罗 韦, 李 辉*, 叶 涛, 肖 涛, 余 欢, 陈友波, 司宗贵
(1. 贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵州贵阳550025;2. 贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,贵州贵阳550025; 3. 贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;4. 贵州竹香鸡养殖有限公司,贵州遵义564708)
赤水乌骨鸡是贵州省地方家禽品种,属于肉蛋兼用型鸡种,具有产绿壳蛋的特性[1]。王哲鹏等[2]研究发现,由于鸡3号染色体上EAV-HP的长末端重复序列反向插入到鸡的Ⅰ号染色体SLCO1B3基因的启动子区,促使SLCO1B3基因过量表达,导致蛋壳呈现绿色。毕慧娟等[3]、陈育青[4]研究显示,蛋壳颜色会对蛋壳质量产生影响,且在日常生活中消费者往往更喜欢购买绿壳蛋。蛋壳颜色的均一度可在一定程度上反映鸡群生产水平的一致性和品种的纯度,蛋壳颜色均匀度高说明该品种的蛋色沉着好,生产性能较为一致,品种纯度较高,这也是蛋鸡选育的1个方向[5]。赤水乌骨鸡不同产蛋期所产的绿壳蛋颜色深浅不一,且随着日龄的增加,蛋壳绿色变浅[6],但目前均只是通过感官评定,还处于定性观测阶段。NR型蛋壳颜色色差计能直接测定蛋壳颜色,其原理是不同蛋壳颜色的深浅对光的反色系数不同,将不同深浅的蛋壳颜色通过数字表现出来,更加准确和直观。因此,本试验利用NR型蛋壳颜色色差计测定赤水乌骨鸡不同产蛋期所产绿壳蛋的蛋壳颜色数值,为其蛋壳颜色的定量值划分提供参考,同时作为其蛋壳品质的基础数据资料。
1.1 试验动物本次试验在贵州竹香鸡养殖有限公司赤水乌骨鸡种鸡场进行,以赤水乌骨鸡为试验动物。随机挑选同一批次、品种特征明显、产绿壳蛋的健康母鸡360只,在相同的饲养环境下饲养(温度23 ℃,湿度60%~65%),每天光照16 h,笼养,每笼3只,自由采食和饮水。
1.2 主要仪器NR型蛋壳颜色色差计(购自南京铭奥仪器设备有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 蛋壳颜色的测定利用NR型蛋壳颜色色差计分别测定180、360、540日龄赤水乌骨鸡所产绿壳蛋的蛋壳颜色,测定工作分别在各日龄的前3 d进行,鸡蛋产后于12 h内测定。每枚鸡蛋检测3个部位(钝端、中端、尖端)[7,8],取平均值作为蛋壳颜色值,每个时期测定200枚鸡蛋。测定时,蛋壳颜色色差计上会显示△L*、△a*、△b*3个数值,只需统计△L*值[9]。△L*值代表亮度,其数值大小代表蛋壳绿色的深浅,数值越大,蛋壳越偏向白色,反之偏向黑色。蛋壳绿色与△L*值呈反比关系,即蛋壳绿色越深,△L*值越小。
1.3.2 数据统计采用Excel 2010统计3个产蛋期蛋壳颜色的数据,以“平均数±标准差”表示。采用SPSS 18.0软件对不同时期的蛋壳颜色进行单因素方差分析,Duncan法进行多重比较,分析差异显著性。利用GraphPad Prism 8.0.1软件制作蛋壳颜色柱状图。
2.1 不同产蛋期蛋壳颜色统计分析由表1可见:(1)赤水乌骨鸡蛋壳颜色△L*值变化范围为 38.16~59.95,变异系数范围为5.11%~6.35%(<10%),表明3个产蛋期的蛋壳颜色较均一。(2)180日龄变异系数最大,说明该时期蛋壳颜色均匀度较差。随着日龄的增加,变异系数变小,说明蛋壳颜色逐渐稳定。(3)180日龄时蛋壳颜色△L*值最小,蛋壳绿色最深,随着日龄的增加,△L*值增大,蛋壳绿色逐渐变浅。
表1 不同日龄蛋壳颜色△L*值统计
2.2 不同产蛋期蛋壳颜色差异性分析为了能更直观地表现3个产蛋期蛋壳颜色的变化规律,制作蛋壳颜色柱状图(见图1),并对3个产蛋期的蛋壳颜色数值进行差异显著性分析。结果表明,蛋壳颜色数值在540日龄极显著高于360日龄(P<0.01),360日龄极显著高于180日龄(P<0.01),各日龄阶段差异较大。
图1 不同日龄蛋壳颜色变化趋势注:各图柱数值比较,标记不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)
2.3 不同日龄蛋壳颜色分布统计分析由表2 可见:180日龄蛋壳颜色△L*值主要集中在50~51之间(59枚,占比29.5%),360日龄蛋壳颜色△L*值主要集中在52~53之间(64枚,占比32%),540日龄蛋壳颜色△L*值主要集中在52~53之间(62枚,占比31%),与图1呈现出的变化规律基本相同。从3个产蛋期来看,蛋壳颜色△L*数值在50~55之间有386枚,占总数的64.33%,表明赤水乌骨鸡所产绿壳蛋的蛋壳颜色△L*值主要集中在50~55之间。
表2 蛋壳颜色△L*值分布情况
赤水乌骨鸡180日龄蛋壳颜色△L*值为49.47±3.14,360日龄为52.39±2.93,540日龄为54.12±2.77,整个产蛋期蛋壳颜色△L*值主要集中在50~55之间。随着日龄的增加,蛋壳绿色逐渐变浅。
蛋壳中所含的色素决定了蛋壳颜色,而胆绿素是构成绿壳蛋的主要色素,在蛋壳腺中合成[10]。蛋壳的色素随着蛋壳的钙化过程逐渐沉积,在蛋壳形成的最后阶段达到最大沉积量[11]。蛋壳颜色是可遗传的,鸡蛋的绿壳性状由单基因(Oocyan,O)控制,且具有较高的遗传力[12]。目前研究发现,影响蛋壳绿色的主效基因已被确定为SLCO1B3基因。绿壳蛋的蛋壳颜色差异较大的原因很多,如:存在其他微效基因影响蛋壳颜色,也与饲养管理、营养物质、遗传等因素相关。本试验研究发现,赤水乌骨鸡蛋壳绿色深浅呈现出产蛋初期>产蛋中期>产蛋后期的规律,与此同时,产蛋初期蛋壳颜色均一度较低,随着日龄的增加,蛋壳颜色逐渐变得均匀。分析原因,可能是因为产蛋初期蛋壳色素分泌不稳定,造成蛋壳颜色不均匀,而产蛋中后期蛋壳色素分泌逐渐稳定,但随着日龄增大,由于机体衰老以及生理机能下降等原因,色素的分泌量逐渐降低,导致蛋壳绿色逐渐变浅。蛋壳颜色的形成涉及色素合成、转运和沉积等过程[3],为进一步揭示蛋壳颜色的形成机理,还需要加大对相关基因的研究力度,并利用相关分子生物技术进行验证。