阴道微生态异常与支原体感染的相关性分析

刘小旋，黄德元，吴燕琴，陈少芳

（1.普宁市人民医院检验科；2.普宁市人民医院妇科，广东揭阳 515300）

生殖道感染不仅影响患者生活质量，还可增加不孕症及异位妊娠的风险。研究显示，生殖道感染发病率和复发率较高[1]，支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，具有球形、杆形、丝状等多种形态，女性生殖道支原体感染的发生直接危害生殖健康，还可成为尿道炎、宫颈癌变等其他疾病的诱因[2]。近年有报道显示，阴道微生态与生殖道支原体感染密切相关，阴道微生态失衡将为致病菌的增殖繁衍创造条件[3]，推测阴道微生态异常可能与支原体感染有关。为验证上述观点，本研究分析阴道微生态与支原体感染的相关性，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020年12月至2021年8月普宁市人民医院收治的300例阴道炎患者作为研究对象进行回顾性分析，根据是否伴有支原体感染分为感染组和未感染组，每组150例。感染组患者年龄23～62岁，平均年龄（42.62±15.89）岁；体质量指数（BMI）18.00～26.00 kg/m2，平均BMI（22.72±1.93）kg/m2；病 程5～18 d，平均病程（11.82±3.63）d；文化程度：本科及以上58例，高中62例，初中及以下30例。未感染组患者年龄25～60岁，平均年龄（43.13±16.02）岁；BMI 18.20～25.50 kg/m2，平均BMI（22.28±1.86）kg/m2；病程4～16 d，平均病程（12.25±3.70）d；文化程度：本科及以上54例，高中67例，初中及以下29例。两组患者年龄、BMI、病程及文化程度比较，差异无统计学意义（P＞0.05），组间具有可比性。本研究经普宁市人民医院医学伦理委员会批准。纳入标准：①均符合《妇产科学》[4]有关阴道炎的诊断标准；②有性生活史，但入院前24 h无性生活。排除标准：①妊娠哺乳期或月经期患者；②入院前1周内有抗生素使用史或接受阴道冲洗者；③精神意识障碍者；④合并恶性肿瘤者。

1.2 检测方法 ①标本采集。采用无菌棉签自阴道后穹窿处取阴道分泌物，均取3份标本，第1支直接涂片固定，行革兰染色，再做常规镜检；第2支做支原体培养；第3支做阴道炎五联检。②显微镜镜检。用生理盐水涂片，高倍镜下观察，按照《全国临床检验操作规程》[5]，依据观察到的白细胞、上皮细胞及球杆菌表达水平，记录阴道清洁度，并记录病原菌检测结果。Ⅰ度：阴道正常菌群，未见病原菌，视野内充满上皮细胞；Ⅱ度：阴道无病原菌，视野内较多上皮细胞；Ⅲ度：阴道可见病原菌，视野内上皮细胞少见；Ⅳ度：阴道病原菌多，视野内无上皮细胞。再涂1张行革兰染色，观察记录细菌形态学检测结果。③阴道微生态检测。检测过氧化氢（H2O2）、凝固酶（GADP）、葡萄糖醛酸苷酶（GUS）、唾液酸苷酶（SNA）及白细胞酯酶（LE）5项标记物，试剂盒购自北京中生金域诊断技术股份有限公司。分别以H2O2＜2 μmol/L、GADP≥20 U/L、GUS≥15 U/L、SNA≥7 U/L及LE≥9 U/L为结果阳性。记录乳杆菌减少发生率，以乳杆菌分级Ⅱb级、Ⅲ级及H2O2（-）为乳杆菌减少[6]。④支原体检测。试剂盒购自珠海市丽拓生物科技有限公司，操作按说明书进行。

1.3 观察指标 ①比较两组患者阴道微生态检测结果。包括H2O2、GADP、GUS、SNA、LE阳性率。②比较两组患者临床特征指标。记录阴道清洁度、pH值及乳杆菌减少发生情况。③分析阴道微生态与支原体感染的相关性。④分析阴道微生态异常判断支原体感染的价值。

1.4 统计学分析 采用SPSS 20.0统计学软件进行数据处理，计量资料以（x）表示，组间比较行独立样本t检验；计数资料以[例(%)]表示，组间比较行χ2检验；等级资料比较采用秩和检验，影响因素采用多因素Logistic回归分析，判断价值采用受试者工作曲线（ROC）分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者阴道微生态检测结果比较 感染组患者阴道微生态异常率，显著高于未感染组，差异有统计学意义（P＜0.05）。感染组患者H2O2、GADP、GUS、SNA及LE阳性率显著高于未感染组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 两组患者阴道微生态检测结果比较[例(%)]

2.2 两组患者临床特征指标比较 感染组患者阴道分泌物清洁度分级高于未感染组，pH值、乳杆菌减少发生率高于未感染组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 两组患者临床特征指标比较[例(%)]

2.3 支原体感染的多因素Logistic分析 采用Logistic分析支原体感染的相关因素，结果显示H2O2、SNA、LE阳性及乳杆菌减少是支原体感染的独立危险因素（P＜0.05），见表3。

表3 支原体感染相关因素分析

2.4 阴道微生态异常及乳杆菌减少判断支原体感染的价值分析 分别以微生态异常相关指标和乳杆菌减少为检验变量，以是否为支原体感染为状态变量，绘制ROC曲线，结果显示，H2O2、SNA、LE阳性、乳杆菌减少及H2O2、SNA、LE联合预测概率对判断支原体感染具有较高准确性（P＜0.05），见表4、图1。

图1 阴道微生态异常及乳杆菌减少判断支原体感染的ROC曲线

表4 微生态异常与乳杆菌减少判断支原体感染的价值分析

3 讨论

生殖支原体属柔膜细菌，可在无生命培养基中生长发育，其中解脲支原体和人型支原体可造成非淋菌性尿道炎，并可增加宫颈炎、盆腔炎、不孕症等疾病风险，影响女性健康[7]。林亚芬等[8]的报道认为，解脲支原体通过与宿主细胞受体结合，破坏细胞膜结构，从而促进有毒代谢物的产生。近年来随着生活方式的改变和抗生素耐药现象的增加，支原体感染发生率逐年上升[9]。

菌群水平在调控阴道微生态状态中具有重要作用。健康女性阴道内分布有多种正常微生物菌群，与内环境、宿主保持相互制约的动态平衡，维持机体正常生理功能。阴道微生态平衡一旦被打破，则会促进致病菌的繁殖，成为细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎等的诱发因素。阴道微生态异常与支原体感染密切相关，乳杆菌为阴道优势菌种，可通过刺激宿主局部免疫反应和抗菌作用，抑制致病菌增殖。因此，乳杆菌水平的降低可破坏阴道微生态，增加生殖道支原体感染率。H2O2是乳杆菌代谢产物，乳杆菌和H2O2水平呈显著正相关性，H2O2水平降低后对支原体的抑制杀灭作用被削弱[10]。另外，SNA作为溶酶体及细胞膜上的酶蛋白，其表达水平与细菌性阴道疾病的发生相关，沈甍[11]也认为SNA阳性是支原体感染的危险因素，与本研究结果一致。此外，LE阳性也是支原体感染的独立影响因素，LE活性与白细胞计数相关。但也有研究发现，LE存在假阳性结果[12]，这可能影响其判断支原体感染风险的准确性。本研究结果显示，各阴道微生态指标对判断支原体感染具有一定应用价值，而联合检测H2O2、SNA、LE将进一步提高其判断的准确性。

综上，支原体感染与阴道微生态密切相关，联合监测微生态指标有助于判断支原体感染风险，指导临床进行早期干预。