SF3B1基因在胰腺癌组织中的表达及其与肿瘤分期 分化程度的相关性

李 靖 王一卓

近年来，胰腺癌发病率呈上升趋势，且有年轻化倾向[1]。胰腺癌的发病机制目前尚未明了，有研究[2]发现，基因突变在胰腺癌的发生发展中有重要作用。 剪切因子3B亚基1(subunit 1 of splicing factor 3b，SF3B1)基因是u2小核核糖核蛋白复合物(small nuclear ribonucleoprotein，snrnp)的一个重要组成成分，是突变最为频繁的剪切因子编码基因[1]。SF3B1基因在很多癌症中表达，导致在3′剪接位点发生核糖核酸异常剪接[2]，SF3B1基因突变存在很多癌症类型[3]中，如乳腺癌、肝癌、增生异常综合征、白血病等。但探讨SF3B1在胰腺癌组织中的表达及其意义文献鲜有报道。为此，本文分析胰腺癌组织中的SF3B1基因表达水平及与胰腺癌TNM分期及不同分化程度的相关性，以判断胰腺癌病情的严重程度，并指导后期临床治疗，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2017年9月至2019年8月空军军医大学第一附属医院收治的胰腺癌且均接受了根治术治疗的48例患者临床资料，其中男31例，女17例；年龄48～82岁，平均(55.94±5.29)岁；肿瘤分化程度[5]：高分化16例、中度分化15例、低分化12例、未分化5例；TNM分期[6]：Ⅰ期(肿瘤直径<2 cm，无区域淋巴结转移)3例、Ⅱ期(肿瘤直径2.1～4.0 cm，紧靠肿瘤淋巴结出现转移)11例、Ⅲ期(肿瘤直径4.1～6 cm，第1站与第3站之间存在淋巴结转移，胰腺包膜与后腹膜出现浸润)16例、Ⅳ期(肿瘤直径>6.1 cm，第3站出现淋巴结转移，侵犯邻边内脏、后腹膜与前述静脉广泛浸润)18例；伴淋巴结组织29例、无淋巴结转移19例。所有患者在根治术中均切除癌组织及癌旁组织(距离癌灶组织≤2 cm)。纳入标准：①所有患者均符合《胰腺癌综合诊治指南(2018版)》[4]胰腺癌的诊断标准；②经手术病理标本确诊；③术前未行放、化疗治疗。排除标准：①合并心肝肾等重要脏器功能障碍者；②合并其他恶性肿瘤；合并免疫系统疾病、全身感染性疾病、血液系统疾病、肝肾功能障碍等其他基础疾病；③失访者。

1.2 方法 比较患者癌组织及癌旁组织标本SF3B1基因的阳性表达率，比较胰腺癌不同分化程度、不同TNM分期的SF3B1阳性表达率； 采用Pearson相关分析SF3B1基因阳性率与胰腺癌患者不同分化程度、TNM分期的关系。

1.2.1 SF3B1基因表达检测 采用荧光定量PCR法检测SF3B1基因表达水平。SF3B1基因表达阳性：细胞浆、细胞膜或细胞核中有棕褐色沉淀。

1.2.2 切片制备 实验标本取胰腺癌组织与癌旁组织，所有临床标本切除后经HE染色病理学确认性质，液氮冷冻后冻存在-80℃超低温冰箱中保存待用,操作人员严格按照免疫组化染色方法步骤进行操作。

2 结果

2.1 SF3B1基因在患者癌组织、癌旁组织中的阳性率比较 癌灶组织中的SF3B1基因阳性率77.08%(37/48)高于癌旁组织16.67%(8/48)，差异有统计学意义(χ2=35.179，P<0.001)。

2.2 不同分化程度的胰腺癌患者SF3B1阳性率比较 高分化患者的SF3B1阳性率高于未分化患者(χ2=4.012，P<0.05)，中分化、低分化与未分化患者的SF3B1阳性率对比，差异无统计学意义(χ2=0.089，P>0.05)，高分化与中分化、低分化患者SF3B1阳性率组间对比，差异有统计学意义(χ2=12.657，P>0.05)。见表1。

表1 不同分化程度的胰腺癌患者SF3B1阳性率比较

2.3 不同TNM分期的胰腺癌患者SF3B1阳性率比较 不同TNM分期的胰腺癌患者SF3B1基因阳性率对比，差异有统计学意义(χ2=22.923，P<0.05)。见表2。

表2 不同TNM分期的胰腺癌患者SF3B1阳性率比较

2.4 SF3B1基因阳性率与胰腺癌分化程度、TNM分期的关系 Pearson相关分析显示，SF3B1基因阳性率与胰腺癌分化程度呈正相关，与TNM分期呈负相关(P<0.05)。见表3。

表3 SF3B1基因阳性率与胰腺癌分化程度、TNM分期的关系

3 讨论

胰腺癌是常见的消化系统恶性肿瘤，具有高侵袭性，早期容易发生淋巴结转移。此类患者早期症状不典型，多合并黄疸、消瘦、腹部包块等，多数患者就诊时已合并远处转移或处于病情晚期，错过最佳手术治愈时机。因此，寻找确诊胰腺癌的生物学指标，分析其与胰腺癌发生、发展的关系，对于疾病早发现、早治疗及预后评估具有积极意义[7-8]。有研究[9-11]发现，对于胰腺癌的预后风险评估多基于细胞遗传学特性。 SF3B1基因在乳腺癌、骨髓增生异常综合征等癌症发生、发展中具有重要作用，可促进癌细胞的增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡[12-14]。本文探讨分析胰腺癌组织中SF3B1基因的表达情况及其与肿瘤分化程度、分期的相关性，旨为SF3B1基因在胰腺癌发生发展中的作用提供参考。

RNA剪切对维持蛋白质多样性起着重要作用，为真核细胞基因表达中重要生物学过程，普遍存在真核细胞中，可促成熟mRNA生成，剪切因子突变变化在基因序列调控，或因产生不同剪接变异体最终会导致遗传性癌症，剪接体成分突变、异常剪接活性为癌症表现的一个标志[15-16]。SF3B1处于染色体2q33.1，编码U2小分子核糖核蛋白复合体的核心成分[17]。U2-snRNP处于剪接体的催化部位，可识别并限定内含子-外显子连接处3剪接位点，剪切体经构想改变显露不同结构域，与mRNA特异性结合，而且参与mRNA前体剪接加工，起到调节剪接变异多样性[18]。董志雯等[19]报道的SF3B1基因在胰腺癌中的阳性表达率为4%。本研究显示，胰腺癌患者癌灶组织中的SF3B1基因阳性率(77.08%)高于癌旁组织(16.67%)(P<0.05)，表明癌组织SF3B1基因表达显著高于癌旁正常组织,提示SF3B1基因可能是胰腺癌基因诊断和治疗的靶点之一，但国内外并无相关研究，其结果的客观性仍需临床研究进一步证实。

本次研究还显示，TNM分期为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期的胰腺癌患者SF3B1阳性率分别为100.00%、36.36%、6.25%、0.00%，高分化、中分化、低分化、未分化的胰腺癌患者SF3B1阳性率分别为31.25%、13.33%、8.33%、0.00%。Pearson相关分析显示，SF3B1基因阳性率与胰腺癌分化程度、TNM分期的相关系数为0.368、 -0.548。表明SF3B1基因阳性率与胰腺癌患者分化程度呈正相关，与TNM分期呈负相关。由此研究提示，SF3B1阳性率越高，则疾病分化程度越高，临床可根据SF3B1阳性率水平评估患者病情严重程度。SF3B1基因作为分子学异常的指标，参与选择性剪接而诱发疾病发生，与胰腺癌病情严重程度相关，这可为后期临床开展治疗提供指导思路。

综上所述，胰腺癌患者癌旁组织中的SF3B1基因阳性率高于癌灶组织，SF3B1基因阳性率与胰腺癌分化程度呈正相关，SF3B1基因阳性率与胰腺癌TNM分期呈负相关。SF3B1基因可能是胰腺癌的抑癌因子，但本次研究仅对SF3B1基因的阳性率进行了研究，并未对SF3B1基因编码的蛋白水平进行研究，拟在后续研究中提升改进，以验证本研究结果。