炒赤芍质量标准研究

占丽琴 方磊 罗艳 孙辉 丁野

【摘 要】 目的：对炒赤芍进行质量标准研究。方法：建立炒赤芍的性状、薄層色谱鉴别、含量测定方法，并按照《中国药典》2015年版对水分、总灰分、浸出物等项目进行了测定。结果：炒赤芍的薄层色谱中，在对照品及对照药材相同的位置显相应的斑点。水分、总灰分、浸出物、含量测定的范围分别为1.43%～8.85%、3.40%～11.80%、38.21%～54.39%、0.8%～3.7%。结论：该研究可为炒赤芍质量控制提供依据。

【关键词】 炒赤芍;含量测定;质量标准

【中图分类号】R284   【文献标志码】 A    【文章编号】1007-8517（2022）12-0054-04

Study on Quality Standard of Chaochishao

ZHAN Liqin1，2 FANG Lei1，2 LUO Yan1，2 SUN Hui1，2 DING Ye1，2*

1.Hunan Institute for Drug Control（Hunan Center for Pharmaceutical Excipients Control）， Changsha 410001，China;

2.Hunan Engineering &Technology Research Center for Pharmaceutical Quality Evaluation，Changsha 410001，China

Abstract：Objective To study the quality standard of Chaochishao. Methods The characteristics， TLC identification and content determination methods of Chaochishao were established， and the water content， total ash content and extract content were determined according to Chinese Pharmacopoeia 2015 edition.Results In TLC of  Chaochishao， corresponding spots were found in the same position of reference substance and reference medicinal material. The ranges of moisture， total ash， extract and content were 1.43%-8.85%， 3.40%-11.80%， 38.21%-54.39% and 0.8%-3.7%， respectively. Conclusion This study can provide the basis for quality control of  Chaochishao.

Chaochishao; Content Determination; Quality Standard

赤芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.或川赤芍Paeonia veitchii Lynch的干燥根，味苦、微寒;有清热凉血、散瘀止痛的功效[1]，临床常用的赤芍品规主要有生赤芍、炒赤芍和酒赤芍等。目前报道多为赤芍的化学成分及药理研究，其炮制品炒赤芍的相关研究较少[2-3]。本试验进行薄层鉴别水分、总灰分、浸出物、含量测定研究，为炒赤芍的质量标准建立及质量控制提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 岛津LC20-AT 高效液相色谱仪（检测器DAD）、色谱柱 Welch LP C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）、色谱工作站  Empower、Lecia DM2500。

1.2 材料 芍药苷对照品（批号：110736-201842，纯度：97.4%）赤芍对照药材（批号：121093-201804）均购自中国食品药品检定研究院。

实验用样品共15批次（批号：190501、190523、19100722-1、19100722-2、19100722-3、Y20191001、Y20191002、Y20191003、2019100042、0191005、201910006、2019050081、2019102125、2019102126、2019102127），来自不同生产企业及使用单位，产地为安徽及内蒙古，经湖南省药品检验研究院中药所罗艳副主任中药师鉴定为炒赤芍。部分样品如图1所示。

2 方法与结果

2.1 性状 为类圆形厚片，外表皮棕褐色。切面微黄色，偶有焦斑，皮部窄，木部放射状纹理明显，有的有裂隙，质硬而脆，气微香，味微苦、酸涩。

2.2 薄层鉴别 取本品粉末0.5 g，加乙醇10 mL，振摇5 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2 mL使其溶解，作为供试品溶液。另取赤芍对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。再取芍药苷对照品，加乙醇制成每1 mL含2 mg溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0502）试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各10 μL，对照品溶液4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。结果如图2所示。

2.3 水分、总灰分、水溶性浸出物 均按照《中国药典》2015年版相关规定测定。结果见表1。

2.4 含量测定

2.4.1 溶液的制备

2.4.1.1 对照品溶液 精密称取芍药苷对照品10.24 mg，精密称定，置50 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品储备液（199.4752 μg/mL）。精密吸取对照品储备液适量，加甲醇稀释成浓度99.7 μg/mL、48.7 μg/mL的对照品溶液。

2.4.1.2 供试品溶液 取本品粗粉约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定重量，浸泡4 h，超声处理（300 W，30 kHz）20 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取续滤液，即得。

2.4.2 色谱条件 色谱柱：Welch LP C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流动相：甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（30∶70）;流速1.0 mL/min;检测波长为230 nm;柱温30 ℃。理论板数按芍药苷峰计，不低于3000。如图3、图4所示。

2.4.3 线性关系考察 精密吸取浓度为1.0508、0.4203、0.1051、0.0420、0.0841 mg/mL的对照品溶液10 μL，注入液相色譜仪，测定，以峰面积积分值为纵坐标，进样量为（ng）为横坐标，绘制标准曲线。其回归方程为：y=1202x+22554，r=1。结果表明：芍药苷对照品在168.1～10507.5 ng范围内线性关系良好。结果见表2、如图5所示。

2.4.4 精密度试验 取同一炒赤芍供试品溶液（批号：2019102125），连续进样6次，每次10 μL，记录色谱峰面积，计算RSD（n=6）为0.6%，表明仪器精密度良好。

2.4.5 稳定性试验 取同一炒赤芍供试品溶液（批号：2019102125），分别于配制后的0、4、8、12、24 h，精密吸取10 μL，注入液相色谱仪，测定，记录色谱峰面积，计算RSD（n=6）为0.4%。

2.4.6 重复性试验 取同一炒赤芍供试品溶液（批号：2019102125），依法制备6份供试品溶液，测定并计算，结果分别为0.81%、0.83%、0.82%、0.81%、0.82%，RSD为0.9%。

2.4.7 回收率试验 取同一炒赤芍供试品溶液（批号：2019102125）（含芍药苷2.0 mg）约0.25 g（6份），精密称定，置锥形瓶中，精密加入浓度为0.0997 mg/mL的芍药苷对照品适量（见表3），依法制备供试品溶液，测定并计算，结果平均加样回收率为100.5%。

2.4.8 样品含量测定结果 对收集的15批炒赤芍进行了含量测定。结果见表4。

3 讨论

3.1 薄层鉴别展开剂的考察 实验中的薄层色谱鉴别增加赤芍对照药材做对照，用二氯甲烷替代传统的三氯甲烷做展开剂，取得较好薄层色谱效果，保证方法专属性亦兼顾了环保。

3.2 流动相的考察 含量测定实验中对流动相比例进行考察，当甲醇-0.05 moL/L磷酸二氢钾溶液（35∶65）时供试品的芍药苷峰存在干扰。当流动相甲醇-0.05 moL/L磷酸二氢钾溶液比例改为30∶70时，测定芍药苷峰分离效果好。

3.3 含量测定结果的讨论 该研究中15批次炒赤芍的芍药苷含量平均值为2.4%，而含量测定结果显示（批号：2019102125、2019102126、2019102127）的芍药苷含量均小于1.0%，结合调研及性状，样品颜色均为棕黄色，考虑其炒制过程中炮制稍过度，影响了芍药苷的含量。

本文对15批炒赤芍质量进行了包括性状、薄层色谱鉴别、水分、总灰分、浸出物和含量测定等项目的考察，结果显示方法可行、操作性强，可以作为炒赤芍的质量控制标准。

参考文献

[1]国家药典委员会编. 中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：376-377.

[2]孙辑凯，张梅娟，张宏莲，等. UPLC-Q-Trip-MS /MS 法测定赤芍中 4 种成分的含量[J].化学试剂，2021，43（2）：216-219.

[3]钟海蓉，张绍山，肖芳，等. 基于UPLC法测定指标成分结合指纹图谱评价不同产地川赤芍不同部位的质量[J].中草药，2021，52（7）：2062-2071.

（收稿日期：2021-10-26 编辑：陶希睿）