探讨M-CSF、CA153、HPV联合检测在宫颈癌早期筛查中的临床意义

尤鑫，戚润鹏，温瑞，谢辉

(1.河南中医药大学人民医院/郑州人民医院 检验科，河南 郑州 450000；2.开封市疾病预防控制中心 慢病科，河南 开封 475000)

宫颈癌发生率较高，在女性恶性肿瘤排行榜中位居第二，仅次于乳腺癌，其中50 ～55 岁女性为此病高发人群；宫颈癌早期以阴道流血、月经期延长、阴道异常排液等非特异性症状为主要表现，这一特征导致部分患者确诊时病情往往已发展为中晚期。为及时遏制宫颈癌细胞扩散，尽早检测出该疾病并予以有效治疗是改善宫颈癌患者预后的关键因素，因此，临床十分重视对宫颈癌的早期筛查。巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)被认为参与多种恶性肿瘤形成发展活动，主要发挥肿瘤细胞生长、侵袭及转移的调控作用。此外，经调查研究发现，在宫颈癌患者中存在高危型HPV 的感染者达到90%，糖类抗原153(CA153)等肿瘤标志物常在生殖系统恶性肿瘤细胞学检测中呈现高表达。综合以上说法发现，宫颈癌进展过程中有多种物质参与，而综合分析以上细胞因子与宫颈癌病症的关系或能够为临床诊断提供参考依据。基于此，本研究对本院收治的192 例疑似宫颈癌患者实施M-CSF、CA153、HPV 联合检测，探讨其对于宫颈癌早期筛查的临床意义，报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年5月至2019年8月于本院诊治的192例疑似宫颈癌患者为研究对象，患者年龄在26 ～59 岁，平均(41.11±3.04)岁。173 例查体时出现白带异常症状，152 例查体发现阴道感染，191 例存在外阴瘙痒，94 例出现接触性出血。纳入标准：均为已婚女性。排除标准：存在子宫切除手术史或宫颈手术史；合并其他类型恶性肿瘤者；妊娠期女性；入组前3 个月内服用过激素类药物或于专科检查前自行冲洗过阴道。此研究经医学伦理会批准，192 例患者及家属均知晓研究方案并签署知情同意书。

1.2 方法

M-CSF 检测： 取患者空腹静脉血5 mL， 离心15 min，置于-85℃环境中保存，检测时取出。以酶联免疫吸附法进行M-CSF 检测，试剂盒由中国联科生物有限公司提供，M-CSF 平均浓度为231 pg/mL。

CA153 检测：取患者空腹静脉血，以2000 r/min的速度离心10 min，提取上层血清并采用全自动生化分析仪( 济南汉方医疗器械有限公司，鲁械注准20192220878，型号：HF-240)进行CA153 检测，相关试剂由罗氏公司提供。CA153 水平＞31.3 U/mL 可判定为阳性。

HPV 检测：于月经后3 ～7 d 进行检测，嘱患者检查前72 h 避免使用阴道药物或冲洗阴道，检查前48 h禁性生活。在阴道窥器协助下将专用采集刷置入宫颈管，旋转3 ～5 圈，获取标本并装入专用细胞保存液中，标注好患者信息。对标本进行离心处理，取底部沉淀物，以PCR- 反向点杂交法进行HPV 基因检测，检测23 个基因型，其中高危型为：HPV16、18、35、52等，低危型包括：HPV6、11、42、43、81、83。HPVDNA ≥1 pg/mL 可判定为阳性。

病理检查：对M-CSF、CA153、HPV 任一检查阳性患者进行病理检查，借助阴道镜获取可疑点组织标本，病理结果为正常或炎症则判定为阴性，宫颈不典型增生(CIN)和宫颈癌则判定为阳性，CIN 可依据程度不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度。

1.3 观察指标

以病理检查结果为金标准，计算M-CSF、CA153、HPV 单独检测及联合检测的灵敏度、特异度、诊断符合率、假阳性率、假阴性率等，并比较不同类型患者的M-CSF、CA153 表达水平和HPV 病毒载量。

1.4 统计学处理

2 结 果

2.1 观察患者的M-CSF、CA153、HPV 检测结果

192 例患者中，经病理检查确诊阴性患者135 例，阳性患者57 例，阳性患者中CIN Ⅰ度30 例、CIN Ⅱ度12 例、CIN Ⅲ度13 例、宫颈癌2 例。CSF 检测中呈阳性患者72 例，呈阴性患者120 例，其中假阳性40 例，假阴性25 例。CA153 检测中阳性患者88 例，阴性患者104例，其中假阳性49 例，假阴性18 例。HPV 检测中呈阳性患者90 例，阴性患者102 例，其中假阳性47 例，假阴性14 例。联合检测共检出阳性患者62 例，阴性患者130 例，其中假阳性10 例，假阴性5 例。

M-CSF、CA153、HPV 联合检测的灵敏度、特异度、诊断符合率均高于各项指标单一检测，假阴性率、假阴性率低于单一检测，差异有统计学意义(＜0.05)。见表1。

表1 M-CSF、CA153、HPV 单独检测及联合检测的诊断价值比较

2.2 观察不同类型患者的M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量的变化

CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ及宫颈癌患者M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量均高于阴性患者，且随着病情加重呈递增趋势，差异有统计学意义(＜0.05)。见表2。

表2 不同类型患者的M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量的变化

2.3 宫颈癌与血清M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量的相关性分析

宫颈癌与血清M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量均为正相关，血清M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量均为宫颈癌独立危险因素。见表3。

表3 宫颈癌与血清M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量的相关性分析

3 讨 论

宫颈癌是影响女性生殖系统功能的常见恶性肿瘤类型，该病呈慢性发展且逐渐呈现出年轻化趋势，早期仅以月经量异常、阴道感染等非特异性病理表现为主，考虑到宫颈癌由癌前病变发展至癌变需十年以上，因此该疾病属于一种可预防疾病，做好早期筛查及预防工作十分重要，有助于降低宫颈癌发生率，维护女性健康。提高早期筛查精准度的关键在于找准检测指标，若能够找到与宫颈癌病变相关的血清因子或病原菌，将其作为检测指标，则有助于提高诊断效率。

3.1 M-CSF、CA153 检测在宫颈癌早期筛查中的效能与不足

除HPV 亚型检测外，CA153、M-CSF 等指标也是判断患者病情及预后的重要指标。CA153 属于糖类抗原，被认为是胰腺癌、卵巢癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤进展的血清标志物，其在免疫功能损伤、恶性肿瘤细胞分化等活动中发挥了重要的推动作用，主要通过促进恶性肿瘤细胞与正常基底细胞分离、同时抑制T 淋巴细胞活性来加快肿瘤细胞扩散。本研究中，CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ及宫颈癌患者的CA153 指标水平显著高于阴性患者，且随着病情加重，患者的CA153 水平呈明显的递增趋势，说明糖类抗原水平的变化与早期宫颈癌有密切相关性，对于宫颈癌早期筛查有重要诊断价值，可为诊断工作提供参考。考虑到该指标容易存在误诊情况，特异性较差，部分乳腺癌、卵巢癌患者同样会出现此类抗原水平升高的迹象，单一检测效果不佳，应结合其他指标检测以进一步鉴别宫颈癌变。M-CSF 属于一种造血生长因子，广泛存在于骨髓腔内，对巨噬细胞的分化、死亡有调节作用，可促进肿瘤部位新生血管的形成，为多种恶性肿瘤的生长提供充足的血氧支持；有研究就该项因子水平与宫颈癌患者1年生存率的相关性进行分析后发现，M-CSF 达到临界值或预示着终点事件的发生。本研究结果可见，M-CSF 在CIN 患者及宫颈癌患者中高表达，其水平显著高于阴性患者，且患者病情越重，则M-CSF水平越高。这说明M-SCF 可为早期筛查宫颈癌提供重要参考，有效区分宫颈良性病变、癌前病变及宫颈癌，识别宫颈癌高危人群，其诊断价值良好。将M-CSF 检测结果与肿瘤标志物检测结果相结合，可起到互相印证的作用，同时评估肿瘤细胞增殖期间蛋白激酶、细胞分泌及合成情况。

3.2 HPV 在宫颈癌早期筛查中的效能与不足

宫颈癌相关研究指出，高危HPV 持续感染是该疾病的主要危险因素，高危型HPV 单一或混合感染人群集中在55 岁以上女性当中；作为宫颈癌的发生的必要条件，不同HPV 类型的癌变风险不同，我国高危HPV 感染亚型主要为HPV 16、18、31、58 等，对东莞地区妇女开展HPV 筛查检出13.64% 属于HPV 16 亚型感染者。宫颈癌形成之前的宫颈上皮病变会经历炎症、坏死、出血等多个过程，此过程中各类致病菌的表达会破坏宿主免疫机制，而作为乳头瘤病毒亚群中结构较简单的DNA 病毒，HPV 能够反映机体阴道微环境在炎症因子、致病菌感染影响下出现的免疫机制异常改变，尤其高危型HPV会随着基底细胞成熟分化过程而扩散至周围环境，于免疫系统收缩、宿主基因突变时于表层显露，呈现高表达。由以上分析和数据可见，在早期宫颈癌筛查中检测HPV具有重要意义。本研究中，HPV 检测中高危型HPV 感染的灵敏度、特异度分别为75.44%、65.19%，与病理学诊断的符合率为68.23%。可见HPV 检测对于宫颈癌的筛查有良好的临床价值。HPV 检测取材简单，通过采集刷获取宫颈细胞进行HPV 检测，可发现患者生殖系统内有无HPV 感染及HPV 基因类型，根据其HPV 病毒载量升高程度来评估其阴道微环境受到免疫机制紊乱影响的程度，明确高危型HPV 活化癌基因的情况，从而评估其宫颈癌发生风险，针对每位患者的宫颈细胞HPV 细胞感染特异性征象开展宫颈癌早期筛查。HPV 检测虽能够利用细胞特异性征象来协助临床明确患者有无宫颈癌基因活化情况，但此类感染在女性群体中较为常见，大部分患者可自行痊愈，持续性感染患者较少，单一将HPV 作为筛查指标易出现较高假阳性率。

3.3 M-CSF、CA153、HPV 联合检测在宫颈癌早期筛查中的意义

由以上分析及统计数据可见，M-CSF、CA153 水平检测及HPV 病毒载量分析分别能够针对宫颈癌肿瘤新生血管分布情况、恶性肿瘤细胞分化、致病菌感染情况等多个方面呈现出因子水平、病毒载量方面的变化，若联合分析各项检测结果，则能够同时了解宫颈癌变对机体阴道微环境、正常细胞数量的影响。本研究结果中，宫颈癌与血清M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量均为正相关关系，且M-CSF、CA153、HPV 联合检测的灵敏度、特异度、诊断符合率均高于各项指标单一检测，假阴性率、假阴性率低于单一检测(＜0.05)，以病理诊断结果为金标准，联合检测符合率达到92.19%，说明采用联合检测在宫颈癌早期筛查中有更高临床应用价值，可有效检出CIN 患者及宫颈癌。宫颈癌变的形成需要经历一个复杂的过程，而不同阶段的肿瘤细胞形态、增殖速度及邻近组织的受累情况均有所不同，全面分析M-CSF、CA153 水平及HPV 病毒载量检测结果，不仅能够了解细胞质内M-CSF 等促肿瘤生长因子的表达程度，明确肿瘤细胞周期性变化中依赖- 抑制蛋白激酶之间动态平衡的损伤程度，还能够了解宫颈癌变组织浸润后引发的宫颈鳞状上皮细胞受损情况，通过评估HPV 病毒扩散情况，全面评估患者发生宫颈癌的可能性。与单项检测相比，联合检测较能够避免单一检测的非特异性病毒复制、细胞分化类型影响，有效鉴别宫颈癌以及其他表现出HPV 感染、肿瘤细胞增殖的生殖系统肿瘤，保证从宫颈癌细胞增殖、分化的多项病理性活动中找到典型特征，从而为临床早期筛查提供全面且准确的依据。

综上所述，M-CSF、CA153、HPV 联合检测在宫颈癌早期筛查中有重要临床意义，可依据其水平变化判断患者病情发展情况，评估宫颈癌风险，为预防治疗早期宫颈癌提供指导。