血清CCL11、GPX3和Gal-1水平在分化型甲状腺癌诊断中的临床价值

左 华，周 冬，陈晓军

上海市宝山区仁和医院甲乳外科，上海 200431

甲状腺癌是一种常见的内分泌系统恶性肿瘤，流行病学调查显示，甲状腺癌占全身恶性肿瘤的1%～5%，其发病率每年约递增4%[1]。患者以女性居多，不同病理分型中以分化型甲状腺癌的预后最好，其5年生存率高达97%，早期确诊并规范化治疗分化型甲状腺癌成为改善预后的关键[2]。近年来甲状腺超声、CT和细针穿刺等手段在甲状腺癌的评估和初步筛选方面得到广泛的运用，但其对于甲状腺结节的良恶性判断还是有一定的假阳性率和假阴性率，同时，CT的辐射性和穿刺的创伤性降低了部分患者的依从性。随着分子生物学研究的深入，血清学指标在恶性肿瘤的诊断、监测和预后评估中越来越受到重视[3]。嗜酸性粒细胞趋化因子(CCL11)是重要的趋化因子，在结肠癌、胃癌和肺癌等恶性肿瘤中呈高表达，而在甲状腺癌中是否呈异常表达尚不清楚[4]；谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)为活性氧的清除剂，对细胞自由基损伤具有保护作用，在乳腺癌和胃癌的发生发展过程中具有作用[5-6]；半乳糖凝集素-1(Gal-1)是一种低聚糖结构，对细胞生长、分化、黏附和凋亡具有重要作用，在胃癌和甲状腺癌中呈高表达，对甲状腺癌的诊断有一定的临床价值[7]。本研究通过检测分化型甲状腺癌患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平，观察其在诊断分化型甲状腺癌中的临床价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2019年1月至2020年12月在本院经手术病理确诊为分化型甲状腺癌的患者97例为分化型甲状腺癌组，组织类型：乳头状癌66例，滤泡状癌31例；分化程度：高分化31例，中分化43例和低分化23例；淋巴结转移：有52例，无45例；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期65例，Ⅲ～Ⅳ期32例。纳入标准：均符合分化型甲状腺癌的诊断标准[8]；均经病理学确诊。排除标准：具有局部和全身性感染；合并桥本甲状腺炎、甲状腺弥漫性病变和甲状腺功能亢进等疾病；其他恶性肿瘤；肝、肾、肺等重要脏器功能不全；精神性疾病和智力下降者；妊娠期或哺乳期女性；合并血液系统和免疫系统疾病。选择同期在本院就诊的良性甲状腺疾病者65例为甲状腺良性疾病组，病理类型：结节性甲状腺肿5例，滤泡状腺瘤58例，甲状腺乳头状囊性腺瘤1例和甲状腺囊肿1例。选择本院同期体检健康者45例为健康对照组。3组年龄、性别和体质量指数(BMI)等基线资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。本研究经医院伦理委员会审核通过，所有受试者均签署知情同意书。

表1 各组基线资料比较[n(%)或

1.2方法

1.2.1血清标本留取及检测 入院后抽取所有受试者肘静脉血约5 mL，在室温下静置约20 min，然后以3 000 r/min离心10 min，离心半径为15 cm，去上清液约3 mL，放置于-80 ℃的冰箱中待测。使用酶联免疫检测仪(型号DG5033A，南京华东电子集团医疗装备有限责任公司)按照酶联免疫吸附试验测定血清CCL11、GPX3和Gal-1水平，所有试剂盒采用R&D公司产品，严格按照试剂盒说明书操作。

1.2.2观察指标 各组血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比较；分化型甲状腺癌组手术前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比较；血清CCL11、GPX3和Gal-1水平与分化型甲状腺癌临床病理资料的关系，诊断甲状腺癌的效能及各指标的相关性分析。

2 结 果

2.1各组血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比较 分化型甲状腺癌组血清CCL11和Gal-1水平高于甲状腺良性疾病组和健康对照组(P<0.05)，甲状腺良性疾病组CCL11和Gal-1水平高于健康对照组(P<0.05)； 而分化型甲状腺癌组血清GPX3水平低于甲状腺良性疾病组和健康对照组(P<0.05)，甲状腺良性疾病组GPX3水平低于健康对照组(P<0.05)。见表2。

表2 各组血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比较

2.2分化型甲状腺癌组手术前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比较 分化型甲状腺癌组手术后血清CCL11和Gal-1水平较手术前降低，而血清GPX3水平较手术前升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 分化型甲状腺癌组手术前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比较

2.3分化型甲状腺癌组血清CCL11、GPX3和Gal-1水平与临床病理资料的关系 分化型甲状腺癌组患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平与淋巴结转移情况、浸润深度和TNM分期有关(P<0.05)，而与性别、年龄、肿瘤最大直径、组织学类型和分化程度无关(P>0.05)。见表4。

表4 分化型甲状腺癌组血清CCL11、GPX3和Gal-1水平与临床病理资料的关系

2.4血清CCL11、GPX3和Gal-1对分化型甲状腺癌的诊断效能 血清CCL11、GPX3和Gal-1对分化型甲状腺癌均具有较高的诊断效能，3项指标联合检测的灵敏度为91.8%，特异度为92.3%，曲线下面积(AUC)为0.962，高于CCL11(Z=4.770，P<0.05)、GPX3(Z=4.585，P<0.05)和Gal-1(Z=4.137，P<0.05)单独检测，而CCL11、GPX3和Gal-1之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表5、图1。

表5 血清CCL11、GPX3和Gal-1对分化型甲状腺癌的诊断效能

图1 血清CCL11、GPX3和Gal-1诊断分化型甲状腺癌的ROC曲线

2.5分化型甲状腺癌患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平的相关性分析 分化型甲状腺癌患者血清CCL11(r=-0.625，P<0.05)和Gal-1(r=-0.716，P<0.05)水平与GPX3水平呈负相关，而血清CCL11水平与Gal-1水平呈正相关(r=0.647，P<0.05)。

3 讨 论

分化型甲状腺癌由于早期缺乏典型的临床症状，术前与甲状腺良性结节难以鉴别。现有的B超、CT和组织学活检单独使用均不能达到满意的鉴别良恶性的效果，存在一定的假阴性或假阳性率。影像学检查对于检出甲状腺结节的灵敏度较高，但对于结节良恶性鉴别的特异度较低。甲状腺结节细针穿刺作为细胞学检查手段虽被广泛使用，但也存在一定的假阳性和假阴性率，同时为有创操作，导致部分患者的依从性较差。随着分子生物学的发展，血清学指标往往较症状提前3～6个月出现异常，因此血清学指标的检测已经成为肿瘤早期诊断的重要方法。

CCL11是趋化因子的1种，其表达具有器官的差异性，位于人类染色体17q11，是趋化因子超家族成员的重要组成部分，在肿瘤组织和肿瘤患者的体液中均有异常表达，往往被用于肿瘤的诊断、监测和预后判断[9]。在1项对前列腺癌的研究中发现，前列腺癌组织中的CCL11水平明显高于癌旁组织和良性前列腺组织，体外实验证实CCL11能够通过使前列腺癌细胞的上皮细胞间质化，从而促进前列腺癌细胞的侵袭和转移能力[10]。在一项对胃癌的研究中显示，胃癌患者血清CCL11水平明显高于健康对照者，并发现血清CCL11水平与高TNM分期有关[11]。本研究结果显示，分化型甲状腺癌组血清CCL11水平也明显高于甲状腺良性疾病组和健康对照组，并且发现手术后血清CCL11水平较术前出现明显降低，说明CCL11参与分化型甲状腺癌的发生发展过程，其血清水平升高与分化型甲状腺癌具有明显的关系。本研究还显示血清CCL11水平与淋巴结转移情况、浸润深度和TNM分期有关，而与性别、年龄、肿瘤最大直径、组织学类型和分化程度无关，说明血清CCL11是甲状腺癌预后评估的重要指标，与文献[12]所报道的结肠癌患者血清CCL11基因表达水平升高与淋巴结转移和高TNM分期有关一致。本研究还发现当血清CCL11水平取截断值为62.84 pg/mL时，其诊断分化型甲状腺癌的灵敏度为63.9%，特异度为92.3%，AUC为0.835，说明CCL11对分化型甲状腺癌具有较高的诊断效能。

GPX3是一种细胞外糖基化酶，对细胞稳态的维持具有重要作用，通过对强氧化物的降解，清除氧自由基，起到抗氧化的作用，从而避免DNA的损伤，保持基因的完整性[13]。当机体GPX3水平降低时，清除氧自由基的能力下降，导致DNA损伤，从而参与肿瘤的形成过程，体外实验证实GPX3能够明显抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等生物学行为，从而抑制肿瘤的发展[14]。本研究显示，分化型甲状腺癌组血清GPX3水平明显低于甲状腺良性疾病组和健康对照组，分化型甲状腺癌患者术后血清GPX3水平较术前出现明显升高，说明GPX3是甲状腺癌的保护因子。本研究还显示，血清GPX3水平与淋巴结转移情况、浸润深度和TNM分期有关，而与性别、年龄、肿瘤最大直径、组织学类型和分化程度无关，说明血清GPX3水平与肿瘤的恶性程度具有密切联系，提示血清GPX3可作为甲状腺癌恶性程度的评价指标，与文献[15]所报道的血清GPX3水平与淋巴结转移情况、肿瘤TNM分期具有相关性一致。本研究结果还显示，当血清GPX3水平取截断值为93.57 μg/L时，其诊断分化型甲状腺癌的灵敏度为95.9%，特异度为72.3%，AUC为0.806，诊断效能较高，与文献[16]报道结果相符。

Gal-1是1种半乳糖结合家族蛋白，在细胞和组织中分布广泛，对细胞增殖和恶性转化具有明显的调节作用，对肿瘤细胞转移具有促进作用[17]。Gal-1能够与细胞外的糖类配体结合，促进肿瘤细胞与细胞外基质的黏附，对肿瘤细胞的迁移和侵袭具有促进作用。同时Gal-1能够诱导T淋巴细胞发生凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫逃逸，促进肿瘤的发生发展[18]。本研究结果显示，分化型甲状腺癌组血清Gal-1水平明显高于甲状腺良性疾病组和健康对照组，术后血清Gal-1水平较术前出现明显降低，说明Gal-1参与了分化型甲状腺癌的发生发展，与既往文献报道的血清Gal-1水平可以作为甲状腺良恶性疾病鉴别的重要指标的结果一致[19]。本研究结果显示，血清Gal-1水平与淋巴结转移情况、浸润深度和TNM分期有关，而与性别、年龄、肿瘤最大直径、组织学类型和分化程度无关。本研究结果还显示，当血清Gal-1水平取截断值为217.44 ng/mL时，其诊断分化型甲状腺癌的灵敏度为63.9%，特异度为98.5%，AUC为0.853，显示出对分化型甲状腺癌具有较高的诊断效能，与文献[20]报道一致。

本研究结果显示，血清CCL11、GPX3和Gal-1联合检测对分化型甲状腺癌具有更高的诊断效能，均高于各指标单独检测，说明3项指标联合检测具有某种互补性，能够增加对分化型甲状腺癌的诊断效能。分化型甲状腺癌患者血清CCL11和Gal-1水平与GPX3水平呈负相关，而血清CCL11水平与Gal-1水平呈正相关，进一步说明3项指标之间具有一定的相关性，其具体内在联系机制尚不清楚。

综上所述，血清CCL11、GPX3和Gal-1参与了分化型甲状腺癌的发生发展过程，联合影像学和细胞学检查有助于提高对分化型甲状腺癌的诊断效能。