丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病性大血管病变患者血管内皮炎症因子表达的影响

吴迪 方朝晖

2型糖尿病性大血管病变是糖尿病常见的并发症之一，病变常累及脑动脉、颈动脉、胸腹主动脉、冠状动脉、肾动脉等体内大动脉及中动脉[1]，其形成机制复杂，以内皮功能障碍及由此导致的血管重塑、动脉粥样硬化、血管钙化，缺氧诱导的血管舒张障碍为主要特征，可引起冠心病、外周血管疾病、卒中、颈动脉狭窄、肾动脉硬化等一系列血管病变[2]。丹蛭降糖胶囊属于中药制剂，主要用于糖尿病及并发症的治疗，作用广泛。丹蛭降糖胶囊可抑制免疫炎症反应的激活，改善2型糖尿病患者体内的血栓前状态，改善颈动脉中膜厚度，有效缩小颈动脉斑块面积从而减轻血管内皮损伤[3-4]。亦有研究指出，丹蛭降糖胶囊可显著抑制内源性凝血途径，改善体内高凝状态，调节脂代谢水平，并通过抑制AGEs-RAGE炎症通路的激活防治2型糖尿病并发血管损伤[5-7]。达格列净属于SGLT-2抑制剂，相关研究表明[8]，达格列净可抑制低度炎症性反应并降低炎症趋化因子表达，减少动脉斑块炎性细胞的浸润，对糖尿病伴心血管并发症患者具有良好的治疗效果。然而，对于两者联合用药的情况尚不清楚，本次研究采用达格列净联合丹蛭降糖胶囊治疗，探索两药联用对糖尿病大血管病变患者临床疗效的影响。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取安徽中医药大学第一附属医院内分泌科于2019年1月至2020年4月期间收治的2型糖尿病性大血管病变患者84例，按照数字表法将其随机分为两组，每组42例。对照组年龄34～67岁，平均年龄(45.9±2.7)岁；男性19例，女性23例；病程2～8年，平均病程(4.1±0.4)年；研究组年龄34～69岁，平均年龄(45.8±2.1)岁；男性18例，女性24例；病程2～9年，平均病程(4.3±0.3)年。两组患者在病程、性别、年龄等一般资料方面比较无差异(P>0.05)，具有可比性。本次研究已获得医院伦理委员会批准(批号：2019AH-03)。

1.2 纳入标准

(1)患者符合2型糖尿病临床诊断[9]，且病程不小于3个月。(2)年龄18～70周岁。(3)具有以下情况之一：脑血管疾病：有脑卒中症状、体征，头颅CT/MRI扫描有脑血管梗死病灶，或有明确的脑血管疾病病史者；高血压病，具有明确冠心病病史或心电图/动态心电图提示明显心肌缺血/心肌梗死患者；外周血管有明显缺血性病变症状，如缺血性疼痛，间歇性跛行，外周血管彩超显示有动脉内膜中层增厚，明显的动脉硬化斑块或血栓形成[10]。自愿参与本次研究并在知情同意书上签字。

1.3 排除标准

(1)合并其他严重心脑血管疾病、肝肾功能不全的患者；(2)患者入组前一个月内曾出现手术或严重感染情况；(3)患者正接受胰岛素、抗血小板聚集类药物、他汀类药物治疗；(4)患者对于本次研究使用药物存在过敏反应；(5)患者存在精神障碍或沟通障碍。(6)妊娠糖尿病及哺乳期患者。

1.4 试验药物

对照组：患者接受糖尿病健康教育，控制饮食及糖尿病运动疗法基础治疗，并予以口服达格列净(国药准字J20170040，批号：20180310，阿斯利康制药有限公司)，10 mg，每日一次降糖治疗，对于降糖效果不理想的患者可使用其他无抑制动脉粥样硬化作用药物进行联合治疗。

研究组：患者接受丹蛭降糖胶囊治疗，具体方案如下：在对照组常规治疗的基础上，予以该组患者丹蛭降糖胶囊(安徽中医学院第一附属医院制剂中心；ZL200310112845.1；组方：太子参、生地黄、牡丹皮、泽泻、菟丝子、水蛭，辅料为糊精，剂型为胶囊，每瓶 50 粒，每粒 0.4 g)治疗，口服，5粒/次，3次/天。两组患者均接受为期12周的治疗。

1.5 观察指标

根据中医症候改善情况对两组患者临床疗效进行分析，气阴两虚证参照2002年《中药新药治疗糖尿病的临床研究指导原则》[11]，观察证候：口渴喜饮，倦怠无力，多食易饥，头晕头痛，头身困重，五心烦热，溲赤便秘，胸闷心痛。持续发病、明显不适者记3分，偶尔发病、时轻时重者记2分，症状轻微者记1分，无症状者记0分。各项症状评分之和为中医证候积分。

1.6 检测指标

1.6.1 血糖指标检测 抽取患者清晨空腹血，采用葡萄糖测定试剂盒检测患者空腹血糖(fasting plasma glucose，FPG)，以氧化酶法进行测定，采用全自动生化分析仪检测糖化血红蛋白(glycated hemoglobin-A1c，HbA1c)水平，采用比色法进行测定。

1.6.2 血脂指标检测 采用全自动生化分析仪对两组患者总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)水平进行检测。

1.6.3 代谢记忆指标检测 (1)C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)检测，取空腹静脉血，采用离心处理获得上清，转速3000 r/分钟，时间10分钟，采用散射比浊法对CRP水平进行检测；(2)肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α)检测，取制备好的血清样本，采用放射免疫法对TNF-α进行测定；(3)丙二醛(Malondialdehyde，MDA)检测，取制备好的血清样本，采用硫代巴比妥酸法进行MDA检测；(4)人晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products，AGEs)检测，同样取空腹血清样本，采用AGEs试剂盒进行AGEs水平检测。本次研究所用试剂盒均由北京康源绿洲生物科技有限公司提供，且均严格按照试剂盒要求进行检测。

1.7 临床疗效评定

参照2002年《中药新药治疗糖尿病的临床研究指导原则》[11]，根据患者治疗前后中医症候记分计算中医症状减少率，改善率=(治疗前积分-治疗后积分)/治疗前积分×100%。症状、体征无明显改善，改善率低于30%时为无效；症状、体征好转，减少率在30%～70%之间为有效；症状、体征明显改善，减少率大于70%为显效。

1.8 统计学方法

2 结果

2.1 两组患者临床疗效比较

治疗后研究组总体有效率为83.33%，对照组总体有效率为57.14%，研究组有效率高于对照组，且差异具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组2型糖尿病性大血管病变患者治疗前后疗效比较

2.2 两组患者治疗前后中医证候积分比较

治疗前两组患者中医证候积分相比，差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后中医证候积分，与治疗前相比，均显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后，研究组中医证候积分显著低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表2。

表2 两组2型糖尿病性大血管病变患者治疗前后中医证候积分比较分)

2.3 两组患者治疗前后HbA1c及FPG水平分析

治疗前两组患者HbA1c、FPG相比，差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后HbA1c、FPG较前均降低，差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后，与对照组相比较，研究组HbA1c、FPG水平低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表3。

表3 两组2型糖尿病性大血管病变患者治疗前后HbA1c及FPG水平对比

2.4 两组患者治疗前后TG、TC及LDL-C水平分析

治疗前两组患者TG、TC及LDL-C相比，差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后TG、TC及LDL-C较前均降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗后，与对照组相比较，研究组TG、TC及LDL-C水平低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表4。

表4 两组2型糖尿病性大血管病变患者治疗前后TG、TC及LDL-C水平对比

2.5 两组患者治疗前后CRP及TNF-α水平分析

治疗前两组患者CRP、TNF-α相比，差异无统计学意义(P>0.05)。研究组患者治疗后CRP、TNF-α较前均降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗后，与对照组相比较，研究组CRP、TNF-α水平低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表5。

表5 两组2型糖尿病性大血管病变患者治疗前后CRP及TNF-α水平对比

2.6 两组患者治疗前后MDA及AGEs水平分析

治疗前两组患者MDA、AGEs相比，差异无统计学意义(P>0.05)。研究组患者治疗后MDA、AGEs较前均降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗后，与对照组相比较，研究组MDA、AGEs水平低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表6。

表6 两组2型糖尿病性大血管病变患者治疗前后MDA及AGEs水平对比

2.7 安全性分析

两组患者在治疗期间均未出现血常规、尿常规明显异常指标，无明显不良反应表现。

3 讨论

糖尿病大血管病变属于临床常见糖尿病并发症，属中医学消渴变证范畴，消渴病程迁延，患者正气日衰，加重五脏柔弱，致使脏腑功能失调，进而导致气血津液代谢、生成异常，痰湿、瘀血等病理产物应运而生[12]。糖尿病大血管病变与多种因素有关，如年龄、吸烟、糖脂代谢异常、血压等[13]。研究显示[14]，糖尿病大血管并发症的发病关键是高血糖“代谢记忆”的持续性损伤，高血糖是启动代谢记忆的关键，而AGEs-氧化应激在代谢记忆启动中起到重要作用。因此，除密切监测糖尿病患者血糖水平外，早期检测炎症指标、血脂、氧化应激以及AGEs水平同样非常重要。

本次研究对两组糖尿病患者治疗前后血糖、HbA1c水平进行分析，结果显示，达格列净联合丹蛭降糖胶囊具有更好的降糖效果，对控制HbA1c水平达标具有较大意义。过往研究指出，丹蛭降糖胶囊可有效降低糖尿病大鼠模型血糖水平，对胰岛B细胞凋亡起到抑制作用，促进损伤胰岛B细胞修复，对于糖尿病大鼠胰岛素抵抗起到改善作用[15]。

糖尿病大血管病变的病理基础为动脉粥样硬化，已有文献指出，炎症反应是导致动脉粥样硬化形成的关键，动脉粥样硬化患者存在CRP、TNF-α水平异常升高参与动脉粥样硬化的发生及发展，2型糖尿病伴有糖尿病大血管病变的大鼠CRP、TNF-α水平明显高于无大血管病变大鼠[16-18]。CRP属于机体炎症反应常用标志物，CRP对于血管内皮平滑肌细胞增生可以起到诱导作用，促进平滑肌细胞向血管内膜移动，增加血管通透性，造成血管内皮损伤[19]。大量炎症因子、血小板、白细胞等聚集于损伤血管部位，形成附壁血栓，促进动脉粥样硬化的形成。本次研究结果显示，达格列净联合丹蛭降糖胶囊治疗降低患者CRP、TNF-α蛋白表达效果显著，由此可认为采用达格列净联合丹蛭降糖胶囊治疗可对糖尿病大血管病变起到预防作用。

“代谢记忆”的关键环节就包含AGEs-氧化应激，已有报道指出[20]，在高血糖状态下可增加机体内AGEs水平，且水平受血糖高水平、蛋白质半衰期、蛋白质与血糖接触时间等因素影响。AGEs与其受体结合，导致多种胞外基质蛋白糖基化，在肝脏、肾脏、周围神经等靶器官聚集，增加机体氧化应激反应。MDA为当前临床常用氧化应激评估指标，是由氧自由基引发的脂质过氧化产物。曾有学者在研究中指出，ROS可造成内皮细胞膜中多不饱和脂肪酸破坏，促进脂质过氧化物的产生，通过检测MDA、ROS水平的方式可评估细胞氧化损伤程度[21]。本次研究仅对MDA水平进行分析，因ROS极易受到外界环境的影响，如热源、紫外线等因素均可导致ROS水平出现异常增加，降低数据参考价值。本次研究结果显示，采用达格列净联合丹蛭降糖胶囊进行治疗，可以更好的控制机体氧化应激反应，降低因氧化应激反应造成的血管内皮细胞损伤。

丹蛭降糖胶囊中含生地、丹皮、太子参、水蛭、泽泻、菟丝子等成分，其中太子参具有补益脾肺，益气生津，生地清热凉血，丹皮、水蛭活血通经，破血逐瘀，泽泻利水，渗湿，泄热化脂，全方补通兼顾，阴阳和谐，寒温平调，补不助邪，攻不伤正，共奏益气养阴，化瘀活血之功。现代研究表明，丹蛭降糖胶囊中含多种有效化学成分，可有效增强机体物质代谢，太子参多糖可以降低甘油三酯和总胆固醇，抗氧化抗应激及发挥心血管保护作用[22-23]。丹皮酚为丹皮有效成分，具有改善糖尿病大鼠血液粘稠度、抗血小板聚集、改善血流，改善血管内皮功能的作用[24]。生地黄中所含苯乙醇类、黄酮类、紫罗兰酮类、三萜类以及烯醚萜类等化合物具有改善血糖血脂水平、增强机体造血、改善异常的血液流变学及凝血系统指标的功效，并对心血管疾病也有明显的治疗效果[25-26]。水蛭素具有改善血流变学、调节脂代谢、保护血管内皮功能、纠正糖尿病血管病变慢性炎症的作用[27]。通过对丹蛭降糖胶囊成分进行分析进一步证实丹蛭降糖胶囊在2型糖尿病大血管病变中的预防效果。

综上所述，丹蛭降糖胶囊可有效降低血管内皮炎症因子CRP、TNF-α、MDA及AGEs表达，改善2型糖尿病患者血糖、血脂水平，调节机体氧化应激反应水平，提高患者中医症状改善率，提高患者生活质量，对于2型糖尿病性大血管病变的发生起到一定的预防治作用。本次研究纳入病例数量较少，观测指标缺乏明显特异性，对丹蛭降糖胶囊干预糖尿病大血管疾病血管内皮炎症进展整体认识尚不充分，后续研究将开展多中心研究并进一步完善观测指标，期待为丹蛭降糖胶囊干预糖尿病大血管疾病血管内皮炎症进展提供更充分的证据。