外周血NLR Gal-9表达与子宫内膜异位症患者盆腔疼痛及粘连的相关性分析

朱 慧, 赵 纯, 曹曦霞, 华 桦, 刘 娟, 徐 琳

(江苏省南京市妇幼保健院生殖健康科, 江苏 南京 210000)

子宫内膜异位症是子宫内膜在子宫以外位置生长导致出血、局部组织黏连、疼痛、月经失调、不孕等症状的妇科疾病，严重影响患者身心健康和生活质量。其发病机制尚不清楚，较多研究认为与免疫因素、炎症反应有关，因此，炎症指标对于子宫内膜异位症诊断具有积极意义[1]。半乳糖凝集素9(Galectin-9，Gal-9)是一种广泛表达于机体组织的蛋白，具有多种生物功能，参与细胞生长分化、粘附、细胞信号转导及细胞凋亡，在炎症、肿瘤、免疫等方面发挥重要作用，但其在子宫内膜异位症炎症程度的作用尚不确切[2]。中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio，NLR)作为全身炎症反应的指标，不易受白细胞计数影响，对炎症评估具有较好准确性，在多种慢性炎症性疾病病情评估具有重要意义，但二者联合检测在子宫内膜异位症病情评估的报道较少[3]。基于此，研究以本院124例子宫内膜异位症患者为研究对象，检测其外周血NLR、Gal-9表达水平，探讨其水平变化与子宫内膜异位症患者盆腔疼痛及粘黏的关系，旨在为临床子宫内膜异位症早期诊断及病情评估提供指导依据，进而提高患者生活质量。

1 资料与方法

1.1一般资料:选取本院2019年7月至2020年7月收治的124例子宫内膜异位症患者作为观察组，其中Ⅰ～Ⅳ期患者各31例，年龄23～48岁，平均(35.42±4.36)岁；体质量指数19～25kg/m2，平均(22.54±2.31)kg/m2；文化程度：初中及以下19例、高中和大专63例、本科以上42例；经济收入：4K以下21例、4K～8K59例、8K以上44例。并选取同期住院的60例非子宫内膜异位症患者作为对照组，年龄23～46岁，平均(34.56±4.28)岁；体质量指数19～25kg/m2，平均(22.31±2.18)kg/m2；文化程度：初中及以下11例、高中和大专32例、本科以上17例；经济收入：4K以下16例、4K～8K 29例、8K以上15例。两组年龄(t=1.262，P=0.209)、体质量指数(t=0.645，P=0.250)、文化程度(χ2=0.662，P=0.718)、经济收入(χ2=3.295，P=0.193)等一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。纳入标准：①同意进行腹腔镜开腹手术，经术后病理检查确诊为子宫内膜异位症，年龄23～48岁；②非妊娠相关疾病者；③月经周期正常，无高血压、糖尿病者；④患者及家属知情且签署知情同意书。排除标准：①合并心、肝、肾等重要器官严重疾病者；②入组前3个月内使用过激素类药物或进行过放化疗者；③合并恶性肿瘤疾病者；④拒绝或不配合研究者。研究获医院伦理委员会批准。

1.2方法:手术时根据美国生育协会修正标准分期法[4](RAFS)对患者进行临床分期期别，明确患者子宫内膜异位症病情程度。术中详细记录子宫内膜异位症患者病灶大小及盆腔黏连的分布、范围及程度，并对其进行评分量化，分为1～5分Ⅰ期(微小)；6～15分Ⅱ期(轻度)；16～40分Ⅲ期(中度)；40以上Ⅳ期(重度)。然后取患者空腹静脉血约3mL，以3000r/min，离心15min，取其上清液，采用双抗体夹心酶联免疫分析法检测外周血Gal-9表达水平，试剂盒购自上海蓝基生物科技有限公司，相关操作严格按试剂盒说明书进行。使用Sysmex 500i全自动血球分析仪进行血常规检测，获取中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)计数结果并计算中性粒细胞与淋巴细胞比值(NRL)。

1.3观察指标:①比较子宫内膜异位症患者和非子宫内膜异位症者外周血NLR、Gal-9表达水平。②记录患者主诉疼痛情况，按照疼痛程度分级法[5](VRS)将患者分为轻度疼痛组42例、中度疼痛组49例和重度疼痛组33例。其中患者表示轻度疼痛，可忍受，不影响日常生活及睡眠为轻度疼痛；患者表示感觉到明显疼痛，并影响日常生活和睡眠，需口服止痛药物为中度疼痛；患者表示剧烈疼痛无法忍受，严重影响患者日常生活和睡眠，口服止痛药物无效果需需注射止痛药物为重度疼痛，比较不同盆腔疼痛程度患者外周血NLR、Gal-9表达水平。③术中观察患者是否发生盆腔黏连，若术野与腹壁、大网膜或肠管之一有黏连则表示盆腔粘黏。然后根据Hobson评分法对黏连程度进行分级，然后根据黏连程度分级将患者分为无粘黏组23例、轻度粘黏57例和重度粘黏44例。其中盆腔无黏连则为Ⅰ级；盆腔出现1～2处局限小黏连则为Ⅱ级；盆腔出现弥漫性黏连，范围较小则为Ⅲ级；盆腔出现弥漫、广泛性黏连，且比较容易分离则为Ⅳ级；腹腔出现弥漫、广泛、致密黏连，分离难度大则为Ⅴ级，Ⅰ级为无黏连组；Ⅱ～Ⅲ级为轻度黏连组；Ⅳ～Ⅴ级为重度粘黏组，比较不同盆腔粘黏程度患者外周血NLR、Gal-9表达水平。④采用Logistic回归分析外周血NLR、Gal-9表达与子宫内膜异位症患者病情程度的关系。

2 结 果

2.1两组外周血NLR、Gal-9表达水平比较:观察组患者外周血NLR(2.67±0.64)、Gal-9(687.34±126.51)ng/L水平显著高于对照组的(2.13±0.38)、(329.56±94.23)ng/L，差异达到统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组外周血NLR Gal-9表达水平比较

2.2不同盆腔疼痛程度患者外周血NLR、Gal-9表达水平比较:盆腔重度疼痛组患者外周血NLR、Gal-9表达水平显著高于盆腔中度疼痛组和轻度疼痛组，且组间两两比较差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 不同盆腔疼痛程度患者外周血NLR Gal-9表达水平比较

2.3不同盆腔粘黏程度患者外周血NLR、Gal-9表达水平比较:盆腔重度粘黏组患者外周血NLR、Gal-9表达水平显著高于盆腔轻度粘黏组以及无粘连组，且组间比较差异达到统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 不同盆腔粘黏程度患者外周血NLR Gal-9表达水平比较

2.4外周血NLR、Gal-9表达与子宫内膜异位症病情程度的相关性:将外周血NLR、Gal-9表达纳入Logistic回归方程，结果显示，外周血NLR、Gal-9表达与子宫内膜异位症病情程度呈正相关关系(P<0.05)，见表4。

表4 外周血NLR Gal-9表达与子宫内膜异位症病情的Logistic回归分析

3 讨 论

随着子宫内膜异位症发病率的逐渐升高，且逐渐年轻化，对女性生活质量及健康安全造成严重威胁，且因病变易侵袭、易复发成为临床妇科治疗难题[6]。虽然腹腔镜是子宫内膜异位症诊断的主要方式，但因侵入性且易引发并发症而导致临床应用受限。以往研究认为，炎症介质介导的炎症反应导致盆腔组织粘黏、纤维化，进而发展为子宫内膜异位症[7]。研究通过检测外周血NLR、Gal-9水平发现其水平与子宫内膜异位症盆腔疼痛及粘黏具有重要联系，为临床子宫内膜异位症诊断及评估提供参考依据。

本次研究结果显示，子宫内膜异位症患者外周血NLR、Gal-9水平显著高于非子宫内膜异位症者，说明外周血NLR、Gal-9升高与子宫内膜异位症发生密切相关。究其原因，子宫内膜异位症多发于盆腔，卵巢内的异位病灶可诱使盆腔内巨噬细胞聚集，进而引起盆腔局部组织粘连，进一步造成输卵管功能障碍，导致不孕。因此，盆腔炎症免疫反应在子宫内膜异位症发生、发展中发挥重要作用[8]。子宫内膜异位症患者子宫内膜种植于子宫外部位，机体炎症反应发生时，炎性因子附着于损伤处，导致内皮细胞损伤，促炎细胞通过介导炎症、免疫反应，促进胶原沉积，导致盆腔组织粘黏、纤维化，进而导致异位病灶的发生、发展[9]。NLR外周血中性粒细胞和淋巴细胞比较，其数值是一种反映中性粒细、淋巴细胞数值的炎症指标，且易获取，当机体应激时，中性粒细胞升高，淋巴细胞降低，进而导致其比值NLR升高，NLR可较快捷、稳定反映炎症情况。外周血淋巴细胞减少，中性粒细胞分泌血管生成因子，进而促进子宫内膜异位症的发生发展[10]。血清Gal-9是一种结合蛋白，具有多种生物学功能，可通过抑制T细胞、CD3等细胞凋亡，参与免疫调节作用。免疫抑制导致盆腔内逆流的子宫内膜无法有效清除，进而导致子宫内膜腔外种植，最终导致异位症。这与Gal-9在子宫颈病变程度中具有重要评估价值，其在高度鳞状上皮内病变中呈较高表达的报道具有相似性[11]。其水平升高可被嗜酸性粒细胞选择性粘附，而发挥细胞识别、黏附细胞外基质调节作用，促进自然杀伤细胞抑制γ-干扰素产生，导致子宫内膜容受性降低，参与子宫内膜异位症的发生发展过程[12]。并且，血清检测更为方便、快捷，可为子宫内膜异位症诊断提供指标参考。

另外，盆腔重度疼痛组患者外周血NLR、Gal-9表达水平显著高于盆腔中度疼痛组和轻度疼痛组，盆腔重度粘黏组患者外周血NLR、Gal-9表达水平显著高于盆腔轻度粘黏组以及无粘连组，并且Logistic回归分析结果显示，外周血NLR、Gal-9表达与子宫内膜异位症病情程度呈正相关关系，说明外周血NLR、Gal-9表达水平与子宫内膜异位症患者疼痛程度及粘黏程度呈正相关关系，子宫内膜异位症患者疼痛及粘黏程度越高，血清NLR、Gal-9水平越高，提示其水平可作为子宫内膜异位症病情评估的指标之一。究其原因，中性粒细胞是激活的炎症因子，淋巴细胞是免疫调节因子，NLR升高，炎症反应升高，机体炎症反应激活，进而促进炎症细胞分泌，加剧炎症反应，加剧盆腔粘黏和纤维化，进而加剧病情[13]。Ga1-9可通过钙蛋白酶、Caspasel等信号通路诱导T细胞、巨噬细胞等多种免疫细胞凋亡，参与机体炎症免疫反应。Gal-9水平升高可导致盆腔内免疫功能失衡，进而导致免疫细胞在病变部位聚集，进而促进组织再生和修复，进而促进病情发展[14]。并且，异位病灶的生长可间接导致Gal-9水平升高，进而加重病情[15]。因此，Gal-9水平随子宫内膜异位症病情发展而升高，Gal-9升高又会加剧病情发展，其水平与患者病情呈正相关关系。但由于本次研究样本较少，且机体炎症、免疫反应过程是一个复杂的过程，外周血NLR、Gal-9作为子宫内膜异位症病情评估还需进一步深入研究。

综上所述，外周血NLR、Gal-9在子宫内膜异位症患者中呈较高表达，其水平表达患者盆腔疼痛程度及粘黏程度呈正相关关系，可作为子宫内膜异位症患者盆腔粘连以及疼痛的辅助评估标志物，具有一定临床参考价值。