子痫前期患者血清BNP、miR-124与病情及妊娠结局关系

郑 雯 张亚莉

河南省商丘市第一人民医院(476000)

子痫前期(PE)主要症状包括血压升高、水肿、出现蛋白尿等，多数合并心、脑、肺及其他脏器功能障碍，是引起孕产妇死亡的主要原因[1]。大量研究发现，PE的发生发展与胎盘缺血、内皮功能障碍有关[2]。脑利钠肽(BNP)是各种心血管疾病如慢性心力衰竭[3]、肥厚性心肌病[4]、急性冠脉综合征[5]等重要生物标记物。BNP可用于监测高血压患者是否发生心室重构并能反映患者病情严重程度[6]。近年来，微小RNA(miRNA)在高血压、糖尿病中的作用越来越受到重视。薛强等[7]研究指出，miR-124与高血压并发糖尿病患者的肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)活性激活有关，且其CYP11B2基因位点多态性可能参与了代谢综合征的发生。本研究通过检测PE患者血清BNP、miR-124水平，分析其与病情及妊娠结局的关系，初步讨论其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月-2020年6月于本院就诊的PE患者132例为PE组，根据病情分为轻度PE组(74例)和重度PE组(58例)；产前检查健康孕妇60例为对照组。纳入标准：①PE诊断符合相关诊断标准[8]；②单胎妊娠；③知情同意并配合检查及相关资料收集。排除标准：①合并糖尿病或心血管疾病；②合并原发性高血压、肾脏病；③合并恶性肿瘤；④依从性差或拒绝配合检查。本研究获得本院伦理委员会批准通过。

1.2 检测方法

1.2.1血样采集PE患者入院后次日清晨取空腹静脉血、正常产前检查孕妇取空腹8 h静脉外周血，分装于两个无菌试管中，离心取上清液于无菌EP管。

1.2.2血清BNP水平采用酶联免疫吸附法检测血清BNP水平(上海乔羽生物科技有限公司生产试剂盒)。

1.2.3血清miR-124水平采用荧光定量PCR技术检测血清miR-124水平，首先利用Trizol试剂盒(TaKaRa公司，日本)提取总RNA。利用紫外分光光度计检测RNA纯度。用反转录试剂盒(ThermoFisher公司，美国)合成cDNA，利用MaximaTM SYBR Green qPCR Master Mix试剂(ThermoScientific公司，美国)进行PCR扩增，以U6为内参基因。循环参数：95℃变性6min；95℃ 30s；60℃ 20s，共40个循环。miR-124上游引物：5’-GCTAAGGCACGCGGTG-3’，下游引物：5’-GTGCAGGGTCCGAGGT-3’；U6上游引物：5’-GCTTCGGCAGCACATATACTA-3’，引物序列由生工生物工程公司合成。用2-△△Ct法计算miR-124相对表达量。

1.2.4平均动脉压及24 h尿蛋白定量采用水银柱式血压计检测入组对象收缩压、舒张压并计算平均动脉压。采用双缩脲法检测24 h尿蛋白定量。

1.3 观察指标及随访记录

观察比较血清BNP、miR-124水平及平均动脉压、24 h尿蛋白定量。随访记录妊娠结局，以出现子痫、心衰、肺水肿、妊娠期高血压综合征、新生儿窒息、宫内窘迫、小于胎龄儿等判定为不良妊娠，比较各组发生情况。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 一般临床资料

3组孕妇年龄、孕前体质指数、孕周、孕次等无差异(P>0.05)。见表1。

表1 各组一般资料比较

2.2 血清指标、平均动脉压及24 h尿蛋白定量比较

PE组血清BNP、miR-124水平，平均动脉压、24 h尿蛋白定量均高于对照组，且重度PE组高于轻度PE组(均P<0.05)。见表2。

表2 各组血清指标、平均动脉压及24 h尿蛋白比较

2.3 PE患者血清BNP、miR-124水平与不良妊娠

根据PE患者血清BNP、miR-124水平中位数(86.38 pg/ml、1.30)将其分为高BNP组和低BNP组、高miR-124组和低miR-124组，分析各组妊娠结局。结果显示高BNP组、高miR-124组不良妊娠总发生比例更高(P<0.05)。见表3。

表3 血清BNP、 miR-124水平与PE患者不良妊娠[例(%)]

2.4 影响PE患者不良妊娠因素分析

单因素分析显示，血清BNP、miR-124、平均动脉压、24 h尿蛋白与PE患者发生不良妊娠有关(P<0.05)；多因素logistic回归分析显示，血清BNP、miR-124、24 h尿蛋白异常是影响PE患者结局不良的独立危险因素(P<0.05)。见表4、表5。

表4 不同特征PE患者妊娠结局比较

表5 影响PE患者不良妊娠结局的多因素logistic回归分析

3 讨论

血清BNP是一种多肽类激素，广泛分布于脑、心脏、肺、消化道等全身各组织，以心脏水平最高。正常生理情况下，BNP在心室中储存浓度很低；在病理情况下血清BNP水平在血容量增加和心室负荷过重等物理因素、暴露于RAAS系统等化学因素及缺血、缺氧等代谢因素作用下明显增加[9]。PE主要临床表现为血压升高，小动脉血管痉挛增加了血管外阻力，使得心室后负荷明显增加，心室顺应性显著降低，推测PE患者血清BNP水平相对于正常情况有所增加。本研究结果显示，PE患者血清BNP水平高于对照组且重度PE患者最高，表明PE患者病情越严重，心室负荷增加越明显，BNP水平升高更显著。王建康等[10]研究发现，重度PE、轻度PE及正常妊娠者血清BNP水平依次降低，表明血清BNP在PE发病过程中起重要作用，并与患者病情有关。黄钧等[11]研究表明，重度PE患者血清BNP水平、收缩压和舒张压均高于轻度PE、妊娠高血压患者，且BNP与收缩压和舒张压有一定关系但关系不密切。本研究也得出相似的结果，PE患者平均动脉压、24 h尿蛋白定量均高于对照组，PE患者血清BNP水平与平均动脉压、24 h尿蛋白定量均呈正相关。平均动脉压与PE患者全身小动脉痉挛关系密切，24 h尿蛋白可反映PE患者肾功能损伤情况，故血清BNP水平在一定程度上可反映PE患者病情程度。

miRNAs可与靶基因的3’非翻译区(3’UTR)结合来抑制其转录[12]。研究证实，miRNAs参与调控细胞增殖、分化、迁移、凋亡等生理病理过程，与心脑血管疾病的发生发展存在一定关系[13]。miR-124是一种与中枢神经系统疾病密切相关的miRNA，而miR-124在PE患者血清中的表达研究少见报道。Lykoudi等[14]利用miRNA基因芯片分析了16名PE患者和8例正常妊娠孕妇胎盘组织，结果显示有44种miRNA失调，其中miR-124在早发性PE胎盘中过表达，提示miR-124可作为指示PE的特定生物标记物。本研究结果显示，PE患者血清miR-124水平高于对照组且重度PE组高于轻度PE组，表明高水平miR-124与PE病情程度有关。Lv等[15]研究发现，miR-124-3p可通过下调早期生长反应因子1降低血管紧张素II依赖性高血压。另有报道称[16]，PE患者胎盘组织中miR-124-3p表达显著增加，并可直接靶向抑制胎盘生长因子(PLGF)表达，抑制胎盘滋养层细胞侵袭、迁移，可通过PLGF-ROS途径促进细胞凋亡，揭示了miR-124-3p在PE中的可能作用机制。本文分析PE患者妊娠结局发现，高BNP、高miR-124水平患者不良妊娠结局发生率增加，与其他学者[17]研究结果一致。本研究进一步分析显示，血清BNP、miR-124、24 h蛋白尿水平是影响PE病情发展的独立危险因素，表明该3项指标异常升高时发生PE风险增加。

综上所述，PF患者血清BNP、miR-124水平异常升高且随PE病情加重明显升高，高水平血清BNP、miR-124的PE患者不良妊娠结局发生率增加。提示临床，血清BNP、miR-124可能作为指示PE患者病情发展及不良妊娠结局的生物标志物，但作用和影响机制有待更深入研究。