血清CEA、NSE、PTN水平检测诊断早期肺癌的应用价值

李馥郁 田春艳 李淘淘

有研究显示，我国部分地区在2018-2020年间肺癌的平均发病率高达600/10 万人左右［1］，肺癌的发生缩短了患者总体生存时间，有着较高的远期致残率和病死率［2］。因此对于恶性肿瘤患者而言，肺癌的早期诊断对其的整体性治疗具有重要意义，可以为临床上肺癌根治性手术提供前提和契机。血清学肿瘤指标的研究，能够为早期肺癌的诊断提供依据和研究靶点。癌胚抗原（Car⁃cinoembryonic antigen，CEA）是特异性的肿瘤标志物，在癌细胞持续性扩增的过程中，癌细胞膜表面糖蛋白成分的释放可以显著促进CEA 的上升［3］；神经元特异性烯醇化酶（Neuron⁃specific enolase，NSE）主要由于神经源性细胞或者神经内分泌细胞，参与到糖酵解过程，近年来发现在不同类型的肺癌患者中，NSE 均有所上升［4］；人多效蛋白（Hu⁃man pleiotropic protein，PTN）是从牛子宫内分离出的肝素结合分裂蛋白，其能够结合肝素结合生长因子，调控肿瘤血管的形成［5］。为了揭示CEA、NSE、PTN 在肺癌患者中的表达情况，探讨CEA、NSE、PTN 在早期肺癌诊断过程中的价值，本次研究探讨CEA、NSE、PTN 的表达及其与患者临床病理特征的关系，并分析了其诊断的灵敏度和特异度。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取秦皇岛市第四医院2019年3月至2021年8月期间确诊的肺癌患者100 例（肺癌组），年龄平均（58.6±11.7）岁，男58 例、女42 例，病理学类型：腺癌73 例、鳞癌27 例；TNM 分期［6］：Ⅰ期患者24 例、Ⅱ期患者38 例、Ⅲ期患者33 例、Ⅳ期患者5 例；分化程度：高分化患者30 例、中分化患者38 例、低分化患者32 例。肺部良性肿瘤患者40 例（良性组），年龄平均（56.2±13.0）岁，男23例、女17 例；错构瘤19 例、肺部纤维瘤17 例、炎性囊肿4 例。选取40 例健康体检志愿者作为对照组，年龄平均（54.8±11.3）岁，男20 例、女20例。三组研究对象的年龄、性别比较，差异无统计学意义（P>0.05）。所有入试者均签署知情同意书。

纳入标准：①肺癌的诊断标准参考中国临床肿瘤协会（CSCO）编制的《中国原发性肺癌诊疗指南》2016年版中的标准［7］；②肺癌经胸部CT、病理学活组织检查证实；③参与本次研究前患者未接受放化疗、免疫治疗；④本研究获得医学伦理委员会的批准。排除标准：①转移性肺癌；②伴有免疫缺陷性疾病；③合并其他部位恶性肿瘤。

1.2 指标检测方法

采集本次研究两组患者的静脉血3 mL，3 000 r/min 离心10 min 后取血清，酶联免疫吸附法检测血清CEA、NSE 及PTN，96 孔板中加入CEA、NSE及PTN 单抗，将标本和标准品中的CEA、NSE、PTN 与单抗相结合，然后经PBS 液体洗涤5 min后，按照1∶500 的比例加入鼠标志的一抗10 μL，在温度4℃下放置过夜，然后再次经PBS 缓冲液洗涤3 次，每次5 min，加入鼠来源的二抗（1∶1 000）2 mL，在室温下放置2 h，再次PBS 液体洗涤5 min，最后加入显色底物，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm 处测OD 值。酶标仪购于美国GE 公司。试剂盒购于南京建成生物研究所。

1.3 统计学方法

本次研究使用统计软件采用SPSS 16.0 版本，计量数据表述采用（±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间采用F检验；计数资料用n（%）描述，用χ2检验；以病理学结果作为金标准绘制各项指标单独及联合应用诊断肺癌的ROC 曲线；P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者在血清CEA、NSE、PTN指标上的比较

肺癌组患者的血清CEA、NSE、PTN 水平均显著高于良性组、对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）；良性组和对照组的血清CEA、NSE、PTN 水平差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1 三组研究对象的血清CEA、NSE、PTN 指标上的比较（±s）Table 1 Comparison of serum CEA，NSE and PTN indexes among the three groups of subjects（±s）

表1 三组研究对象的血清CEA、NSE、PTN 指标上的比较（±s）Table 1 Comparison of serum CEA，NSE and PTN indexes among the three groups of subjects（±s）

注：与肺癌组比较aP<0.05。

组别肺癌组良性组对照组F 值P 值n 100 40 40 CEA（ng/mL）17.94±9.28 4.11±2.81a 3.98±1.33a 21.092 0.000 NSE（ng/mL）38.44±19.20 15.30±8.76a 13.96±6.34a 19.774 0.000 PTN（pg/mL）529.6±95.5 398.0±76.5a 381.3±68.0a 23.308 0.000

2.2 不同病理学特征肺癌患者的血清CEA、NSE、PTN 水平比较

比较肺腺癌与肺鳞癌患者的血清CEA、NSE、PTN 水平差异无统计学意义（P>0.05）；低分化、Ⅲ期+Ⅳ期肺癌患者的血清CEA、NSE、PTN 水平显著高于高中分化、Ⅰ期+Ⅱ期肺癌患者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 不同病理学特征肺癌患者的血清CEA、NSE、PTN水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum CEA，NSE and PTN levels in lung cancer patients with different pathological features（±s）

表2 不同病理学特征肺癌患者的血清CEA、NSE、PTN水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum CEA，NSE and PTN levels in lung cancer patients with different pathological features（±s）

参数病理类型分化程度TNM 分期分组鳞癌腺癌t 值P 值高+中低分化t 值P 值Ⅰ期+Ⅱ期Ⅲ期+Ⅳ期t 值P 值n 73 27 68 32 62 38 CEA（ng/mL）17.44±9.15 18.30±8.49-0.425 0.672 15.44±7.95 24.20±8.16-4.858 0.000 14.83±8.55 26.20±9.11-5.801 0.000 NSE（ng/mL）37.50±18.55 39.82±18.40-0.556 0.579 34.81±17.20 53.09±18.11-4.652 0.000 33.19±18.26 55.09±17.86-5.355 0.000 PTN（pg/mL）523.5±87.8 538.1±90.0-0.733 0.465 476.9±91.4 610.1±89.5-6.506 0.000 460.5±89.6 631.9±93.3-8.399 0.000

2.3 血清CEA、NSE、PTN 水平单独应用及联合诊断鉴别诊断肺癌的临床价值

血清CEA、NSE、PTN 联合应用鉴别诊断肺癌的AUC、约登指数、灵敏度、特异度高于单一诊断，误诊率、漏诊率低于单一诊断（P<0.05）。见表3，图1。

表3 血清CEA、NSE、PTN 水平单独应用及联合诊断鉴别诊断肺癌的临床价值Table 3 Clinical value of serum CEA,NSE and PTN levels in differential diagnosis of lung cancer

图1 ROC 曲线Figure 1 ROC curve

3 讨论

自身遗传易感基因的突变、长期吸烟、环境污染，均是促进肺癌发生的因素，尤其是在具有呼吸系统恶性肿瘤家族史的患者中，发生率更高［8］。临床上肺癌患者的总体生存时间一般不足36 个月，采取相应的综合性治疗措施后5年生存率也低于35%［9］。因此寻找到可靠、有效的早期诊断方式，对临床上肺癌患者的远期存活时间非常重要。

CEA 是上皮细胞恶性肿瘤分泌的细胞膜表面糖蛋白成分，其能够评估癌细胞的增殖活性和扩散风险。CEA 的上升往往与恶性肿瘤细胞的持续性DNA 扩增或者癌细胞的侵袭等病理过程有关［10］；NSE 主要参与到糖酵解过程中的甘油代谢过程，近年来相关研究发现，不仅神经源性细胞可以分泌NSE，同时在其他小细胞肺癌或者非小细胞肺癌患者中，均可出现NSE 的显著上升。上升的NSE 能够促进癌细胞变形能力的增强，提高癌细胞的浸润能力；PTN 是结合因子家族成员，其能够通过结合肝素生长因子，促进癌细胞的持续性增殖，抑制癌细胞的凋亡。同时PTN 还能够结合血管内皮细胞因子，提高肿瘤新生血管的形成能力。

对于肺癌患者的血清肿瘤指标的分析研究可见，在肺癌患者中，CEA、NSE 及PTN 的表达浓度明显的上升，且高于肺部良性肿瘤患者，差异具有统计学意义，这说明CEA、NSE 及PTN 的表达均能够参与到肺癌的发生发展过程。综合其他研究发现这可能与CEA、NSE 及PTN 的下列几个方面的病理性作用有一定的关系［11］：①CEA 或者NSE 的上升，能够促使肺泡上皮细胞变形能力的上升，从而提高了癌细胞的DNA 分裂速度；②PTN 的上升对肺癌组织新生血管的形成具有促进作用，从而提高了肿瘤病灶组织的血流灌注水平，进而参与了肺癌的病情进展过程。从张晓伟等［12］人的研究中也发现，NSE 的表达浓度在肺癌患者中可平均上升30%以上，尤其是在合并有明显的淋巴结转移或者远处转移的患者中，NSE 的表达上升更为明显。本研究结果提示了相关指标与肺癌患者的临床病理特征密切相关。分析其原因，这主要由于CEA、NSE、PTN 的表达均能够导致癌细胞分化成熟障碍，并能够促进癌细胞的扩散和转移，从而促进临床分期的进展。本研究并未发现CEA、NSE、PTN 的表达与肺癌患者细胞来源类型的关系，提示CEA、NSE、PTN 与癌细胞的分化来源并无明显的关系。但有研究者［13⁃14］并不认为NSE 的表达与肺癌患者的临床分期或者癌细胞分化程度有关，不同的研究存在结论间的差别，考虑可能与NSE 检测的灵敏度或者检测方法的差别有关。此外本次研究还探讨了CEA、NSE、PTN 的诊断学价值，发现单独指标诊断时AUC 均<0.7，其诊断的灵敏度较低，漏诊率和误诊率水平较高，而通过联合CEA、NSE、PTN 进行诊断，其诊断的AUC 达0.841灵敏度和特异性分别为74.00%和85.00%，诊断的可靠性较高，值得临床上参考采用。

本次研究的创新性在于探讨了CEA、NSE、PTN 单独或者联合诊断的诊断学价值。综上所述，在肺癌患者中，CEA、NSE、PTN 的表达明显上升，同时CEA、NSE、PTN 的表达与肺癌患者的临床分期和癌细胞分化程度密切相关。临床上通过联合CEA、NSE、PTN 进行早期肺癌的诊断，能够提高肺癌的整体诊断水平。