甘肃省天视县岔口驿马产区马梨形虫病流行病学调查

王福财 ， 王淑芳 ， 白天俊

(天祝县动物疫病预防控制中心 ， 甘肃 天祝 733299)

岔口驿马是我国擅走“胎里带”对侧步的优良地方走马品种[1]，产于甘肃省武威市天祝藏族自治县。该地区是甘肃省九大牧区之一，辖区内岔口驿马和牛羊在同一草原混合放牧现象较为普遍。天祝县动物疫病预防控制中心实施“天祝白牦牛疫病综合防控技术研究推广项目”时,对天祝白牦牛血液原虫病传播媒介进行了调查，经中国农业科学院兰州兽医研究所鉴定，天祝县辖区内有青海血蜱和银盾革蜱2种蜱类生存繁殖，牛羊血液原虫病在天祝县各乡镇均有不同程度感染。马梨形虫病(Equine piroplasmosis，EP，又称马巴贝斯虫病、马焦虫病)主要是由驽巴贝斯虫(Babesiacaballi,B.caballi)和马泰勒虫(Theileriaequi,T.equi,又称马巴贝斯虫Babesiaequi,B.equi)寄生于马红细胞而引起的一种经媒介蜱传播的马属动物血液原虫病[2-4]，通常表现为发热、黄疸、贫血以及呼吸困难等症状[4-5],患马瘦弱，影响生产性能，急性病例可引起持续的长期感染[6],严重的可导致死亡[7]。该病广泛分布于世界各地[5]，但尚未见岔口驿马产区内EP流行病学调查相关文献报道。为掌握岔口驿马产区内EP感染情况，制定科学防控措施，本课题组对华藏寺镇等16个乡镇养殖的岔口驿马按照占养殖量约10%的比例，随机采集马血清510份，用ELISA方法进行B.equi和B.caballi的抗体检测，并对抗体阳性率高的乡镇和养殖量最大的打柴沟镇的马匹进行血液虫体检查。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 马巴贝斯虫抗体检测试剂盒(批号：EQB.e-1005)和马驽巴比斯虫抗体检测试剂盒(批号：EQB.c-1005)，均购自Kernel.Inc公司，于2～8 ℃存储备用。

1.2 主要仪器 酶标仪、精密移液器、量筒量杯。

1.3 主要方法

1.3.1 样品准备 兽医专业技术人员对16个乡镇共510匹马空腹颈静脉进行无菌采血，完成采血后统一置于兽医实验室室温下自然析出血清，收集血清，-20 ℃冷冻保存待检。待检血清务必保证清亮,避免使用溶血以及被污染样品。

1.3.2 试验准备 在使用前所有试剂需恢复到室温20～25 ℃，提前预热恒温孵育设备；用19体积的蒸馏水稀释1体积的20×洗板液，得到1×洗板液；在血清稀释板上使用样品稀释液将样品血清稀释40倍，备用；1份原液与24份酶标稀释液混合，得到酶标工作液，使用前根据实际用量现用现配。

1.3.3 试验操作 试验前1 h将试剂盒从冷冻冰箱中取出回复室温。采用马巴贝斯虫抗体检测试剂盒和马驽巴贝斯虫抗体检测试剂盒进行检测，按照试剂盒说明书步骤操作。

1.3.4 马血液涂片镜检 天祝县每年的3～4月份、8～9月份是蜱虫爬上宿主体的季节。2021年3月份底，在全县蜱虫较多且抗体检测阳性率最高的天堂、赛什斯2个镇和岔口驿马养殖规模最大的打柴沟镇采集马耳尖血推片120份，甲醇固定，染色镜检，同时统计感染率。血推片采样以马匹身上有蜱虫为主。

1.4 抗体检测结果判断标准 样品S/P值=(样品OD值÷阳性对照OD值)×100%。有效性：阴性对照的S/P值必须<30%,阳性对照的平均OD值必须≥0.4。阴性：样品的S/P值<65%，样品血清中抗体阴性。阳性：样品的S/P值>65%，样品血清中抗体阳性。

2 结果

2.1 抗体检测 各乡镇的抗体检测结果见表1。结果显示，510份马血清中检测出B.equi抗体阳性数为34份，阳性率为6.67%；B.caballi抗体阳性数为38份，阳性率为7.45%。

表1 抗体检测结果

2.2 血推片虫体镜检 虫体检出情况见表2。120份血推片样本中，B.equi虫体检出样品数为5份，虫体检出率为4.17%，视野中虫体长度小于红细胞半径，这是与其他血液原虫虫体区分的特征之一。80%虫体呈圆点状，个别似椭圆状，红细胞里有1个或2个虫体。有虫体感染的血推片中，红细胞染虫率约为35%左右。B.caballi虫体检出样品数为4份，虫体检出率为3.33%，虫体长度大于红细胞半径，多数呈梨形，多呈2个存在，多数平行排列。有虫体感染的血推片中，红细胞染虫率达到20%左右。在天堂镇的1份血液样品中同时发现B.equi和B.caballi虫体。

表2 虫体检出情况统计表

3 讨论

3.1 据文献报道，EP广泛分布于世界各地[5]，在甘肃省陇东南地区该病呈局域性流行[8]。新疆西部、吉林省东部等地抽样检测的抗体阳性率(感染率)分别达到40%[9]、34%[10]。马利青研究[11]发现，青海省海西地区EP广泛传播，抗体阳性率为30.65%。本调查检测结果显示，岔口驿马产区B.equi抗体阳性率为6.67%，B.caballi抗体阳性率为7.45%；血推片虫体检查结果显示，3个乡镇B.equi和B.caballi总检出率分别为4.17%和3.33%。综上所述，岔口驿马产区内马群EP抗体阳性率低于上述地区，16个乡镇中除毛藏乡、炭山岭镇、石门镇、祁连镇、大红沟乡外，其他乡镇均有B.equi或B.caballi感染史或马群中存在感染现象，但本次调查样本数量有限，覆盖面不够，并不能完全代表本地区EP感染程度和流行情况，只表明该地区有EP感染现象，因此，针对不同季节、年龄、性别、畜别等感染规律和流行病学特点进行调查研究十分必要，如全面掌握EP在岔口驿马产区的感染和流行情况，还需要做进一步深入研究。

3.2 岔口驿马产区马群有EP感染史或正在受EP感染，这与辖区内革蜱活跃，岔口驿马完全暴露在该病威胁的环境中等情形相吻合。近几年，随着马产业和赛马等传统马文化的发展，马匹流动频繁，跨区域调运、交易呈现频发势头，跨区域参加各地藏区传统赛马会现象多见，也为该病的发生和传播提供了可能。另外，有文献报道称EP也可经胎盘感染，引起流产或胎儿感染[12]。

3.3 天祝县位于青藏、内蒙、黄土三大高原交汇地带，境内海拔处于2 040～4 874 m，年降水量为260～630 mm，年平均气温为-1～1.3 ℃，无绝对无霜期，东西跨度大，南北狭长，各乡镇气候差异大，赛什斯、天堂等莫科片区乡镇气候较温暖湿润，尤其是天堂镇，俗称天祝县的“小江南”，适宜蜱虫生存繁殖，其传播的牛羊血液原虫病较为严重，天祝牧区各种牲畜存在混牧现象，长期以来因马属动物疫病发生率低，广大养殖户马匹预防性驱虫等防疫意识淡薄，致使马群中受各种寄生虫侵袭，马匹抵抗力下降，加上该病具有带虫免疫现象[13]，有一定的隐蔽性，畜主很容易造成麻痹大意，为EP在该地区的传播提供了便利条件。EP的地理分布与蜱的区系分布有关，蜱虫作为传播媒介,在该病的流行中有着十分重要的作用。蜱虫种类众多并且分布范围较广，有研究表明，有4个品种可在发病高峰期传播，9个品种可在排卵时期传播B.caballi[14]，EP的传播流行取决于蜱的传播能力，有文献报道，随着蜱虫活动能力的下降,EP的流行也渐渐停止[15]。天祝县属高寒牧区，每年3～4月份、8～9月份是蜱虫活跃期，充分了解蜱虫的生长繁殖、感染规律、生长分布规律等情况，对全面掌握EP感染和科学防控等有着非常重要的意义。在岔口驿马EP综合防控中分片区制定防控措施意义重大，可有效控制该病在岔口驿马产区的传播流行，减少养殖损失。不同片区有计划地实行划区轮牧、不同畜种间轮牧和计划性休牧制度，可起到保护草场和减少感染的作用。如何采取控蜱、检疫、预防性驱虫等综合防控措施还需进一步研究并试验推广。