感冒双解颗粒解热作用研究*

陈 良 徐晓琴 郭玉东 买迪娜 阿吉艾克拜尔·艾萨

(1.中国科学院新疆理化技术研究所, 乌鲁木齐 830011)(2.中国科学院大学，北京 100049)(3.新疆医科大学附属中医医院，新疆中药炮制研究重点实验室，乌鲁木齐 830000)(4.新疆维吾尔自治区中药民族药研究所，乌鲁木齐 830002)(5.北京市药品检验所中药成分分析与生物评价北京市重点实验室，北京 100035)

感冒双解颗粒为复方制剂，其主要功用为解表散寒、清热宣肺及解毒利咽，主要用于感冒风寒及肺胃郁热诸症，例如：流行性感冒、普通感冒、急性支气管炎、肺炎早期等。为了进一步研究该药药效作用机理，采用大鼠干酵母和家兔细菌内毒素解热模型对解热作用进行研究[1-3]。

1 材料和方法

1.1 实验动物

SD大鼠，70只，雄性，体质量180～200 g，实验动物生产许可证号：SCXK(京)2019-0001；大耳白家兔，60只，雌雄不限，体质量1.6～2.5 kg，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验动物生产许可证号：SCXK(京)2019-0033。实验已通过北京市药检所福利伦理审查，审查编号：bjll170652。

1.2 试剂、药品及仪器

安琪干酵母购自安琪酵母股份有限公司，生产日期 2015/03/28；生理盐水(生产批号：1407263201)和灭菌注射用水(生产批号：1409193203)购自石家庄四药有限公司；白凡士林(产品批号：20081005)购自南昌白云药业有限公司。感冒双解颗粒(浸膏粉)购自扬子江药业集团；阿司匹林泡腾片(规格：0.5 g/片，生产批号 1311043)购自阿斯利康制药有限公司。欧姆龙电子体温计(产品型号 MC-106B)购自欧姆龙工贸有限公司；天平型号：BS224S，PB602 N和WRY-2008；微机热原测温仪购自上海辽卓科贸有限公司；ZRY-2D智能热原仪购自天津市天大天发科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1样品配制:感冒双解颗粒每天人口服用量10.23 g(浸膏粉)，浸膏粉中生药材含量为12.12 g，临床人用剂量为0.17 g浸膏粉/kg。大鼠高、中和低给药剂量分别为临床等效剂量的14、7和3.5倍，给药剂量分别为2.4 g浸膏粉/kg、1.2 g 浸膏粉/kg和0.6 g 浸膏粉/kg。大鼠给药体积以1 mL/100 g计，配制浓度分别为：高剂量为0.24浸膏粉g/mL，中剂量0.12浸膏粉g/mL，低剂量为0.06浸膏粉g/mL。家兔高、中和低给药剂量分别为临床等效剂量的10、5和2.5倍。给药剂量分别为1.7 g浸膏粉/kg、0.85 g 浸膏粉/kg和0.43 g 浸膏粉/kg，家兔给药体积以5 mL/kg计，配制浓度分别为：高剂量为浸膏粉0.34 g/mL，中剂量为0.17 g/mL及低剂量为0.08 g/mL。

1.3.2干酵母模型的制备及感冒双解颗粒作用考察:雄性SD大鼠70只，体质量180～200 g，实验前3 d进行适应性测温，使大鼠适应操作，实验前1 d选用体温波动不超过0.3 ℃的大鼠, 实验当天分别测肛温两次，间隔30 min, 以均值作为其正常体温，其中若体温大于38.3 ℃或相邻两次体温差值大于0.5 ℃的动物淘汰。基础体温符合要求的动物分别皮下注射10%现配的干酵母混悬液(10 mL/kg)，于注射酵母菌后4 h 测量大鼠体温[4], 选择动物体温增高0.6 ℃以上者作为实验用(造模成功)[1]。按大鼠造模后4 h体温增高值进行拉丁方分组，分为6组，包括: 空白组、模型组、阳性对照组(阿司匹林0.25 g/kg)、感冒双解颗粒高(浸膏粉2.4 g/kg)、中(浸膏粉1.2 g/kg)和低(浸膏粉0.6 g/kg)剂量组(以下简称：高、中、低剂量组)，每组10 只动物。感冒双解颗粒样品组和阳性药均给予相应药物，给药体积为1 mL/100 g，空白组和模型组给予同体积去离子水。各组大鼠于给药后0.5、1、1.5、2、 3 h和4 h 分别测量大鼠肛温。计算每只大鼠各时间点体温与致热前基础体温的差值作为体温增高值(△℃=致热后某时间点的体温-基础体温)，结果见表1和图1。记录整理数据，并用SPSS统计软件进行多组样本的方差统计分析。

表1 感冒双解颗粒对干酵母模型大鼠给药前后体温变化(n=10)

图1 感冒双解颗粒对干酵母模型大鼠给药前后体温变化曲线

1.4 细菌内毒素模型的制备及感冒双解颗粒作用考察

2 结果

2.1 感冒双解颗粒对干酵母模型大鼠体温影响

各组大鼠皮下注射干酵母后，体温开始逐步升高，4 h后除空白组外，各组大鼠的体温均在升高0.6 ℃以上。给药后连续观察各组大鼠4 h内体温变化。在0～4 h内，空白组大鼠体温没有明显变化，阳性对照组(阿司匹林泡腾片0.25 g/kg)在4 h 内有效抑制了大鼠体温的升高，给药后0.5 h大鼠体温明显下降，在给药后2 h升温值已降至0.6 ℃以下。感冒双解颗粒也具有抑制大鼠体温升高的作用，高剂量组在给药后1.5、2、3 h及4 h能明显抑制模型大鼠体温升高，并与模型组相比具有差异极显著(P<0.01)，其降温幅度在0.6 ℃左右。中剂量组和低剂量组对大鼠体温抑制作用不明显，与模型组相比，差异不具统计学意义(P>0.05)，结果见表1。

给药后，各组大鼠的体温升高曲线如图1所示。与模型组相比，高剂量组和阳性对照组的升温曲线明显在模型组之下，中剂量和低剂量与模型组升温曲线交织在一起，这表明高剂量组和阳性对照组具有抑制大鼠体温升高的作用。从升温曲线进一步可以看出，阳性对照组升温曲线成斜向下的45°角下降，说明阿司匹林降温迅速，起效时间较早，而高剂量组升温曲线虽比模型组明显下降，但降温曲线相对比较平缓，说明感冒双解颗粒降温作用相对较为平缓，能持续一定时间。

2.2 感冒双解颗粒对细菌内毒素模型家兔体温影响

家兔耳缘静脉给予细菌内毒后0.5 h，家兔体温升高超过0.6 ℃。给药后连续观察各组家兔3 h内体温变化。在0～3 h内，阳性对照组在给药后1.5 h降温较为明显，2.5 h阳性对照组家兔体温基本恢复。感冒双解颗粒高、中剂量组在给药后0.5～2.0 h能够轻微抑制家兔体温升高，但与模型组相比无显著性差异(P>0.05)，低剂量组抑制家兔体温升高作用不明显，说明感冒双解颗粒对细菌内引起的家兔体温升高无明显抑制作用。

表2 感冒双解颗粒细菌内毒型家兔给药前后体温变化值(n=10)

由图2可以看出，各给药组家兔体温升高曲线较为集中，与模型组相比，无明显差异，仅阳性对照组在给药后1.5 h出现体温显著下降，而感冒双解颗粒高、中剂量组升温曲线略低于模型组，进一步说明感冒双解颗粒对细菌内引起的家兔体温升高无明显抑制作用。

图2 感冒双解颗粒对细菌内毒型家兔给药前后体温变化曲线

3 讨论

“发热”是临床上的最常见症状，是人体因致热原的作用而使体温调节中枢的调定点上移而引起的，可见于多种感染性疾病和非感染性疾病[6]。以非甾体类抗炎药(NSAID)为代表的解热镇痛剂是临床应用最多、最广泛的一类药物，但长期使用存在很多不良反应，如胃肠道系统、心血管系统、肝脏、肾脏、中枢神经系统损害等。当前，以中药为代表的天然药物因其副作用少而愈来愈受到医药界的接受和重视，因此选择中药进行解热镇痛研究开发很有必要[7]。

干酵母发热模型和细菌内毒发热模型均为经典模型[8]，干酵母发热模型是由于注射部位的局部溃烂引发的剧烈炎症反应，引起动物体温升高，动物全身表现与人类临床伴内脏或皮肤有明显炎症的发热类似。细菌内毒素模型则是由细菌内毒素作为致热原激活单核巨噬细胞产生内生致热原导致机体发热，从而引起动物体温升高。根据感冒双解颗粒对这两个经典模型的作用可以看出，感冒双解颗粒主要针对感染、溃烂等引发的感染性疾病引起的高热具有较好的解热作用，对于内源性细胞因子引起的体温升高作用不明显。通过本实验的研究为感冒双解颗粒说明书的制定及临床开发奠定良好的工作基础，其主要的解热作用机理还有待进一步研究。