[29-30]。HS在2组间差异有统计学意义，这可能与研究中获得了根面覆盖有很大关系[31]。

通过本次研究得出PRF+CAF与CAF在治疗Miller Ⅰ、ⅡGR均能获得较好的效果。2组在所有的临床评估参数里除了KTH均有明显改善，而且在治疗效果里更倾向于观察组。这个结果与GULNIHAL等[32-33]报道结果相似。

总之，PRF+CAF和CAF可以成功治疗Miller Ⅰ、ⅡGR，临床实验结果提示PRF+CAF可能替代结缔组织移植物且在病人满意度方面更优于结缔组织移植瓣，从而有助于克服自体移植技术的相关限制。然而，还必须进行进一步的长期临床和组织学研究，以验证该技术的有效性。