星形细胞瘤FLI-1蛋白表达及其与病人预后的关系

孙衍昶 刘达远 许鹏翔 欧阳一彬 莫业和

星形细胞瘤占颅内肿瘤的13%～26%，多呈浸润性生长，预后较差[1]。研究表明星形细胞瘤的发生、发展与多种因素有关，是多基因与蛋白异常表达共同作用的结果[2]。文献报道Friend 白血病整合素1转录因子（Friend leukemia integration 1 transcription factor，FLI-1）对肝恶性血管源性肿瘤具有一定诊断价值[3]。Ahmed等[4]指出FLI-1在尤文肉瘤/外周原始神经外胚层肿瘤中表达异常，尤其与分化簇99联合应用，对这类肿瘤的诊断阳性率更高。本文探讨星形细胞瘤FLI-1的表达变化及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2015 年6 月～2018 年6 月手术切除并经术后病理检查确诊的星形细胞瘤标本112例，其中男68 例，女44 例；年龄26～58 岁，平均（46.23±10.07）岁。纳入标准：经病理证实为星形细胞瘤，成年病人，术前无放疗、化疗等辅助治疗。另选59 例颅脑损伤内减压术获得非肿瘤脑组织为对照，其中男36 例，女23 例；年龄21～60 岁，平均（47.19±11.54）岁。本研究获医院伦理委员会批准。

1.2 检测方法 采用免疫组化法检测星形细胞瘤、非肿瘤脑组织FLI-1 蛋白表达情况，同时检测星形细胞瘤组织异柠檬酸脱氢酶1（isocitrate dehydrogenase1，IDH1）、p53蛋白表达情况。常规石蜡切片（厚4 μm）、烤片，经二甲苯脱蜡，行梯度酒精水化，PBS清洗3×3 min。微波抗原修复15 min，蒸馏水洗涤5 min。加入3%牛血清蛋白、10%羊血清混合液，37 ℃静置40 min。加一抗4 ℃孵育过夜，PBS 清洗3×5 min。加二抗室温反应30 min，PBS 清洗3×5min。DAB显色后显微镜下观察。随机选取5个高倍视野（×400）观察染色情况，胞浆与胞膜呈淡黄、棕黄、棕褐染色为阳性（图1）[5]。IDH1 阳性率超过5%为IDH1突变[6]。

图1 FLI-1蛋白表达的免疫组化染色（SP法，×400）

1.3 随访方法 术后1 d为随访起始时间，以2021年6月30 日为随访截止期，记录无进展生存、总生存情况，其中无进展生存为预后良好，肿瘤进展或病人死亡为预后不良。

1.4 统计学方法 应用SPSS 20.0软件分析，计量资料以±s表示，行t检验；计数资料行χ2检验；利用多因素logistic回归模型分析星形细胞瘤生存预后的危险因素；采用Spearman 相关系数分析FLI-1 蛋白与IDH1、p53 蛋白表达的相关性；绘制Kaplan-Meier 生存曲线分析FLI-1 蛋白表达与病人生存预后的关系；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 星形细胞瘤FLI-1的表达变化 星形细胞瘤FLI-1 表达阳性率[66.96%（75/112）]明显高于对照组[16.95%（10/59）；P＜0.05]。

2.2 星形细胞瘤FLI-1表达与IDH1、p53表达的相关性 FLI-1 表达与IDH1 表达呈明显负相关（r=-0.682，P＜0.001），与p53表达呈正明显相关（r=0.711，P＜0.001）。

2.3 星形细胞瘤的预后情况及影响因素112 例中，预后良好62 例，预后不良50 例。单因素分析显示，肿瘤病理分级、肿瘤大小、p53 表达、FLI-1 表达、肿瘤切除程度、IDH1 突变、术后放/化疗与病人预后有关（P＜0.05，表1）。多因素logistic 回归分析显示WHO 分级Ⅲ～Ⅳ级、肿瘤直径≥3 cm、p53表达阳性、FLI-1表达阳性、肿瘤未全切除是星形细胞瘤预后不良的独立危险因素（P＜0.05，表2），IDH1 突变、术后放/化疗是预后良好保护因素（P＜0.05，表2）。

表1 本文星形细胞瘤预后影响因素的单因素分析（例）

表2 本文星形细胞瘤预后影响因素的多因素logistic 回归分析

2.4 FLI-1 表达与星形细胞瘤无进展生存率的关系生存曲线分析显示，FLI-1表达阴性病人3年累积无进展生存率（75.68%）、3 年累积总生存率（81.08%）均明显高于FLI-1表达阳性的病人（分别为45.33%、49.33%；图2）。

图2 生存曲线分析FLI-1蛋白表达与星形细胞瘤生存预后的关系

3 讨论

星形细胞瘤恶性程度高，预后非常差[1]。如何提升星形细胞瘤的诊疗效果，并优化治疗方案，改善病人预后仍是临床研究的重点课题。靶向治疗是一种有潜力的治疗方法，但目前仍缺乏理想的治疗靶标。研究表明FLI-1 蛋白表达与血管生成密切相关，FLI-1缺失可导致血管生成活性受到抑制[7]。而新生血管生成在肿瘤进展过程中有重要作用，并且能够促进肿瘤的浸润以及转移[8]。杨勇等[9]发现FLI-1 蛋白表达参与血管球瘤的进展。本文结果发现星形细胞瘤FLI-1 蛋白表达阳性率明显增高。FLI-1 蛋白是Ets 转录因子家族的重要成员，在正常情况下，主要表达于血管内皮细胞、造血干细胞，对祖细胞与造血干细胞的分化及增殖有调节作用。当FLI-1蛋白呈过表达时，可促进实体肿瘤发病以及进展[10]。FLI-1在多种肿瘤中有促肿瘤作用，且调控机制较复杂。Yan等[11]发现FLI-1能促进乳腺癌进展，对不良预后有预测作用，沉默FLI-1 表达能抑制肿瘤细胞增殖。FLI-1在小细胞肺癌组织中表达上调，可通过激活miR-17-92 通路，促进肿瘤进展，敲除FLI-1 基因表达，能促使肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖[12]。

本文发现FLI-1蛋白阳性表达是星形细胞瘤预后不良的独立危险因素。FLI-1 蛋白的促肿瘤进展的作用机制可能与其激活血管生成因子有关，从而促进新生血管生成，为肿瘤细胞的增殖与分化提供营养供给，导致病情恶化[13]。本文结果显示星形细胞瘤FLI-1 表达与IDH1 表达呈负性相关，而与p53表达呈正相关。IDH1 突变能减弱肿瘤细胞线粒体葡萄糖氧化能力，对谷氨酰胺酶进行抑制，并阻止其转化成谷氨酰酸酯，延缓肿瘤进展[14]。p53蛋白能削弱p53基因的抑癌作用，促进肿瘤细胞凋亡，促进病情进展[15]。本研究显示FLI-1 蛋白阳性表达星形细胞瘤无进展生存率、总生存率明显下降。这可能与FLI-1 蛋白的促肿瘤作用有关。FLI-1 能促进肿瘤细胞增殖，能提升肿瘤细胞的侵袭与转移能力，促进肿瘤进展，增加肿瘤进展与死亡风险[16]。

综上所述，星形细胞瘤组织FLI-1 蛋白呈阳性表达，是病人预后不良的独立危险因素。