2020年贵阳地区猪圆环病毒2型感染情况调查

张 海，邓珊珊，蔺利仲，李照伟，徐春志，杨 源，刘 艳，景书灏，袁 林

（1.贵阳市动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081；2.贵阳市清镇市农业农村局，贵州贵阳 551400；3.贵阳市乡村振兴服务中心，贵州 贵阳 550081；4.贵州省动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081；5.贵阳市息烽县农业农村局，贵州 贵阳 550300）

猪圆环病毒（Porcine circovirus, PCV）在分类学上属圆环病毒科圆环病毒属，是一种无囊膜单股环状DNA病毒，呈二十面体对称，是已知的最小的动物病毒之一[1]。根据抗原性和基因型不同，PCV分为4个血清学，分别是PCV1、PCV2、PCV3和PCV4[2]。PCV1对猪无致病性，1974年Tischer等首次在猪肾细胞中发现PCV1，该病毒不会造成猪细胞病变[3]。PCV2对猪具有致病性，主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾病综合征、猪呼吸道病综合征、母猪繁殖障碍等疾病。PCV3常见于患有繁殖障碍性疾病、呼吸系统疾病、多系统炎症、心肌炎和神经系统疾病的猪，然而也见于无明显临床症状的健康猪。尽管在多种患病猪中检测到该病毒的基因组，但是由于未进行完整的诊断研究，某些临床观察的相关疾病与PCV3的因果关系仍不能够得到完全证实。PCV4于2019年在患有严重临床症状疾病的猪只中发现，相关致病性研究比较少。目前报道能够引起猪发病的基因型主要是PCV2，我国于2000年在猪群中首次发现PCV2，此后PCV2在全国各地的养殖场不断的被报道。PCV2可以感染不同日龄的猪，感染仔猪的死亡率较高。该病在世界范围内均广泛流行，均对养猪业的发展造成比较严重的危害，我国农业农村部将猪圆环病毒病列为二类动物传染病。

PCV2的防控主要是采取疫苗免疫注射预防，但是由于不同地区毒株的变异较大，且猪场内PCV2呈现多种基因型并存的情况，导致疫苗免疫效果不佳。PCV2的感染猪只中常常与细菌或病毒混合感染，因此准确、有效的检测方法对PCV2的诊断非常重要。PCV2的检测方法有常规PCR、多重PCR、竞争PCR、套式（巢式）PCR、荧光定量PCR、数字PCR环介导等温扩增技术、ELISA、间接免疫荧光、免疫组织化学技术、免疫胶体金技术和病毒分离鉴定等[4]。荧光定量PCR结果直观、特异性强、敏感性比较好、技术也比较成熟，是实验室检测比较常用的检测方法。

本试验采用荧光定量PCR方法对2020年贵阳地区6个区（市/县）55个猪场采集287份病料（年出栏500～2 000头生猪养殖场35个采集182份病料，年出栏2 000头以上生猪养殖场20个采集105份病料）进行PCV2核酸检测，旨在了解PCV2在贵阳地区的流行情况，以期为贵阳市规模化猪场PCV2防控策略的制定提供参考数据，以降低PCV2的发病率，提高养殖场（户）经济效益。

1 材料与方法

1.1 病料

2020年1—12月从贵阳地区不同猪场无菌采集的疑似病料，保存于-70 ℃。共采集贵阳地区6个区（市/县）55个猪场287份病料，其中年出栏500～2 000头生猪养殖场35个采集182份病料，年出栏2 000头以上生猪养殖场20个采集105份病料。

1.2 试剂盒

猪圆环病毒2型荧光PCR检测试剂盒、核酸提取试剂盒均购自北京森康生物技术有限公司。

2 结果

2.1 疑似病料检测结果

从贵阳市6个区（市/县）的55个养殖场共采集287份病料组织，采用荧光定量PCR进行检测PCV2核酸（表1），PCV2核酸检出病料63份，检出率为21.95%（63/287），其中PCV2核酸检出率最高的是白云区（40.00%），其次息烽县、花溪区均为（30.00%）、开阳县（21.05%）、修文县（21.01%）、清镇市（18.42%）。

表1 疑似病料PCV2核酸检测结果汇总

2.2 不同养殖规模检测结果

从贵阳市6个区（市/县）的55个养殖场共采集287份病料组织，其中年出栏500～2 000头生猪养殖场35个采集182份病料，年出栏2 000头以上生猪养殖场20个采集105份病料，采用荧光定量PCR进行检测PCV2核酸（表2）。经过统计，年出栏500～2 000头生猪养殖场PCV2核酸检出率为28.57%（52/182），年出栏2 000头以上生猪养殖场核酸PCV2核酸检出率为10.48%（11/105）。由检测结果可知，年出栏500～2 000头生猪养殖场PCV2核酸检出率明显高于年出栏2 000头以上生猪养殖场。

表2 不同养殖规模PCV2核酸检测结果统计

3 讨论

本试验对贵阳地区6个区（市/县）55个规模化猪场进行了病原学流行病学调查，结果显示贵阳市发病规模化猪场核酸检出率为21.95%（63/287），其中PCV2核酸检出率最高的是白云区（40.00%），其次息烽县、花溪区均为（30.00%）、开阳县（21.05%）、修文县（21.01%）、清镇市（18.42%），年出栏500～2 000头生猪养殖场PCV2核酸检出率为28.57%（52/182），年出栏2 000头以上生猪养殖场核酸PCV2核酸检出率为10.48%（11/105）。说明PCV2仍然是危害贵阳市生猪养猪业发展的动物传染病之一，且年出栏500～2 000头生猪养殖场PCV2核酸检出率（28.57%）明显高于年出栏2 000头以上生猪养殖场（10.48%）。

在知网查阅分析近几年关于PCV2病原核酸检测的有关文献，其中段群棚等[5]采用PCR方法对2015年3月至2019年2月采集自广西14个地市规模猪场的1 114份样品进行PCV2检测，PCV2核酸检出率为38.96%。吴熠丹等[6]对2018年1—10月份收集福建省龙岩市、漳州市、厦门市、莆田市和泉州市的30个规模化猪场送检的流产死胎、流产母猪的血清和种公猪精液等230份样本进行PCV2检测，核酸检出率为60%。魏春华等[7]对2012—2018年采集的东南区域5个省份的疑似病料649份进行PCR检测，核酸检出率为41.9%。何世成等[8]采用荧光PCR方法对来自湖南省14个市州的821份临床病料和屠宰场猪淋巴结样品进行PCV2检测，PCV2核酸检出率为81.49%。杨润焕等[9]采用PCR方法对2016和2017年间来自云南省16个县市送检发病猪的肺、肾和淋巴结等组织病料和血液共计406份进行PCV2等病毒检测，PCV2阳性率最高为59.00%。李志贤等[10]采用荧光定量PCR方法对2018年3月至2019年12月在广西贺州市无害化处理场采集的病死猪样品共计352份进行病原学调查，其中PCV2核酸阳性率最高为53.98%。以上的数据表明PCV2全国各地均存在一定程度的感染，部分区域的养殖场感染率达到了60%以上，且感染情况有逐年加重的趋势，严重影响生猪养猪业的健康发展和养殖效益。

通过对贵阳市的疑似病料样本检测发现，养殖规模集约化程度越高的养殖场PCV2的核酸阳性检出率越低，因此提高养殖场防控技术尤为重要，特别是2018年以来在非洲猪瘟常态化防控的背景下，提高养殖场动物疫病综合防控技术已经迫在眉睫。养殖场要有“预防大于治疗”的防控意识，加强养殖饲养管理。猪场引种必须要选择无PCV2感染的猪场，坚持“自繁自养”和“全进全出”的原则。做好PCV2疫苗免疫接种，特别是养殖场有PCV2流行的，要制定合理的免疫程序并严格落实，定期开展免疫效果评估。做好养殖场消毒工作，对各养殖区域的生产用具和运输工具严格分开，定期消毒，禁止各区域养殖人员相互交叉。同时有条件的养殖场还可以开展动物疫病净化工作，提升生物安全防护水平。