血清神经元特异性烯醇化酶、组织多肽抗原、胃泌素释放肽前体对非小细胞肺癌的诊断价值研究

刘 颖 任中海 张英丽

流行病学报道分析发现，非小细胞肺癌(NSCLC)的发病率可超过850/10万人左右[1]。临床上NSCLC的发生能够导致患者呼吸功能的显著恶化，增加了肺癌患者远期病死和致残的风险[2]。临床上通过对于NSCLC的早期非创伤性检测，能够为疾病的早期诊断提供依据。血清肿瘤调控蛋白的检测，能够为恶性肿瘤的诊断提供参考。神经元特异性烯醇化酶(NSE)是癌细胞骨戒结构蛋白，其能够在癌细胞异常分裂的过程中显著释放[3]；组织多肽抗原(TPA)是癌细胞膜糖蛋白成分，其能够翻译癌细胞的持续性自我扩增状态，反应癌细胞的异常凋亡分解速度[4]；泌素释放肽前体(ProGRP)不仅能够影响到胃肠道激素的分泌，同时还能够影响到癌细胞的增殖转录调控过程[5]。为了揭示NSE、ProGRP、TPA在肺癌患者中的表达情况，从而为临床上肺癌的诊断提供参考，本次研究选取2018年8月～2020年5月本院经病理学检查确诊的74例NSCLC患者，探讨了NSE、ProGRP、TPA的表达情况及其诊断学价值。

1 材料与方法

1.1 对象

收集我院在2018年8月～2020年5月期间经病理学检查确诊的74例NSCLC患者(NSCLC组)、选取同期在体检中心获取的60例健康成年人作为志愿者(对照组)。其中NSCLC组，年龄41～75岁，平均年龄(63.0±9.4)岁；性别：男性40例，女性34例；TNM分期：Ⅰ期18例、Ⅱ期22例、Ⅲ期26例、Ⅳ期8例；肿瘤直径≥3 cm 31例、<3 cm 43例。对照组60例，年龄40～75岁，平均年龄(60.8±10.4)岁；性别：男性31例，女性29例。二组研究对象在上述的一般资料方面进行比较，无统计学差异(P>0.05)。

1.2 纳入及排除标准

诊断标准：NSCLC患者诊断标准参考中华医学会制定的标准[6]；纳入标准：①患者年龄在19～75岁以内；②经胸部CT、MRI检查及病理学检查确诊，病理学类型为腺癌或者鳞癌；③既往未接受放化疗、免疫学治疗；④对照组来源于本院体检中心结果健康的自愿者；⑤本研究符合《赫尔透辛基宣言》相关医学伦理规定。排除标准：①合并严重肺部疾病等；②长期使用糖皮质激素或免疫抑制剂者；③其他部位感染及其他系统的重大疾病；④类风湿性疾病、免疫系统疾病患者。

1.3 检测方法

采用患者静脉血离心后取其上清液放入空白孔中，加入稀释液、孵育、清洗等处理后，再加入TMB显色底液(品牌：YSRIBIO ，由湖州英创生物科技公司生产)、孵育后，倒入终止液3 min内检测OD450值，BioTek酶标仪购由美国伯腾仪器有限公司生产。

1.4 统计分析

2 结果

2.1 NSCLC组和对照组血清NSE、ProGRP、TPA水平比较

NSCLC组患者血清NSE、ProGRP、TPA水平均高于对照组，均具有统计学差异(P<0.05)；见表1。

表1 两组血清NSE、ProGRP、TPA水平比较

2.2 血清NSE、ProGRP、TPA水平检测诊断NSCLC的价值

血清NSE诊断NSCLC的灵敏度为34.82%、特异度为81.66%、ROC曲线下面积AUC值为0.623；血清ProGRP诊断NSCLC的灵敏度为42.74%、特异度为84.09%、ROC曲线下面积AUC值为0.668；血清TPA诊断NSCLC的灵敏度为51.28%、特异度为89.63%、ROC曲线下面积AUC值为0.704；血清NSE、ProGRP、TPA水平联合诊断NSCLC的灵敏度为93.20%、特异度为83.87%、ROC曲线下面积AUC值为0.879；见表2、图1。

表2 血清NSE、ProGRP、TPA水平检测对NSCLC的诊断价值

图1 血清NSE、ProGRP、TPA水平检测诊断NSCLC的ROC曲线

3 讨论

NSCLC具有较高的总体发病率，其在不同类型的肺癌患者中，NSCLC的发病比例较高，其远期病死的风险也明显上升[7]。临床观察发现，NSCLC患者的生存预后恶化较为明显，多数NSCLC患者临床确诊时已处于疾病的中晚期[8]。而通过早期诊断NSCLC，能够为临床上NSCLC的根治性手术治疗提供契机，从而改善NSCLC患者的整体临床预后。现阶段影像学检查虽然能够在NSCLC的诊断过程中发挥作用，但依靠胸部CT等检查诊断NSCLC的灵敏度较低，其对于早期NSCLC诊断的可靠性仍然存在一定的局限。血清学方面的肿瘤指标，能够发挥其定量化和检测便捷的特点，在恶性肿瘤的早期筛查和诊断过程中具有重要辅助参考价值。虽然癌胚抗原或者糖链蛋白能够在NSCLC的诊断中发挥作用，但依靠癌胚抗原或者糖链蛋白诊断NSCLC的假阳性率仍然较高[7]。本次研究通过对于NSCLC患者血清中NSE、ProGRP、TPA的表达分析研究，能够为临床上肺癌的诊断提供新的研究指标。

NSE是神经特异性烯醇化酶，其主要表达于神经组织、间质成分等中，在癌细胞异常分裂的过程中，癌细胞内骨架结构蛋白的分解，能够显著促进NSE的释放[9]；ProGRP是胃泌素释放前体物质，其对于肿瘤细胞增殖调控的影响，能够提高上皮来源恶性肿瘤细胞的DNA分裂速度。相关分子生物学的研究还认为，ProGRP对于肿瘤细胞生物学行为的改变，能够提高中晚期肿瘤细胞的浸润转移风险[10-11]；TPA是组织多肽抗原，其能够在肿瘤细胞膜破碎的过程中显著释放，并能够反应癌细胞的增殖活跃状态[12]。

本次研究通过对于NSCLC患者血清中NSE、ProGRP、TPA的表达分析可见，在肺癌病例组患者血清中，NSE、ProGRP、TPA的表达浓度明显上升，高于健康对照成年组，统计学差异显著，表明NSE、ProGRP、TPA的高表达均能够影响到肺癌的病情进展过程。NSE、ProGRP、TPA的高表达，主要考虑由于癌细胞增殖活性的增强、癌细胞浸润行为的恶化及癌细胞核DNA的异常分裂等有关，多种病理性途径的激活，最终均能够促进NSE、ProGRP、TPA的表达释放。其他研究也表明，NSE的表达浓度在肺癌患者血清中可随着患者病情的恶化而显著升高，如果合并有远处转移或者远期复发倾向的患者，其NSE的表达浓度均明显升高[13,14]。诊断学方面的分析可见，NSE、ProGRP、TPA在单独诊断肺癌的过程中均具有一定的价值，NSE、ProGRP、TPA指标超过血清中检测临界值时，其诊断NSCLC的灵敏度虽然较低，但其诊断的特异度可超过70%以上，可靠性较为明显。但单独NSE、ProGRP、TPA检测的灵敏度较低，其原因主要由于单一的指标检测，难以对于不同类型来源的NSCLC均具有较高的特异性标志作用。而通过联合NSE、ProGRP、TPA进行检测，可以发现其诊断的灵敏度可超过90%以上，诊断的特异度也有所上升，提示了联合检测的现实参考意义。这主要由于联合不同指标进行检测，能够避免单一指标个体表达差异导致的诊断效能的下降。但有研究者认为，通过NSE、ProGRP等指标联合诊断，其诊断NSCLC的灵敏度仍然不超过50%[15-16]，不同的研究之间数据差别较大，考虑由于入组病例数量及检测方式的不同有关。

综上所述，在NSCLC患者血清中，NSE、ProGRP、TPA的表达浓度明显上升，同时NSE、ProGRP、TPA在联合检测的过程中，其可以显著提高NSCLC的诊断效能。本次研究的现实意义在于探讨了NSE、ProGRP、TPA的具体诊断临界值。