化疗对大鼠肺癌模型凝血功能及血管内皮功能的影响与作用原理分析

周亮，武铁军，张民峰，杨璞，毕荣欣

1.邢台市第三医院胸外科，河北邢台 054000；2.邢台市第一医院胸外科，河北邢台 054001；3.邢台市第三医院肝胆外科，河北邢台 054000

肺癌作为一种发生于人体肺部的恶性肿瘤，近年来，发病率与病死率呈现大幅度升高趋势，患者会表现出各种不适症状，对于人们健康有着较大的危害性。当前认为引发这种疾病的原因主要为遗传、吸烟以及不良环境等原因。该疾病主要可以通过X 线、支气管镜、细胞学、ECT 等检查诊断出。当前许多针对该疾病的治疗方法出现在人们的视野当中，可分为手术治疗与非手术治疗，手术治疗有肺叶切除术、肺段切除术或电视胸腔镜辅助性手术，非手术治疗有放疗、化疗等，目前，化疗为肺癌患者的首要治疗措施，在临床上得到了广泛认可和使用，且能对患者的临床症状带来明显的改善作用，但很多患者在接受化疗后会出现一些不良反应，比如，血管内皮损伤、凝血功能障碍等，将会对患者造成一定程度影响。为了探究化疗对于血管内皮以及凝血功能的影响，本文于2020 年1—12 月选取60 只大鼠，对其进行深入探究。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择大鼠60 只作为实验样本，随机分为甲组、乙组与丙组，均20 只，性别选择均为雄性，7 周龄,由上海市西普尔有限公司进行提供，体质量为210～260 g，将所有大鼠皆放置于干净笼子中进行养殖，保持室内温度在(22.0±1.9)℃，室内湿度为35%～40%，光照时长为12 h/d，饮水采用纯净水，避免因水资源影响实验效果。

1.2 方法

乙组与丙组采取肺癌建模，对其使用致癌碘油液。在建模前3 d，对各组大鼠实施青霉素和链霉素避免发生感染，前者为2 万单位，后者为45 mg，保障建模成功率。乙组与丙组注射3%的戊巴比妥钠麻醉，使其仰卧在手术台上，对其气管点滴0.1 mL 致癌碘油液，甲组仅实施碘油液。建模后每间隔1 周对大鼠进行X 线胸片，确保建模成功，丙组大鼠建模成功后则对其开始注射0.5 mL/kg 的环磷酰胺（国药准字H32020856）方法化疗。

1.3 观察指标

①对比3 组凝血功能：血浆纤维蛋白原（fibrinogen, FIB）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time, APTT）、凝血 酶 原 时间（prothrombin time, PT）、凝血酶时间（thrombin time, TT）。

②对比3 组血管内皮（vascularendothlialgrowthfactor, VEGF）指标。

③对比两组Toll 样受体4（toll-like receptor 4, TLR4）和细胞核因子-κBp65 （nuclear factor-κBp65, NF-κBp65）蛋白表达水平。

1.4 统计方法

采用SPSS 28.0 统计学软件处理数据，计量资料符合正态分布，以(±s)表示，多组间差异比较采用F值检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组大鼠凝血功能对比

甲组APTT、PT、TT 比乙组更高，FIB 低于乙组，丙组APTT、PT、TT 均比其他两组更低，FIB 高于其他两组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3 组大鼠凝血功能比较(±s)

表1 3 组大鼠凝血功能比较(±s)

2.2 3 组大鼠血管内皮功能对比

乙组大鼠血浆中VEGF 比甲组更高，丙组血浆中VEGF 高于乙组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 3 组大鼠血管内皮功能对比[(±s),mg/mL]

表2 3 组大鼠血管内皮功能对比[(±s),mg/mL]

2.3 3 组大鼠血管组织中TLR4 和NF-κBp65 蛋白表达水平对比

丙组TLR4 和NF-κB p65 蛋白表达水平高于甲组及乙组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 3 组大鼠血管组织中TLR4 和NF-κBp65 蛋白表达水平对比(±s)

表3 3 组大鼠血管组织中TLR4 和NF-κBp65 蛋白表达水平对比(±s)

3 讨论

随着当前社会不断发展，人们的生活水平得到了提高，生活习惯以及环境也发生了相应的变化。各种癌症发生率逐渐升高，肺癌作为一种发生于肺部支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤，发病率以及病死率在近年内呈现持续上涨的趋势，而非小细胞肺癌占据肺癌的比例已经超过80%，大部分患者在发现患病时通常已经处于中晚期，生存率较低，对人们的健康具有较大的危害[1-3]。目前认为引发此疾病的原因主要为吸烟、遗传因素、所处环境等，烟草中含有大量的化学物质，总含量超过3 000 种，其中多种化学物质都具有较强的致癌特性，据调查，大概有12%的患者患病原因都与长期接触各类化学物质有关，比如，焦炭炉、石棉等。临床症状表现为胸部异常隐痛、咳嗽，到了晚期还可能会出现咯血、呼吸异常、食欲降低、疲乏无力等反应[4-5]。

化疗作为肺癌的有效治疗手段之一，主要是通过化学药物抑制机体肿瘤细胞的增长，且将患者机体异常增生的细胞杀灭，能够有效地控制病情发展，防止癌细胞扩散，延长患者寿命，大部分癌症患者在治疗期间均需要化疗，效果良好，但是在治疗期间不仅会损伤肿瘤细胞，这类患者在经过治疗后极有可能会存在凝血功能异常情况，且化疗后还有可能对周围组织以及正常细胞造成一定的伤害，影响到免疫系统，表现出多种不良反应[6-8]。以腹腔肿瘤患者举例，其可能会因为消化道充血、水肿或消化酶分泌降低，影响到胃肠道功能，造成不利影响，患者会表现出现恶心、呕吐以及腹泻等症状，患者极有可能因此产生营养不良，食欲减退。并且对还会器官以及血管内皮细胞造成损伤，从而导致血液表现为高凝状态，并且不断加重，导致患者预后效果不佳[9-11]。

人体中的血管内皮具有保证血液流动功能，保证凝血系统顺利的功能，如若患者发生心脑血管疾病、感染或药物等相关危险因素影响，将会导致内皮细胞产生异常、受损，还会导致内皮细胞异常激活，从而使得凝血系统障碍[12-14]。根据不完全调查表明，TLR4/NF-κB 信号通路与血管内皮损伤存在密切联系，控制这个信号通路可以降低血管内皮功能异常情况，从而保证机体正常功能。当前，关于化疗对于肺癌患者的血管内皮功能影响的文献不多，还需要进一步研究其发生机制。基于此，本进行深入研究，选择多例大鼠作为实验对象，对部分大鼠实施肺癌建模，以TLR4/NF-κB信号通路作为一个重要切入点，分析作用机制，探究控制该信号通路是否可以避免血管内皮细胞发生凋零[15-16]。

为了分析TLR4/NF-κB 信号通路在肺癌患者当中的凝血功能以及血管内皮损伤的作用，对此进行研究，本文对经过化疗的大鼠主动脉内皮TLR4/NF-κBp65 地表达水平进行检测，结果表示，甲组TLR4、NF-κBp65 分别为（0.50±0.05）、（0.07±0.25），丙组TLR4、NF-κBp65 分别为（1.31±0.47）、（1.55±0.61），说明化疗极有可能导致大鼠血管内皮TLR4、NF-κB 信号通路发生活化，TLR4、NF-κB信号通路以往研究表示，恶性肿瘤患者自身就存在一定的血液高凝情况，化疗后将会使这种情况进一步加重，从上述试验中也可以看出，APTT、PT、TT 和FIB 属于临床中比较常用于凝血功能的指标，APTT、PT、TT 缩短，FIB 含量增加说明患者的血液当前正处于一个高凝状态，以上指标与患者预后以及血栓、肿瘤高凝状态有着一定的相关性[17-18]。

本文研究结果表示，甲组APTT、PT、TT 比乙组更高，FIB 比乙组更低，丙组APTT、PT、TT 均比其他两组更低，而FIB 高于其他两组（P＜0.05）。说明化疗对于大鼠的凝血功能肯定会造成紊乱，表现出高凝状态。VEGF 可以提升患者血管内皮细胞发生增殖、迁移以及血管新生，增加血管通透性，保障细胞增殖条件，为其创造一个舒适的环境，使其迅速增殖。根据结构后的试剂盒检测结果显示，乙组大鼠血浆中VEGF 比甲组更高，丙组相比于乙组血浆中VEGF 明显更高（P＜0.05）。这表现出化疗肯定会让大鼠血管内皮功能发生损伤，极有可能会导致肺癌进一步发展，影响患者预后。依据上述研究可以看出，丙组大鼠的血管内皮功能与凝血功能损害程度要远远大于其他两组，说明化疗的确可以对患者机体造成一定的伤害，可以据此进行后续研究，找出一种恰当的干预方法，减少机体损伤程度，帮助肺癌患者早日恢复健康。本次研究阶段，还存在一些不足之处，由于各种因素，所以本次研究所选病例较少，同时研究时间较短，因此研究结果与实际结果会有少量偏差，但是对整体结果不会产生影响。在未来实验过程中，将会避免上述因素，将会延长研究时间，提升研究病例，提升实验结果精准度，为医学发展献上一份绵薄之力。

综上所述，化疗将会导致大鼠肺癌模型的凝血功能发生异常，进一步影响到血管内皮功能，使其受到损害，推测可能与大鼠体内VEGF 含量被激活增加有关，可以据此进行后续治疗干预的研究，从而帮助更多的化疗患者，不仅关注肺癌患者，还应扩大范围，将更多接收化疗的恶性肿瘤患者均纳入试验中。本研究具有较高的借鉴意义，为后续这方面的发展奠定了坚实的基础。