青海果洛和西宁地区健康人群及HAPC患者的血液COR、ALD以及相关炎症因子水平※

王 洋，杜 慧，张经善，刘永年

(1.青海大学医学院，青海 西宁 810001；2.青海大学研究生院，青海 西宁 810016；3.青海省人民医院，青海 西宁 810007；4.果洛州人民医院，青海 果洛 814099)

不同海拔地区人群的皮质类固醇激素水平及炎症因子水平是否有所差异一直存在争议，严重影响了相关临床应用学科的判断和认知。本课题就青海果洛和西宁地区健康人群及HAPC患者血液COR、ALD及相关炎症因子水平开展研究。

1 对象与方法

1.1 对象

选择84名西宁地区(海拔2200m)和99名果洛地区(海拔3800m)的移居与世居居住者，分成2 200m世居组(10人)、2 200m移居组(74人)、3 800m世居组(77人)、3 800m移居组(22人)；选择29名西宁移居人群中的HAPC患者组成HAPC病例组，74名西宁移居健康者组成对照组。

1.2 方法

1.2.1 检测

采集受试者晨起空腹静脉血5 mL，置EDTA管抗凝、离心(4℃，3000r/min，10min)。血浆置-80 ℃冰箱保存。

用Elisa法检测hs-CRP、IL-3、IL-6水平。检测严格按照试剂盒说明书进行，试剂盒标准曲线相关系数均大于0.99。 用CLIA法检测COR、ALD水平。

1.2.2 主要试剂选择

hs-CRP、IL-6 检测试剂盒为武汉爱博泰克(ABclonal)公司产品，IL-3 检测试剂盒为江苏晶美生物科技公司产品。

1.2.3 统计学处理

采用SPSS 23.0统计学软件进行数据分析，因数据不服从正态分布，采用中位数和四分位数间距法对数据进行描述，采用非参数检验法进行统计学分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 海拔2200m、3800m地区世居与移居人群COR、ALD及炎性细胞因子水平的比较分析

对海拔2200m、3800m地区世居和移居人群的比较发现，除ALD和IL-6外，COR、hs-CRP、IL-3在3800m移居、2200m移居、3800m世居、2200m世居组中差异均有统计学意义(P<0.05，表1)。对COR、hs-CRP、IL-3进行组间两两比较发现，COR：3800m移居组明显低于2200m移居组，其余各组差异无统计学意义(P>0.05)；IL-3：3800m移居组显著小于2200m移居、3800m世居组。(表2)

表1 海拔2 200m、3 800m地区世居与移居人群COR、ALD及细胞因子水平检测结果Table 1 COR，ALD and cytokines levels in the permanent resident group and immigrant groupat 2 200m and 3 800m altitudes

续表

表2 海拔2200m、3800m地区世居与移居人群COR、hs-CRP、IL-3水平检测结果Table 2 COR，hs-CRP and IL-3 levels in the permanent resident group and immigrantgroup at 2200m and 3800m altitudes

2.2 病例组与对照组COR、ALD及炎性细胞因子的比较分析

将来自海拔2200m地区的29名HAPC患者与74名移居人群的健康对照者进行比较，除ALD外，COR、IL-6、hs-CRP、IL-3均存在差异，差异有统计学意义(P<0.05)，且均为病例组高于对照组。(表3)

表3 HAPC组与对照组人群COR、ALD及细胞因子水平检测结果Table 3 COR，ALD and cytokines levels in HAPC group and control group

3 讨论

高原环境对机体的影响因素包括气压、低氧、寒冷、干燥和紫外线等，在负性影响中影响最大的是低氧。人进入高原后，受到低氧等诸多因素的影响，全身各系统从器官水平到分子水平，从功能到组织结构，都发生了一系列改变。皮质类固醇激素及炎症因子水平改变是否与高原特殊环境相关需要研究，这对于深入了解高原低氧环境对机体的影响以及对急、慢性高原病的防治具有重要意义。本研究发现，西宁与果洛地区世居与移居人群之间的部分指标变化差异不明显，提示部分身体机能适应或习服高原环境不需要更长的时间，但COR、IL-3、CRP的含量存在显著性差异，提示部分身体机能适应或习服高原环境需要更长的时间。

HAPC是一种由于人体长期处于高原低氧环境而引发红细胞过度增生的一种慢性高原病，是高海拔地区常见慢性高原病之一，其特点是机体的红细胞过度增殖、血液黏稠度增大、血流阻力增加和红细胞聚集。HAPC也是引发肺动脉高压等其他慢性高原病的基础病因。我们比较HAPC病例组、对照组发现，病例组的IL-6水平明显高于对照组，提示IL-6可能参与了HAPC 的发生。IL-6是至今发现的参与人体炎症反应最多的细胞因子，与机体炎症反应高度相关。学者基于人群和动物模型的实验都证实了高原低氧暴露条件下能够使IL-6高表达。Hartmann等对登山志愿者研究发现，即使在非高原肺水肿患者中，高原低氧环境也会导致血浆中的IL-6升高，这提示在人体中存在比较明显的炎症反应，体现了炎症反应是HAPE发病的原因之一[1]。Bailey等对49名受试者在平原地区和快速进入高原低氧环境时检测发现HAPE患者IL-6水平显著升高[2]。有研究显示，在高原病患者支气管肺泡灌洗液中发现，IL-1、IL-6、TNF-α、CRP等炎性标志物较正常人有明显上升的趋势[3]。由于病例组与对照组IL-6水平存在统计学差异，提示IL-6与慢性高原病的发生存在一定的联系。

CRP为肝细胞分泌的急性非特异性反应蛋白，在机体受到炎症、创伤等损害时，其水平快速升高，是反映炎症水平稳定的生化指标[4]。CRP可通过与受体的结合诱导致炎细胞因子，如IL-1β、IL-6、TNF-α的合成与分泌[5]。在本次实验中发现，对照组CRP水平与HAPC病例组水平有显著性差异，它们之间是否存在联系有待进一步探究。

IL-3又称多重集落刺激因子，主要由活化的T淋巴细胞和肥大细胞产生。到目前为止，学者发现IL-3在炎症反应性相关疾病中也发挥了重要作用[6]。通过研究特异性单克隆抗体靶向IL-3受体发现，在急性髓系白血病患者中存在IL-3受体特异性α亚基高表达的现象[7，8]。在动物实验与临床研究中发现，IL-3与其他炎症因子(C反应蛋白和降钙素原)具有相关性[9]。在比较海拔3800m移居人群与其他三组人群时发现IL-3是存在差异的，移居人群较高，是否为偶发现象需要进一步扩大样本量去确认。

COR是肾上腺在应激反应里产生的一种激素，COR受下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的负反馈调节，在严重缺氧的情况下，可以引起下丘脑促皮质素的释放，致COR分泌功能低下，使习服变慢并易致急、慢性高原病[10]。在本次实验中我们发现COR在病例组与对照组中的表达水平存在差异，病例组较高，但ALD无差异。本课题组在以往的研究中发现，COR与高原肺水肿的发生密切相关[11]，因此我们认为，当急性高原病发生时，由于应激反应所致，患者的COR水平会有明显改变，而长期生活在高海拔地区的人群及HAPC患者的应激反应不明显，故ALD水平无显著性变化。接下来我们还需开展COR、ALD与急、慢性高原病相关性的研究。

综上所述，果洛健康人群COR、IL-3水平低于西宁健康人群；HAPC人群COR、IL-3、IL-6、hs-CRP水平高于西宁健康人群。青海果洛、西宁地区健康人群及HAPC患者血液COR和IL-3、IL-6、hs-CRP水平存在差异。