外周血Treg、Th17及其比例在不同分期川崎病患儿中的变化及临床意义

陈 飞,陈永萍

陕西省宝鸡市第三医院儿科,陕西宝鸡 721004

川崎病(KD)是一种急性系统性血管综合征，多发生于5岁以下儿童，患儿多表现为发热、球结膜充血、皮疹等[1]。KD所致的冠状动脉损害(CAL)是儿童获得性心脏病常见的病因，严重威胁患儿的生命健康[2-3]。相关研究表明，KD的发生和发展与免疫系统功能紊乱密切相关，其中调节性T淋巴细胞(Treg)、辅助性T淋巴细胞17(Th17)作为细胞免疫的重要组成部分，也参与了KD的发生和发展[4-5]。目前，外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同分期KD患儿中的变化及对CAL的预测价值尚不清楚。本研究探讨外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同分期KD患儿中的变化及临床意义,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年9月至2020年10月本院收治的126例KD患儿作为研究组，另选取同期在本院体检的60例健康儿童作为对照组。研究组男71例,女55例;年龄8个月至8岁，平均(3.21±1.52)岁。对照组男38例,女22例;年龄6个月至8岁，平均(3.15±1.46)岁。两组研究对象性别、年龄等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会批准同意。

1.2纳入和排除标准

1.2.1纳入标准 研究组患儿符合《美国心脏病学会川崎病诊断指南》[6]中关于KD的诊断标准；对照组均为健康儿童；年龄6个月至8岁；患儿家属或监护人对本研究知情同意并签署知情同意书。

1.2.2排除标准 合并先天性心脏病或其他先天性疾病患儿；合并恶性肿瘤患儿；脑膜炎或神经系统发育畸形患儿；智力低下、广泛性发育障碍及癫痫者；入院治疗前已发生CAL；合并精神疾病者；合并呼吸系统疾病或感染性疾病患儿。

1.3方法

1.3.1临床资料收集 收集可能影响KD患儿CAL发生的有关资料，主要包括性别、年龄、KD类型、KD分期、IVIG治疗前发热持续时间、是否为IVIG抵抗、C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(Hb)、清蛋白(ALB)、肌红蛋白(Mb)、降钙素原(PCT)、外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17。

1.3.2CAL发生情况及分组 入院治疗2周后，统计CAL发生情况，依据《川崎病的冠状动脉损害》[7]中有关标准对CAL的发生进行判断，并经超声检查确诊。依据是否发生CAL分为CAL发生组和CAL未发生组。

1.3.3外周血Treg和Th17百分比检测方法 抽取所有研究对象空腹外周静脉血5 mL，肝素抗凝，采用流式细胞仪及其配套试剂盒测定，采用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶法测定Treg和Th17百分比，并计算Treg/Th17。

1.3.4治疗方法 本研究中所有KD患儿确诊后均静脉输注丙种球蛋白(IVIG，国药准字：S20003024，广东双林生物制药有限公司)2 g/kg，口服阿司匹林(国药准字：J20171021，拜耳医药保健有限公司)每次10 mg，4次/天，连续治疗2周。

2 结 果

2.1两组研究对象外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比较 研究组外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组研究对象外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比较

2.2不同KD分期患儿外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比较 急性期KD患儿外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢复期,差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 不同分期KD患儿外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比较

2.3KD患儿CAL发生情况及CAL发生组和CAL未发生组KD患儿临床资料比较 入院治疗2周后，126例 KD患儿共有23例发生CAL，CAL发生率为18.25%。CAL发生组急性期KD占比、IVIG治疗前发热持续时间、IVIG抵抗占比、PLT、PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于CAL未发生组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 CAL发生组和未发生组KD患儿临床资料比较[ n(%)或

组别nIVIG抵抗CRP(mg/L)WBC(×109/L)PLT(×109/L)Hb(g/L)CAL发生组234(17.39)87.65±12.5313.56±4.18396.75±42.18107.35±12.33CAL未发生组1034(3.88)83.26±10.7611.87±4.02351.02±32.46105.82±12.68χ2/t5.7691.7161.8103.6910.526P0.0160.0890.0730.0030.600

组别nALB(g/L)Mb(μg/L)PCT(ng/mL)Treg百分比(%)Th17百分比(%)Treg/Th17CAL发生组2336.57±5.1323.05±5.671.16±0.564.75±1.326.41±1.470.75±0.31 CAL未发生组10335.18±4.9221.83±6.080.68±0.373.85±1.065.28±1.250.59±0.28 χ2/t1.2160.8804.1274.0545.7676.676P0.2260.3800.0010.002<0.001<0.001

2.4影响KD患儿CAL发生的多因素Logistic分析 以KD分期(急性期=1，恢复期=0)、IVIG治疗前发热持续时间(连续变量)、IVIG抵抗(是=1，否=0)、PLT(连续变量)、PCT(连续变量)、Treg百分比(连续变量)、Th17百分比(连续变量)及Treg/Th17(连续变量)作为自变量，是否发生CAL(发生=1，未发生=0)作为因变量，进行多因素Logistic回归分析，结果显示,PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均为影响KD患儿CAL发生的危险因素(OR=2.740、2.724、3.340、3.235，P<0.05)，见表4。

表4 影响KD患儿CAL发生的多因素Logistic回归分析

2.5外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17对KD患儿CAL发生的预测价值 ROC曲线分析结果显示，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17预测KD患儿CAL发生的最佳截断值分别为4.21%、5.74%、0.66，AUC分别为0.746、0.682、0.758，见图1、表5。

图1 外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17对KD患儿CAL发生预测的ROC曲线

表5 外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17对KD患儿CAL发生的预测效能

3 讨 论

KD病因及发病机制目前尚不明确，其可能会导致系统、脏器损害，其中以CAL最为常见，严重者可引发冠状动脉瘤，致心肌缺血梗死，严重威胁患者的生命健康[8-9]。及早发现患儿是否发生CAL并及时进行干预，有利于改善患儿预后[10]。探讨外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同KD分期患儿中的变化及临床意义十分重要。

本研究发现，研究组外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于对照组，且急性期KD患儿外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢复期，由此提示，与健康儿童比较，KD患儿外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17存在异常偏高现象，本研究结果与徐振宇等[11]研究结果相近。本研究结果显示，入院治疗2周后，KD患儿CAL发生率为18.25%，CAL发生组KD急性期占比、IVIG治疗前发热持续时间、IVIG抵抗占比、PLT、PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于CAL未发生组。多因素Logistic回归分析结果显示，PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均为影响KD患儿CAL发生的危险因素，由此提示KD患儿CAL的发生率较高，需引起患儿家属及医护人员的注意，临床上需逐一控制各项因素对KD患儿的影响，以降低CAL的发生率。PCT是监测机体炎性反应的重要参数之一，可对炎症性疾病的临床进程、预后进行评价、预测[12-13]。CHEN等[14]研究指出，若机体存在严重感染时，PCT水平会异常升高。Treg主要来源于胸腺，主要通过分泌白细胞介素-10等炎症因子，直接或间接对抗原特异性免疫应答进行调节，与KD患儿疾病的发生和发展密切相关[15]。Th17的主要功能是促进炎性反应，周玉杰[16]研究表明，白细胞介素-17、白细胞介素-21等炎症因子可能促进KD患儿疾病的发生和发展。Treg/Th17发生变化，表明外周血Treg/Th17的平衡被打破，T细胞的免疫功能出现异常。ROC曲线分析结果显示，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17预测KD患儿CAL发生的最佳截断值分别为4.21%、5.74%、0.66，AUC分别为0.746、0.682、0.758，由此提示外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17预测KD患儿CAL发生的效能较高，可作为预测KD患儿CAL发生的重要参考指标。

综上所述，急性期KD患儿外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢复期，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17预测KD患儿CAL发生的效能较高，可作为预测KD患儿CAL发生的重要参考指标，建议在临床上对KD患儿进行外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17监测，若出现明显异常，应及时进行调控，以降低KD患儿CAL发生率。