一例副猪嗜血杆菌病的防治

刘燕云，段伦涛，王少娟，匡宝晓*

（1.山东华辰制药有限公司，山东 潍坊 261205；2.亚太中慧疾病预防控制中心，山东 潍坊）

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌引起的。该病可引起猪的多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎及败血症等症状[1]。副猪嗜血杆菌是一种革兰氏阴性短杆菌，形态多样，有15种以上的血清型[2-4]，其中5、4和13型是最常见的，不同血清型菌株之间缺乏交叉保护，并且还具有明显的地方性特征。病猪和带菌猪均可经过呼吸道和消化道传播本病。若猪群存在猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒、猪肺炎支原体等呼吸道病原体与副猪嗜血杆菌混合感染或继发感染时，会使猪只病情加重，死亡率增高[5-6]。

近年来有很多关于如何治疗副猪嗜血杆菌病的报道，同时也提出了很多对该病治疗的合理方案，但由于该病的多发性、病原的复杂性等问题，使得治疗困难，治疗效果也不佳，且治疗之后的预防效果多不好。随着抗生素使用时间的不断加长，会出现了不同程度的耐药性，从而导致用量的不断增大，可用量越加越大，治疗效果却逐步的降低，效果也越发不明显。泰地罗新具备 动物专用、用量少、一次给药全程治疗、吸收迅速、超长的消除半衰期、生物利用度高、低残留、使用安全等优点[7-9]，特别适用与猪、牛、羊呼吸道疾病的预防性治疗。

本文针对一猪场发现疑似副猪嗜血杆菌病，从猪场发病情况、诊断以及使用泰地罗新治疗后治疗效果评价等方面进行阐述，为泰地罗新的临床使用提供参考。

1 猪场情况及症状表现

2021年5月17日，接市场部反馈，位于潍坊市昌邑市的一客户猪群出现发病情况。走访发现，该客户存栏45头母猪，保育猪存栏200头左右，发病的猪主要是保育猪群，发病猪日龄在断奶后10～50 d，共有15头保育猪发病。病猪症状为喘，张口呼吸，普遍发烧在40～41.5℃，有3头已经出现后驱站立不稳和变红的严重表现。从猪只开始发病至兽医现场诊断已有5 d，期间使用氟苯尼考、恩诺沙星等药物配合黄芪多糖拌料使用，效果不佳，并有病情扩散趋势。

2 剖检变化

将后驱不稳和身体表面变红的2头猪带离猪场进行解剖，剖检可见胸腔内有较多的淡黄色液体，血液稀薄、未凝结；心脏和肝脏周围的区域有白膜；“包心”（图1）、“包肝”（图2） 病变明显；腹腔内腹膜与肠粘连；以浆液性、纤维素性渗出（严重的呈豆腐渣样）为炎症特征。各关节肿大，其他器官无明显的变化。

图1 猪副猪嗜血杆菌病“包心”病变

图2 猪副猪嗜血杆菌病“包肝”病变

3 常见实验室诊断方法及分析

3.1 病原体检测

病原体的检测是副猪嗜血杆菌病的经典诊断方法[10-11]。细菌的分离培养和鉴定，检测结果直观，但需要判断经验、检测周期长，并且此方法基于临床症状和剖检变化。显微镜下观察可见革兰氏阴性短杆菌，脲酶试验阴性，氧化酶试验阴性，接触酶试验阳性，可发酵葡萄糖、蔗糖、果糖等。

3.2 血清学检查

临床上用于检测抗副猪嗜血杆菌抗体的方法包括补体结合试验（CF）、间接血凝试验（IHA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）等[12]。血清学检测只能用于确定猪是否感染了副猪嗜血杆菌，不能作为诊断该疾病的基础。

3.3 分子生物学检测

常规PCR方法是实验室常用的分子生物学诊断方法。由于它的高灵敏度、高特异性、速度快和简便性，已被广泛用于副猪嗜血杆菌病的诊断。实时荧光定量PCR检测是一项新兴技术，是一种结合了光谱学和PCR技术的定量核酸检测技术[13]。可以定量加入模板DNA的拷贝数，反应时间短、灵敏度高，可以减少假阳性的可能性，特异性更高、检测结果更直观。环介导等温扩增技术（LAMP）灵敏度高、反应时间短、无需专用设备、操作简单，特别适合普通人员使用。

本病例采用PCR及RT-PCR技术，分别对副猪嗜血杆菌（HPS）、链球菌（SS）、经典猪瘟病毒（CSFV）、猪蓝耳病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪伪狂犬病毒（PRV-gE）6种常发病的病原微生物进行了核酸检测，PCR结果显示，检测的6种疾病中只有副猪嗜血杆菌为阳性，其他均为阴性，排除与这5种病的混合感染情况，该实验室诊断使用HPS引物序列，HPS-F（5-GTGATGAGGAAGGGTGGTGT-3）、HPS-R（5-GGCTTCGTCACCCTCTGT-3），反应条件54 ℃ 5 min，54 ℃ 30 s，59 30℃ s，72 ℃ 1 min，72 10℃ min，4 ℃保存，目的条带为822 bp。结果如图3。

图3 副猪嗜血杆菌病原PCR检测结果 M：DL2000；1：HPS；2：阳性对照；3：阴性对照

4 治疗

该病例经实验室检测并结合临床症状、剖检变化，最终确诊为副猪嗜血杆菌感染。确诊后紧急与客户沟通制定治疗方案。

4.1 紧急隔离

挑选发病猪，紧急隔离，避免副猪嗜血杆菌的传播。

4.2 彻底清洁及消毒

区分好洁净区及污染区，分工饲养，做好工具专用，走道及舍外区域使用火碱覆盖消杀，带猪区域可使用过硫酸氢钾复合粉喷洒消毒，消杀工作要彻底，第1天上午、晚上各一次，第3天重复消杀，以后每3 d消杀一次；

4.3 药物治疗

对隔离出的13头病猪使用泰地罗新注射液治疗，按照本产品1 ml/10 kg体重的量一次肌注，相当于按泰地罗新量4 mg/kg体重使用，观察使用效果。

5 治疗效果及分析

该猪场使用该方案后，一头45日龄病猪，因为后驱不能站立和严重感染最终不可逆死亡，其他病猪第1天呼吸道症状普遍减轻，只有3头仍体温在39.8 ℃左右，身体微红；第2天，11头猪无明显症状，仍有1头体温39.8 ℃，但身体红色褪去；第3天，12头猪均趋于稳定；第4天，又出现一头高烧身体发红个体，建议紧急使用氟尼辛葡甲胺注射液。最终12头病猪体温、体表、采食量均恢复正常。

由于该病例只是副猪嗜血杆菌的单一感染，没有混合继发其他病毒病，因此在使用泰地罗新后效果明显（混合感染蓝耳病毒、圆环病毒的猪场使用效果正在试验中），但是发病前期使用阿莫西林和恩诺沙星等抗生素时效果较差，这是副猪嗜血杆菌严重的耐药性造成的。

泰地罗新对引起猪呼吸系统疾病的病原菌尤其敏感，如胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌等[14-15]。对从欧洲各国（德国、法国、荷兰、匈牙利、西班牙、比利时、丹麦、波兰和英国）2005-2010年分离的349株猪呼吸系统病原菌和256株牛呼吸系统病原菌进行泰地罗新体外抗菌活性测定[16-17]，结果见表1。

表1 泰地罗新对猪、牛呼吸系统病原菌的 体外抗菌活性 （μg/ml）

6 结语

毋庸置疑，副猪嗜血杆菌病是当今养猪业面临的一大难题，其血清型多样，且各血清型之间交叉保护性较差。目前对于副猪嗜血杆菌感染压力较小的区域，可单纯使用药物预防，但是感染压力较大的猪场建议使用疫苗+药物的预防方案。在使用药物治疗时，建议对该猪场的致病菌进行药敏试验，选择敏感度高的药物使用。致病菌的严重耐药性是抗生素大量滥用造成的，泰地罗新作为一种新兽药在猪场使用，虽然该病例取得了良好的治疗效果，但是也建议在以后的治疗中进行对应的药敏试验。针对本病例的治疗进一步验证泰地罗新的临床给药推荐方案为：按照4mg/kg体重剂量单次肌内注射给药。泰地罗新注射液作为本公司的新产品，更多的田间试验数据正在整理中，但其初步成效已经显现。