三磷酸腺苷（ATP）荧光微生物检验技术在医务人员手表面微生物检验中的应用效果

王鲲

北大医疗鲁中医院检验科，山东淄博 255400

在临床发展中，医务人员是与患者进行直接接触的主要人员，导致医护人员的手表面微生物污染问题较为严重，患者很容易出现感染疾病的情况，不利于患者治疗效果的增强，甚至会导致患者发生院内感染和多重耐药菌感染等问题。在此基础上，对医护人员的手表明微生物进行检测尤为重要。以往发展中，其通常是应用细菌培养法进行，可实现对医护人员手部微生物的有效评估和检测，但是该方法在实际使用过程中，不仅操作时间相对较长，而且进行操作的环境较为复杂，对检测效果具有不良影响[1]。临床中应用三磷酸腺苷生物荧光法，对于医务人员的手表面微生物检验的效果显著。该研究选择2019年12月—2020年12月期间该院50名医务人员为例，分析应用三磷酸腺苷生物荧光法的效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择该院职医务人员50名，其中男21名，女29名；年龄23～50岁，平均（37.34±2.34）岁；护理人员28名，医生13名，医技人员9名。该研究通过医院伦理委员会批准。

纳入标准：医护人员均为该院在职人员；依从性较好；知情相关研究并愿意参与其中。

排除标准：人员依从性较差，难以有效配合相关研究；人员与患者接触较少。

1.2 方法

给予所有人员ATP荧光微生物检验技术，同时将微生物培养方法检测技术进行应用。在具体实施过程中，主要使用Biotech BT-112D型生物荧光快速检测仪，并使用BioThema 266-112型ATP生物检测试剂盒，同时采用ATP提取剂、裂解液、荧光素梅和ATP标准品等。

对菌悬液进行制备，主要以金黄色葡萄球菌为主，将其单个金黄色葡萄球菌菌落进行应用，将其放置在普通的阴阳琼脂培养基上，选取斜面进行接种，对其进行培养，需要将温度控制在37℃，并在保温箱中进行培养，连续培养24 h后，促进细菌悬液的制备，主要采用生理盐水对其进行处理，将新鲜斜面上的培养物制作成细菌悬液，从而进行微生物培养法的检测工作。

ATP生物荧光法检测：应用Uitansnap ATP采样器，对医务人员的手指进行采样，采样部位为手指屈侧，主要通过往返涂擦的方式完成采样，随后将所采样的棉试纸插入到取样器中，将其取样器上方的塑料阀门进行折断处理，对其反应液进行震荡处理，在反应液得以充分反应后，将其放置到ATP生物荧光检测仪中，使其在容器中反应15 s作用，随后对其反应结果进行记录分析，并对其检测结果进行记录。

微生物培养法检测：将《医院消毒卫生标准》作为主要操作规范，根据具体规章制度和行为规范，将采样棉进行应用，蘸取采样液，对医务人员的指跟向指尖进行涂抹，往返操作，完成后，将其放置在无菌条件下，随后剪短棉试纸，将其放入10 mL的采样液中，促进其充分混匀，进行震荡，随后选取适量的洗脱液，将其放置在无菌的平皿中进行培育，培养温度为37℃，采用恒温培养，培养时间为48 h，对其数据进行统计记录。

结果换算：将得出的不同浓度的金黄色葡萄球菌悬液进行制备，制备剂量为50μL，将其放置在离心管中，保证为无菌容器，随后在其中加入裂解液，裂解液的容量为50μL，将其溶液混匀，随后放置在室温环境中，静置10 min左右，在其中加入荧光素，荧光素的剂量为400μL，将其快速混匀，随后应用Biotech生物荧光快速检测仪，对其RLU值进行第一次测定（M1），随后在其中加入ATP标准品，剂量为10μL，进行第二次的RLU测定（M2），对其ATP含量进行测定，主要以5M1/(M2-M1)×105为主。

1.3 观察指标

对两种检测方法的检测结果进行判断，在结果显示为手部的细菌总数在10 cfu/cm2以下时为合格，在采用ATP生物荧光检测法时，其结果显示为1 amol/cm2以下时为合格。

1.4 统计方法

采用SPSS 20.0统计学软件处理数据，计量资料符合正态分布以（±s）表示，组间差异比较采用t检验；计数资料以频数和百分率（%）表示，组间差异比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 金黄色葡萄球菌群含量和ATP含量的关系分析

在其菌数增加时，ATP含量增加。见表1。

表1 金黄色葡萄球菌群含量和ATP含量的关系

2.2 两种检测方法的手卫生评估情况

在完成相关工作后的医护人员手卫生检测中，进行微生物培养，其菌数为（21.22±2.65）cfu/cm2，采用ATP生物法检验后，得出ATP含量为（1.82±0.32）amol/cm2，ATP生物检验法洗手前后合格率分别为26.00%和60.00%，差异有统计学意义（χ2=11.791,P=0.001）,两种检验方法的检验结果具有一致性，检验方法均有效。

表2 两种检测方法对洗手前后医务人员手卫生合格率情况的评估结果分析[n(%)]

3 讨论

在医院发展过程中，医务人员的手部微生物污染情况较为常见，其很容易导致患者出现安全风险问题，在一定程度上增加了医院的交叉感染发生率，对院内感染的影响较大。在这种情况下，促进医院发展，将医务人员的手部微生物污染情况进行评估尤为重要的[2]。医务人员的手卫生消毒是对医院感染问题进行预防的主要措施，尤其针对基础传播疾病的预防来说，其卫生消毒是一种经济、方便的方法。在实际发展中，要想提高医务人员的手部卫生依从性，还需要医院为医务人员购买快速、简单、有效的消毒液，并将其放置在手术间，物品间和门岗等位置，保证方便易取，并将吸收方法进行张贴，给予各种洗手提示，从而保证将医务人员的手卫生依从性进行有效提高[3]。但是根据相关研究数据结果显示，医务人员的洗手次数虽然得到了提高，但是其对应的细菌培养合格率却相对较低，表明部分医务人员在洗手的过程中，并不按照规范的洗手步骤操作，尤其针对急诊，连台手术时间相对紧迫，其感染风险更高。要想将医务人员的手卫生习惯进行强化，提高其手卫生措施的执行率和正确率，需要对患者的手卫生质量进行评估[4-6]。在临床发展中，对医务人员的手部微生物情况进行评估检测的主要方法为微生物培养法，这种传统的细菌培养技术方法，虽可将手卫生消毒后的细菌残存量进行反映，但需要消毒专业人员的检验技能相当熟练，并且对应的培养时间较长，需要在48 h后才能出结果[7-8]，其在实际发展过程中，会受到患者自身因素的影响，导致其使用受到限制，对临床应用造成不良影响。在我国医学技术得以不断发展的情况下，相关研究不断深入，临床逐渐应用ATP生物荧光法的检测，对医疗器械、医务人员和相关物体表面的微生物进行检测[9-11]。

ATP荧光微生物检测方法的主要使用原理为所有微生物机体内其ATP的可见程度不一，对其进行荧光素酶的催化，从而使其与ATP发生一定反应，表现为具有荧光的荧光素氧化产物[12]。与此同时，荧光强度会对体内ATP含量造成影响，在其出现升高情况时，表现为增强，从而可将人体的微生物含量进行有效反映，其也是对人体进行检测的重要指标[13]。根据相关研究显示，在将ATP荧光微生物检测技术进行应用时，对应的ATP荧光微生物检测方法在医疗器械清洗方面的效果较好，其与传统的微生物培养方法进行比较时差异较小，表明ATP荧光微生物检测方法的临床应用价值较高[14]。研究显示，将ATP荧光检测方法进行应用，对人员洗手前后的合格率进行分析，分别为30.00%和60.00%，数据前后对比差异大，表明ATP荧光检测法较好。其他学者将ATP荧光检测法与微生物培养法分别使用，对其洗手前后的合格率进行分析，ATP荧光检测法的合格率分别为26.00%和58.00%(P＜0.05），而微生物检验前后的合格率则分别为28.00%和44.00%（P＜0.05），表明ATP荧光检测法效果显著[15]。该研究应用该方法后，其结果显示：金黄色葡萄球菌菌数表增加时，ATP含量增加。ATP生物检验法洗手前后合格率则分别为26.00%和60.00%（P<0.05）。表明ATP荧光微生物检测方法的使用，在医务人员手表面微生物的评估中意义显著，检出率较高，临床应用可靠性较强，在将该检测技术进行应用过程中，其检测方法较为便捷，可实现快速取样，而且检测速度较快，反应速度快，具有较高的灵敏度，可缩短检测时间，在临床中的推广价值较为显著。与此同时，其技术的使用还改善和弥补24 h培养技术的滞后性，对临床指导工作意义显著。

外科、医务人员的日常工作量相对较大，工作任务繁重，很容易导致手卫生问题被忽视，进而会导致细菌的传播。在一般情况下，行政人员与临床的接触相对较少，因此该科室的手卫生感染发生率相对较低。因此，医院的外科和医技科室的医务人员对应的手卫生合格率较低。而行政科室最高。对人员展开现场调查，发现医技科室的医务人员常出现的手卫生问题有不戴手套，完成工作后未按要求洗手等。根据研究数据显示，偶尔进行洗手人员的手卫生情况优于未进行洗手人员的手卫生。因此，医院中洗手是对手卫生进行控制的主要措施，降低人员的手表面微生物含量。在展开医疗操作的过程中，大量的病原微生物会通过医护人员的手污染相关物品，从而容易导致感染问题的发生，而且容易将病原菌带出医院以外的环境中。在这种情况下，需要规范医院对医务人员的手卫生，加强其行为控制，操作后按要求洗手，勤洗手，保证洗手规范性，从而保证人员手卫生[16]。ATP荧光检测仪是一种对医院医护人员进行手卫生评估的主要方法，实用性较强，在当前发展中得到了广泛认可且应用范围较为广泛，主要被应用在医药，生物学和食品工业等领域，在应用此技术时，其可为患者提供较为直观的检测结果，而且检测速度较快，临床应用灵敏度高。但实际发展中，此技术的应用也存在一定的不足，其技术结果并不能表示物体表面的存活细菌量，同时难以有效实现对细菌数量和菌株种类的判断。在这种情况下，医院在开展感染监测工作的过程中，需要结合实际的监测目的，选择合理有效的。从而保证检测方法的实施有效性，对医务人员的手卫生情况进行有效检测，根据实际情况，为医务人员制订有效的管理策略，提高其洗手规范性等，从而保证降低医院感染发生率。

综上所述，在对医务人员的手卫生污染情况进行检测过程中，应用三磷酸腺苷荧光微生物检验技术，其临床应用价值显著，检验准确率较高，可进行推广使用。