骨髓增生异常综合征患儿血清LDH、β2-MG、SF和 维生素B12的表达及意义

张佩芸，蒋 旭,孙群英，李星慧，邓胜男

(川北医学院附属医院儿科，四川 南充 637000)

骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)是主要特征为髓系细胞分化、成熟异常及骨髓衰竭的髓系肿瘤[1]。儿童MDS患者发病年龄较低，病程较短，进展快，白血病转化率高。MDS患儿临床无特殊症状，大多表现为气短、乏力、面色苍白等贫血症状，严重者出现反复发热、出血及感染，并且可能发展成为急性髓系白血病，威胁患儿身体健康及生命安全[2]。血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)是重要的细胞代谢酶，当组织细胞被破坏时，LDH会释放入血，临床检测LDH水平能够了解机体细胞增殖与代谢的情况[3]。β2微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)是由血小板、淋巴细胞产生，其血清表达量在血液性疾病的评估中具有重要作用[4]。铁蛋白(serum ferritin，SF)是人体储存铁的主要成分，临床可用于检测铁代谢异常情况及机体铁储存水平[5]。同时SF也是肿瘤标志物之一，恶性肿瘤细胞能够合成分泌SF。维生素B12是造血原料的指标，也是人体合成DNA过程中的重要辅酶，能够在红细胞生成中促进DNA生成[6]。本研究通过对比分析MDS患儿血清LDH、β2-MG、SF、维生素B12水平的变化，探究其在临床应用中的意义，现报道如下。

1研究对象与方法

1.1研究对象

选取2019年2月至2020年6月川北医学院附属医院收治的72例MDS患儿为研究组，其中男41例(56.94%)，女31例(43.06%)；年龄为4～9岁，平均年龄(6.49±1.11)岁；体重为17～27kg，平均体重(21.18±2.28)kg；疾病分型为难治性贫血伴环状铁粒幼细胞增多4例，难治性血细胞减少伴多系发育异常17例，难治性贫血伴单系病态造血15例，难治性贫血伴原始细胞增多Ⅰ型16例，难治性贫血伴原始细胞增多Ⅱ型20例。纳入标准：①符合《血液病诊断及疗效标准》[7]中对MDS的诊断；②临床资料完整。排除标准：①合并巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、慢性失血者；②肝肾功能损害者；③临床资料不完整。另选取来院体检的健康志愿者30例儿童为对照组，其中男17例(56.67%)，女13例(43.33%)；年龄为4～9岁，平均年龄(6.34±1.01)岁；体重为16～27kg，平均体重(21.24±2.36)kg。研究组与对照组的性别、年龄、体重一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。该研究通过川北医学院附属医院伦理委员会审批，所有参加本研究的儿童及监护人均对本研究知情同意。

1.2方法

1.2.1检测方法

分别于研究组患儿入院第2天、对照组体检当天，抽取清晨空腹静脉血3mL，于离心机中以3 000r/min离心15min，离心半径15cm，留取上清液，保存至-80℃待测。应用西门子全自动生化检测仪，采用速率法检测LDH水平；应用美国雅培AEROSET型全自动生化分析仪，采用免疫比浊法检测β2-MG水平；应用罗氏Cobas 6000自动生化分析仪，采用电化学发光法检测SF、维生素B12水平。

1.2.2分组方法

应用国际预后积分系统(International Prognostic Scoring System，IPSS)[8]，根据骨髓原始细胞百分比、骨髓造血细胞染色体核型及外周血细胞减少系列数对研究组患儿进行计分，0分为低危组，0～1.0为中危Ⅰ组，1.0～2.5为中危Ⅱ组，≥2.5为高危组。

1.3统计学方法

2结果

2.1研究组与对照组的血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12水平的比较

研究组的血清LDH、β2-MG、SF水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)；研究组与对照组的维生素B12水平比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

2.2血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12诊断MDS的ROC曲线分析

绘制血清LDH、β2-MG、SF、维生素B12水平的ROC曲线，其中血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12联合检测的曲线下面积(AUC)最高(0.946)，因此，LDH、β2-MG、SF和维生素B12联合的诊断效能最高，见表2、图1。

表1 两组的血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12水平的比较Table 1 Comparison of serum LDH,β2-MG,SF and vitamin B12 levels between the two

表2 血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12诊断MDS的诊断效能Table 2 Diagnostic efficacy of serum LDH,β2-MG,SF and vitamin B12 in the diagnosis of MDS

2.3不同危险程度MDS患儿血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12水平的比较

在72例MDS患儿中，低危组、中危Ⅰ组、中危Ⅱ组的血清LDH、β2-MG、SF水平均明显低于高危组(P<0.05)，低危组、中危Ⅰ组均明显低于中危Ⅱ组，低危组明显低于中危Ⅰ组，差异均有统计学意义(P<0.05)；低危组、中危Ⅰ组、中危Ⅱ组和高危组的血清维生素B12水平比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

图1 LDH、β2-MG、SF和维生素B12诊断 MDS的ROC曲线Fig.1 ROC curves of LDH,β2-MG,SF and vitamin B12 in the diagnosis of MDS

表3 不同危险程度MDS患儿血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12水平的比较Table 3 Comparison of serum LDH,β2-MG,SF and vitamin B12 levels in children with MDS at different risk

3讨论

MDS是常见的血液系统疾病，儿童MDS患者易转化为白血病。MDS患儿会出现发热、感染、贫血、出血症状，易伴发各种并发症，如免疫性疾病、骨髓增生低下、骨髓纤维化等，也可能发展成为急性髓系白血病[9]，威胁患儿身体健康及生命安全。近年随着现代分子生物技术的发展，血清疾病相关因子在各类疾病的发生、进展及预后方面的作用逐渐被临床重视，能够辅助临床诊断疾病、评估治疗效果及预后，应用情况较好。

3.1血清LDH、β2-MG和SF水平在MDS患儿中的表达意义

LDH是一种存在机体所有组织细胞胞质内的糖酵解酶，当机体正常组织受到损伤时其水平会显著上升，在白血病、恶性贫血等恶性肿瘤疾病中的表达量也呈较高水平。MDS患儿细胞基因突变，酶蛋白调控基因表达异常，出现能量代谢异常及细胞损伤，并且MDS患儿均具有贫血及感染，炎性因子的释放也会造成细胞损伤，无氧酵解增强，代谢产物聚集促使LDH释放[10]。β2-MG是由多形核白细胞、血小板及淋巴细胞产生的低分子蛋白，是构成细胞膜上的组织相容性抗原的一部分，存在于人的血液、脑脊液及有核细胞膜上，机体正常时体内含量较低，但存在炎性反应或恶性肿瘤时，其水平明显升高，有作为肿瘤标记的价值[11]。SF是含铁丰富的蛋白质，其铁结合及储备能力均较强，能够参与细胞代谢、生成及免疫调控过程[12]。正常情况下SF水平稳定，除炎症外，肿瘤细胞合成SF、体内铁代谢发生障碍均可导致血清SF水平升高。MDS患儿血清SF水平升高与机体铁利用障碍、利用增加及异常SF结合有密切关系，MDS患儿的病态造血产生异常红细胞，进而出现铁代谢异常及利用障碍，同时MDS还具有无效造血及原位溶血，红细胞被过度破坏导致铁释放增加，加之MDS的恶性生物学行为，均会提升血清SF表达水平[13]。维生素B12是人体不可或缺的造血因子之一，也是人体合成DNA的重要辅酶，其在红细胞的生成中参与并促进DNA生成，影响血细胞的发育及成熟，当其缺乏时，会引起巨幼细胞性贫血[14]。本研究显示，MDS患儿血清LDH、β2-MG、SF水平均明显高于健康志愿者。刘元军等[15]的研究显示，MDS患儿血清LDH、可溶性CD44、SF水平较健康志愿者均显著升高，与本研究结果一致。但在本研究中，MDS患儿维生素B12水平与健康志愿者比较无显著性差异，可能是因为本研究样本量纳入较少，导致差异不明显，同时部分患儿就诊前接受过输血治疗。

3.2血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12的诊断效能

本研究显示，血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12联合检测的AUC最高，说明血清LDH、β2-MG、SF和维生素B12联合检测能够有效地辅助临床早期诊断MDS。另外，本研究显示，低危组、中危Ⅰ组、中危Ⅱ组的血清LDH、β2-MG、SF水平均明显低于高危组，低危组、中危Ⅰ组均明显低于中危Ⅱ组，低危组明显低于中危Ⅰ组，提示血清LDH、β2-MG、SF水平与MDS患儿病情严重程度有一定联系。分析其原因，MDS患儿的LDH水平升高与其染色体异常并存，病情较为严重的患儿基因突变与染色体异常更为严重，转化为急性白血病的风险更高。高危MDS患儿肿瘤细胞比例增高，过高的肿瘤负荷与肿瘤免疫导致体内β2-MG水平升高。同时，相对高危的MDS患儿肿瘤细胞分泌、感染、炎性因子释放等更为严重，红细胞破坏程度也更高，铁释放增加，SF水平升高。

综上所述，MDS患儿血清LDH、β2-MG、SF水平均明显升高，且与患儿病情严重程度有关联，LDH、β2-MG、SF和维生素B12联合检测能够辅助临床诊断MDS。