浅谈气相色谱法检测果蔬中农药残留能力验证操作技巧及关键

俞 晓

乌鲁木齐市农产品质量安全检测中心，乌鲁木齐 830002

气相色谱法是测定果蔬中农药残留量常用的、成熟的检测方法，目前在我国地市级、尤其是县级农产品质量安全检测机构中广泛应用。以NY/T761-2008（第一和第二部分）检测标准为例,浅析如何将能力验证盲样考核工作顺利完成，更好的服务蔬菜水果中农药残留量测定、质量管理和技术管理工作。

1 选定能力验证考核的操作人员

1.1 进行能力验证时，人员是最重要的要素

一般分为操作人员和监督人员。操作人员对气相色谱法测定果蔬中有机磷、有机氯及拟除虫菊酯类农药残留的方法十分熟练，并且进行过内部盲样测试练兵，制定能力验证考核的实施方案，需确定操作具体人员，通过内部盲样测试训练后，则认为其具有能力通过能力验证的测试考核。

1.2 监督人员

多次参加并通过国家和省级能力验证考核的熟练人员，对整个验证过程有偏离的细节进行监督。

2 能力验证前首要是仪器设备维护

2.1 对气相色谱仪进行全方位的维护保养

更换进样隔垫、高惰性玻璃衬管、清洗进样针；老化色谱柱或换新色谱柱，尽量用新的或老化过的干净色谱柱。更换新的进样隔垫，以防止出现平行样品不平行等干扰检测结果的可能性；用高惰性衬管，将基质效应对检测数据的影响降至最低。

2.2 调试仪器、设备到最佳运行状态

能力验证前，将气相色谱仪的色谱条件调试好，如进样口、检测器、色谱柱温度等条件，用最优化的程序升温条件；检查空气发生器、氮气发生器、氢气发生器等设备保持最佳工作状态；将所用的刻度吸管、容量瓶进行校正，对所用到的玻璃器皿进行清洗、烘干。

2.3 农药标准溶液的配制

农药标准物质由农业农村部环境质量监督检验测试中心（天津）提供浓度为1000μg/mL，在考核的盲样到实验室前，将农药标液配制成10μg/mL储备液，再配制成一定浓度的标准工作液，上机建立标液图谱。

3 制备与能力验证考核样相同基质的样品

一般考核部门通知本次能力验证采用的蔬菜、水果的样品基质和空白样品制备筛选。若考核部门不提供考核空白样品（对照样品），可自行筛选出空白样品，以便用空白样品做加标回收质控。

4 考核样品的领取或接收

收到或领取的能力验证考核盲样，一般提供2组考核盲样，1组蔬菜盲样、1组水果盲样。其中1组蔬菜考核盲样4份，即1份蔬菜空白样品（对照样品），3份蔬菜平行考核盲样。1份水果空白样品（对照样品），3份水果平行考核盲样。

5 能力验证盲样处理的方法步骤及技巧

先从保温箱中各取出1份蔬菜和1份水果空白样品（对照样品），考核部门提供空白样品量不足，可用自行筛选的空白样品；各1份蔬菜和水果考核盲样，解冻后，按照NY/T761-2008检测方法标准进行前处理提取、浓缩、净化操作。

5.1 考核盲样定性，初步定量

解冻，称样前用称样勺充分搅拌混匀。若发放的考核盲样作业指导书中指出可按农残检测方法从提供的盲样中称样，可按照NY/T761-2008检测方法，称取25.0g的空白样品和25.0g考核盲样。

若发放的考核盲样作业指导书中指出不可分取称盲样，只称取25.0g空白样品，考核盲样直接按照考核部门提供的作业指导书中操作即可。

称取25.0g空白样品，取1份平行考核样品，直接转移倒入烧杯中，用量筒准确量取50.0mL乙腈（加乙腈量要准确）分多次洗空白样和盲样离心管，按照NY/T761-2008检测方法操作，提取、过滤、静置30min后，用10.0mL移液管吸取10.0mL乙腈层时，要准确。

均质、振荡速度、力度、时间把控统一，旋蒸或氮吹至近干，要点是氮吹或旋蒸近干，若还剩一滴，取下，用氮气流缓缓吹干；旋转蒸发温度在40℃，水浴氮吹温度在50℃，温度不要过高，不可吹过干[2]。

有机氯及拟除虫菊酯类农药残留过弗罗里矽柱，要点是过柱不能干，要依据方法依次淋洗小柱，否则易造成农药吸附，导致回收率偏低。流速要匀速，不可用外力强压下去，外力强压不能保证力量都均匀，会造成平行样品不平行的结果。定容5.0mL时，要准确，涡旋混匀时不要溅洒出来[4]。

上机测试完成后定性。用标液图谱模板做对比，确定盲样的添加农药名称。初步确定添加农药的量。即技术骨干参与数据分析，确定盲样中检出的农药参数及初步的含量。

基质配标液。单点校正，空白样前处理结束时以5.0mL溶剂定容，移入2mL进样瓶中后，剩余3mL液体，要用它匹配标液，就是配基质标液。结果计算时，用带基质的做标液，来计算盲样中的农药含量。

5.2 考核盲样准确定量

加标回收试验时，与剩2份盲样同时做加标及回收率的测定。定盲样中检出的农药参数后，从冰箱中取出剩余2份平行考核盲样，同时再称取与考核盲样相同基质的空白样品25.0g，作为加标质控样，添加与初定量浓度大致相同或非常接近含量的农药参数，有机磷与有机氯菊酯类同时加标，一次前处理就完成。按照上述初定量的前处理步骤和方法进行操作，至上机测定。

基质混合标准工作溶液配制。取1mL空白基质溶液氮气吹干，加入1mL相应质量浓度(与添加浓度一致)的混合标准溶液复溶,过有机微孔滤膜（0.22μm）。基质混合标准工作溶液应现用现配。

计算回收率。计算这个空白样品加标的回收率，若回收率在70%～120%之间，可确定结果。

计算盲样结果，再次数据分析，用基质混合标准工作溶液定量，数据校正，确定检测数据结果，填写原始记录及能力验证结果单，注意数字修约；上报原始记录、谱图及结果。

6 数据分析中出现问题及措施探讨

空白样品里检出有农残。空白样品与考核的平行盲样中农残含量一样或空白样品与考核的平行盲样中农残含量不一样，都对定性造成一定的干扰和影响，通常情况下，考核部门对盲样做过均匀性、稳定性测试，空白样品里已有的农残不会再添加。

平行样品不平行，前处理过程，积分错误或不合理造成。不能完全依赖仪器软件自动积分，积分错误可手动积分。

加标回收率低或过高。加标回收率低前处理过程有损失，加强日常练习，所有农药标液都进行加标回收练习，找出出现问题的环节；加标回收率高，基质效应的影响，使用新的高惰性衬管、基质标液定量等措施[5]。

标准曲线制作。先进行单点校正，估算盲样浓度；在线性范围内，制作标线浓度点要落在标曲的中间，最好与标线的某个点相近或重合。

基质配标液，即用考核样中空白基质来配制标液；考核样中空白样品用来做加标回收；用加标回收率来验证盲样结果[6]。