江西省抚州地区2016年至2020年活禽市场禽流感监测分析

唐荣，黄凡卿，武星红，朱智龙

（江西省抚州市疾病预防控制中心，江西 抚州 344000）

禽流感是由A型流感病毒引起的传染性疾病综合症。按病原体类型，禽流感可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类。高致病性禽流感具有病情危重、病死率高的特点[1-2]。1997年香港发现H5N1具有感染人的能力后，禽流感在世界各地相继爆发。2013年3月上海出现首例人感染H7N9禽流感病例，随后数月从华东地区扩散到全国多个省份。近十年中国持续发生人感染禽流感病例及家庭聚集性疫情[3-6]，且病毒型别多样。目前引起人禽流感的主要病原有H5N1、H7N9、H9N2及H10N8等亚型[7-9]，流行病学调查表明多数病例有家禽接触或活禽市场交易史[9-10]。活禽市场是人禽流感发生的重要场所[11]，禽流感监测对疫情早期预警和防控起重要作用[12]。本文分析抚州地区2016年至2020年活禽市场禽流感病毒的动态分布，为预防和控制人禽流感提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源 根据《江西省活禽经营市场人感染禽流感监测方案（2015版）》要求选取中心城区共8处，其余11个县区每县区各1～2处活禽市场作为监测点。标本采集情况为：崇仁县2016年至2020年作为省级监测点连续5年每个季度采集30份标本。2017年第一季度采集中心城区标本65份，各县区标本165份，崇仁县第四季度加采30份，2018年至2020年中心城区第一季度共采集200份。标本类型分为笼具表面擦拭、粪便、禽类饮水、宰杀或摆放禽肉案板表面擦拭和其他（清洗禽类的污水和脱毛机等）5类。2018年开始增加禽种类的分类，标本为鸡、鸭和鸽子。所有标本采集运送参照监测方案要求执行。

1.2 仪器与试剂 江苏硕世生物科技有限公司全自动核酸提取仪SSNP-2000A(32通量)及FluA、H5、H7、H9和H10核酸检测试剂盒（荧光PCR法）、Bio-Rad公司CFX-96荧光PCR仪。

1.3 实验方法 抚州市疾病预防控制中心对标本进行FluA检测，FluA阳性标本进一步检测H5、H7、H9和H10亚型。病毒核酸提取在生物安全Ⅱ级（BSL-2级）实验室进行，RT-PCR进行核酸检测。PCR结束后检测Ct≤35且曲线呈S型判为阳性，Ct＞38或者未检出判为阴性。H5、H7、H9和H10均为阴性而FluA阳性标本判断为A未分型。H5+H9、H7+H9和H5+H7+H9为核酸阳性的混合型。

1.4 统计分析 Excel 2013和SPSS 23.0软件进行整理数据和统计分析，组间率的比较采用卡方检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 活禽市场禽流感监测总体情况 不同年份阳性率差异有统计学意义（χ2=9.67，P＜0.05）。见表1。

表1 2016年至2020年抚州地区不同年份活禽市场禽流感监测情况

2.2 不同季度活禽市场禽流感监测 不同季度阳性率差异有统计学意义(χ2=81.20，P＜0.05)。见表2。

表2 2016年至2020年抚州地区不同季度活禽市场禽流感监测情况

2.3 不同标本类型活禽市场禽流感监测 不同类型标本阳性率差异无统计学意义(χ2=3.70，P＞0.05)。见表3。

表3 2016年至2020年抚州地区不同标本类型活禽市场禽流感监测情况

2.4 不同禽种类活禽市场禽流感监测 鸡、鸭和鸽子的阳性率依次为77.82%、70.18%和50.00%，不同禽种类标本阳性率差异有统计学意义(χ2=25.21，P＜0.05)。见表4。

表4 2018年至2020年抚州地区不同禽种类活禽市场禽流感监测情况

2.5 不同监测点活禽市场禽流感监测 中心城区和其他县区标本阳性率差异有统计学意义(χ2=8.05，P＜0.05)。中心城区大公路阳性率为95.00%，剪子口为69.70%，不同监测点阳性率差异无统计学意义(χ2=11.93，P＞0.05)。东乡区和广昌县FluA阳性率均为80.00%，南城县为33.33%，其他县区不同监测点阳性率差异有统计学意义(χ2=19.90，P＜0.05)，见表5。

表5 2016年至2020年抚州地区不同监测点活禽市场禽流感监测情况

3 讨论

本监测结果显示2016年至2020年抚州地区活禽市场FluA总阳性率为70.47%，连续5年阳性率高于本省及其他省市[13-16]。这表明活禽市场持续存在广泛的禽流感病毒污染，主要亚型为H9（34.81%）和A未分型（47.25%）。禽流感病毒基因分析表明2013年中国确诊的H7N9部分片段来源于H9N2。H9N2虽为低致病性禽流感病毒，但可在H7N9禽流感病毒基因重配和突破种间屏障引起人类感染中发挥重要作用[17]。有研究报道低致病性H7N4、H9N2引起人类感染甚至死亡[18-19]，H5N2、H7N7、H9N2可在禽间传播过程中变异为高致病性H5N1，不可忽视低致病性禽流感病毒的存在。H5和H5+H9占比和达到15.53%，提示要警惕H5的污染。2017年检出活禽市场H7共7例，当时江西省共报告人感染H7N9病例7例，全国多省市进入H7N9禽流感高发期。2013年至2016年家禽H7N9为弱病毒，2017年之后转为强致病性造成禽类大量感染并死亡。高致病性H7N9可以直接感染人类，环境标本中检出H7预警加强活禽市场禽类和环境治理及高危人群管理。

不同季度活禽市场禽流感监测显示冬季是禽流感高发季节，FluA阳性率第四季度（86.11%）最高，第二季度（42.00）最低，和李灵之2117份外环境标本禽流感病毒监测结果分析一致[20]。高致病性H5和H7在第一和四季度维持较高水平，应加强冬春季活禽市场监测及不明原因肺炎的实验室检测。不同类型标本阳性率差异无统计学意义,结果与邓立权[21]等研究相同。FluA阳性率粪便（74.55%）高于宰杀或摆放禽肉案板（71.43%）和笼具表面檫拭（69.06%）及其他二类标本。禽流感病毒可在禽类的消化道中增殖，并依靠空气、粪便和饮水等传播造成广泛的环境污染。被病毒污染的清洗水、脱毛机、笼具、饮水以及宰杀禽类案板等都含有病毒。5种类型标本存在较广泛污染，阳性率在67.59%～74.55%之间。H5在禽类饮水标本中污染较广泛，占比为22.83%，其他标本的H5和H5+H9占比和为30.61%。应加强各地活禽城市场水源管理，禽类饮水、污水和脱毛机等要及时更换和清洗，减少病毒对禽舍、饲料、饮水和案板的污染。家庭中应做到熟食和生食案板分开使用。不同禽种类活禽市场禽流感监测显示鸡类FluA阳性率最高，这和魏明敏[22-23]等相关报道一致。不同种类家禽对禽流感病毒易感性不同，家禽中以鸡和火鸡最强，成为重要的传染源。邓斐[24]等对人感染H7N4禽流感病毒分子溯源的研究从患者家养的鸡鸭中分离到7株高度同源的病毒并揭示了中国南方庭院式养殖模式为禽流感病毒的跨种族传播提供了便利。中国是家禽饲养大国，崇仁县有大型鸡、鸭养殖场，且多为农村散养方式，鸡、鸭和鸽子甚至家畜间的频繁接触可增加交叉感染和基因重配的机会。

国家卫计委网站公布数据显示2017年1月全国人感染H7N9禽流感发病数为192例，死亡79例，波及福建、云南、湖南、湖北和浙江等多个省份。受全国疫情影响，2017年1月抚州市疾控中心加大活禽市场监测力度，中心城区及各县区共采集标本230份，崇仁县在第四季度加采30份。不同监测点活禽市场禽流感监测显示中心城区FluA阳性率高于其他县区，阳性率差异有统计学意义，推测原因可能有：标本采集范围广、禽类饲养、宰杀方式不同、标本采集方式及各个市场进货来源不一等。中心城区8个活禽交易市场阳性率差异无统计学意义，相关调查资料显示活禽大多由同一家经销商供货。东乡区和广昌县FluA阳性率最高，其次为宜黄，乐安，黎川和资溪，南城县最低，不同县区之间阳性率差别较大。H5在其他县区占比高于中心城区，且宜黄县和崇仁县活禽市场污染较广泛。由于H5在禽类饮水标本中污染广泛，应当加强这部分地区禽类饮水和其他水源管理。

综上所述，抚州地区活禽市场存在广泛的禽流感病毒污染，应加大对活禽市场的消毒清洗工作，规范化无害化处理禽类污物。疫情期间采取“一日一清洁、一周一大扫除、一月一休市”模式，必要时可关闭活禽交易市场。同时应增强禽类饲养、销售等相关从业人员防范意识，尽量减少活禽接触及暴露的机会。建议有条件的农村改善饲养方式，不同禽类分开养殖以减少与其他禽类接触的机会。应进一步加强人和动物的禽流感监测，对疑似病例早发现、早诊断，降低人感染禽流感的风险。