mNGF辅以利尿剂疗法对老年脑出血患者神经功能调控因子s-100β、NSE表达的影响

王加栋 陈管雄 黄艳 胡亮 (长沙市第四医院急诊科，湖南 长沙 410000)

脑血管疾病目前发病率呈现为逐年升高的趋势，致残率、死亡率均较高，而大部分的存活者多伴随着吞咽困难、肢体瘫痪、言语障碍等后遗症，严重影响着患者的日常生活且给患者家庭、社会均带来了不同程度的负担〔1,2〕。脑出血为多发的脑血管疾病，属于一种在临床上较为常见的神经内科疾病，其发病与脑实质在脑血管疾病的因素下所引发的非创伤性血管损伤、血管破裂相关，多发于老年人群〔3〕。目前临床上对于老年脑出血的治疗虽然已经取得了良好的成效，但部分患者仍存在预后不良现象。基于此背景，本研究探究鼠神经生长因子(mNGF)辅以利尿剂疗法治疗老年脑出血的效果，为临床上此病的治疗提供参考。

1 对象与方法

1.1研究对象 选取2019年2月至2020年2月长沙市第四医院收治的132例老年脑出血患者，按照完全随机法分为利尿剂组和联合组各66例。利尿剂组男30例，女36例，年龄63～79岁，平均(71.00±8.00)岁，出血位置：基底核区21例，丘脑16例，脑叶13例，壳核16例。联合组男33例，女33例，年龄63～77岁，平均(70.00±7.00)岁，出血位置：基底核区23例，丘脑12例，脑叶14例，壳核17例。两组上述基础资料比较无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。本研究患者及家属均知情，签署知情同意书，经医院伦理委员会批准。纳入标准：符合《中国脑血管病临床管理指南(节选版)——脑出血临床管理》〔4〕中对脑出血的诊断标准。排除标准：药物不耐受者；药物过敏者；重度昏迷者；脑疝形成者；肝、肾、心等重要障碍功能不良者；意识障碍者；精神障碍者；蛛网膜下腔出血者；凝血功能障碍者；恶性肿瘤者；感染性疾病者；免疫功能障碍者；血肿破入脑室者。药物来源：甘露醇(上海百特医疗有限公司，国药准字：H20003300)，规格：250 ml∶50 g。

1.2方法

1.2.1治疗方法 所有患者在入院后进行常规控制颅内压、降血压、止血、维持水电解质平衡、预防感染、止血等对症支持治疗。利尿剂组患者采用利尿剂甘露醇进行治疗，患者静注125 ml 20%甘露醇注射液，125 ml/次，每日3次，连续静注7 d。联合组在利尿剂组的基础上采用mNGF治疗，将20 μg mNGF在2 ml 0.9%氯化钠注射液中稀释，肌注，1次/d，连续肌注14 d。

1.2.2颅内压、血肿量、水肿面积测定 在患者治疗前、后使用颅内压无创检测仪(重庆海威康医疗仪器有限公司)测定颅内压；采用德国Simense 16排多层螺旋CT测定血肿量和水肿面积。

1.2.3肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、中枢神经特异性蛋白(s-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测 3 ml清晨空腹静脉血，离心分离血清，-80℃保存备用。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IL-8、hs-CRP、BDNF、GFAP、s-100β、NSE水平，将所制备的上清液置于室温后，取出试剂盒，标记酶标板，制作标准品，以1∶2的稀释液稀释样品；在反应孔上依次加入稀释好的待测血清及标准品100 μl/孔，放置37℃恒温孵育箱中湿育2 h；用专用洗涤液将反应板清洗3次后，加入抗体工作液(1∶100倍稀释后)100 μl/孔，置于37℃恒温孵育箱中湿育45 min；继续清洗反应板4次后，在反应孔内加入四甲基联苯胺溶液100 μl/孔，置于37℃恒温孵育箱中湿育45 min后在反应孔内加入终止液100 μl/孔以终止反应，在450 nm波长(参考波长570～630 nm)测定吸光度，经绘制标准曲线计算TNF-α、IL-8、hs-CRP、BDNF、GFAP、s-100β、NSE水平。

1.2.4神经功能评价 采用美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)、神经功能缺损评分量表(NDS)对患者治疗前后神经功能进行评价，其中NIHSS评价内容包括意识水平、凝视、视野、面瘫、上肢运动、下肢运动、共济失调、感觉、语言、构音障碍、忽视等条目，量表总分为42分。NDS包括8项，总分为45分，其中得分≥31分表示患者存在重度神经功能缺损症状，得分16～30分表示患者存在中度神经功能缺损症状，得分≤15分表示患者存在轻度神经功能缺损症状。NIHSS、NDS分数越高说明患者神经功能缺损越严重。

1.2.5临床疗效评价 临床疗效分为基本治愈、显著进步、进步、无效，治疗后与治疗前相比，NIHSS评分减少≥90%，无病残为基本治愈；NIHSS评分减少≥46%且≤89%，病残等级为1级～2级为显著进步；NIHSS评分减少≥18%且≤45%为进步；患者治疗后NIHSS评分减少≤17%为无效。总有效率=基本治愈率+显著进步率+进步率。

1.2.6预后情况统计 患者治疗结束后行为期6个月的预后随访，采用格拉斯哥预后量表(GOS)评价预后情况，评价分为5个等级，Ⅰ级：死亡，Ⅱ级：植物状态生存，Ⅲ级：重度残疾，Ⅳ级：轻度残疾，Ⅴ级：恢复良好；预后良好为Ⅳ～Ⅴ级，预后不良为Ⅰ～Ⅲ级。

1.3统计学处理 采用SPSS20.0软件进行独立样本t检验、配对t检验、χ2检验。

2 结 果

2.1两组颅内压、血肿量、水肿面积比较 两组治疗前颅内压、血肿量、水肿面积比较，无统计学差异(P>0.05)；治疗后两组颅内压、血肿量、水肿面积低于治疗前，且联合组低于利尿剂组，具有统计学差异(P<0.05)。见表1。

表1 两组治疗前后颅内压、血肿量、水肿面积比较

2.2两组机体炎症反应程度比较 治疗前两组IL-8、TNF-α、hs-CRP比较，无统计学差异(P>0.05)；治疗后两组IL-8、TNF-α、hs-CRP低于治疗前，且联合组低于利尿剂组，具有统计学差异(P<0.05)。见表2。

表2 两组治疗前后机体炎症反应程度比较

2.3两组神经功能评分比较 两组治疗前神经功能评分比较，无统计学差异(P>0.05)；治疗后两组神经功能评分低于治疗前，且联合组低于利尿剂组，具有统计学差异(P<0.05)。见表3。

表3 两组治疗前后神经功能评分比较分，n=66)

2.4两组BDNF、GFAP水平比较 两组治疗前BDNF、GFAP比较，无统计学差异(P>0.05)；治疗后两组BDNF低于治疗前，GFAP高于治疗前，且联合组BDNF低于利尿剂组，GFAP高于利尿剂组，具有统计学差异(P<0.05)。见表4。

表4 两组治疗前后BDNF、GFAP水平比较

2.5两组s-100β、NSE水平比较 两组治疗前s-100β、NSE比较，无统计学差异(P>0.05)；治疗后两组s-100β、NSE低于治疗前，且联合组低于利尿剂组，具有统计学差异(P<0.05)。见表5。

表5 两组治疗前后s-100β、NSE水平比较

2.6两组临床疗效比较 联合组总有效率(95.45%，基本治愈30例，显效21例，有效12例，无效3例)高于利尿剂组(81.82%，基本治愈24例、显效16例、有效14例，无效12例)，具有统计学差异(P<0.05)。

2.7两组预后比较 联合组预后良好率(89.39%，Ⅱ级2例，Ⅲ级5例，Ⅳ级27例，Ⅴ级32例)优于利尿剂组(75.76%，Ⅰ级1例，Ⅱ级8例，Ⅲ级7例，Ⅳ级24例，Ⅴ级26例)具有统计学差异(P<0.05)。

3 讨 论

脑出血属于一种多发的神经内科疾病，其主要病因为脑血管病变所致的高血压并小动脉硬化、微动脉瘤、微血管瘤等，此病起病较为急骤，进展较为迅速，若不及时采取合理的治疗手段干预，可导致患者预后残疾、死亡等不良情况的发生〔5〕。

目前临床上多以降低脑出血患者颅内压、降低血压为主要对症支持手段，虽然短期效果理想，但长期效果不佳〔6〕。甘露醇属于一种较为常见的利尿剂，属于一种单糖，研究显示〔7,8〕，甘露醇在机体内不会被代谢，当其进入血液循环后可较为快速地升高血浆的渗透压，促使脑组织内的脑脊液、细胞外液等进入血管中随着血液循环排出体外，最终发挥其减轻细胞内、细胞外水肿的作用。另外有研究显示〔9〕，甘露醇具有渗透性利尿作用，在进入至机体内后，增加全血容量、肾小球滤过率、肾小球血流量。临床研究已经表明〔10〕，甘露醇经增加肾小管内液渗透压，减少水、钠在远端肾小管的重吸收，增加尿液量，最终减轻脑水肿。mNGF属于一种新型的神经营养类药物，具有修复神经元、给予神经细胞生长所需的营养等作用，多用于神经损伤疾病中〔11〕。神经生长因子具有调节促突生长、神经元营养的功能，mNGF与神经生长因子具有高度的同源性，其功能一致，研究显示〔12～14〕，mNGF可抑制局部氧化应激和炎症反应，可阻止神经元被进一步损伤和抑制神经元细胞凋亡，促进其增殖。本研究显示，联合应用mNGF、甘露醇治疗的患者，血肿量较低，神经功能改善较为显著，此结果可能与甘露醇在减轻血肿方面具有优势，而mNGF对修复损伤神经元具有优势，两者联合应用优势互补相关。

随着目前临床上对脑出血的不断深入研究发现，脑出血发生后所引发的脑损伤与多种共同作用相关，其中机体炎症反应属于其中之一，TNF-α属于一种缺血性再灌注损伤、脑出血环节发生炎症反应的始动因子，IL-8属于在脑血肿部位集聚炎性细胞、活化的关键刺激因子，hs-CRP与机体炎症反应相关，当脑血管发生后脑组织缺血、血肿压迫后，机体免疫机制被活化，导致大量的hs-CRP释放〔15～17〕。本研究显示，联合应用mNGF、甘露醇治疗的患者TNF-α、IL-8、hs-CRP等炎症因子水平显著降低，此结果说明两者联合在改善神经功能的基础上减轻机体炎症反应程度。

脑实质出血后会引发供血区域神经元出现缺氧、缺血等现象的发生，在神经元受到损伤后神经功能显著下降，表现为s-100β、NSE在神经元损伤后释放至血液中异常高表达〔18〕。s-100β在脑损伤发生后，经血脑屏障进入外周血中，导致外周血中含量升高〔19〕。NSE在临床上多用于评价神经元损伤，在神经内分泌细胞、神经元内特异性分布，组织特异性较高，脑出血发生后，组织缺氧缺血促使无氧糖酵解，此时损伤的神经元释放NSE，使其水平显著升高〔20〕。BDNF与神经细胞生长相关，主要在杏仁核、大脑皮质、海马中分布〔21〕。GFAP属于一种星形胶质细胞的特异性标志蛋白，但神经损伤部分GFAP含量降低〔22〕。本研究显示，联合应用mNGF、利尿剂甘露醇治疗的患者BDNF、GFAP、s-100β、NSE等指标异常表达显著改善，此结果说明两者联合可显著改善患者神经功能。

综上所述，mNGF辅以利尿剂疗法可显著改善老年脑出血患者神经功能，抑制s-100β、NSE异常表达，促进预后恢复，效果显著。