诺丽酵素对海南文昌鸡生长和免疫性能的影响

邱红辉

（海南省东方市畜牧兽医服务中心，海南东方 572600）

利用中草药治疗动物疾病是我国劳动人民智慧的结晶，在长期的预防和治疗应用中，人们对中草药的“四性五味”和能治疗的疾病种类都积累了丰富的经验。中草药的组成成分复杂，其中能抗菌抗病毒的成分也很多样化。试验结果表明，某些中草药提取物对鸡的生长有促进作用，对鸡的免疫功能具有增强作用，能提高动物机体的免疫力，提高抵抗细菌和病毒入侵的能力，使动物的肉质口感更好。中草药制剂可以调节动物的免疫器官、免疫细胞和特异性免疫功能增强，还可以减少动物产品的药物残留和病原微生物残留[1]。

诺丽，英文名Noni，又名海巴戟、诺尼，是一种多年生阔叶灌木或小乔木，主要生长在南太平洋的岛屿上[2]，属茜草科植物，如菲律宾、澳大利亚、柬埔寨[3]。在我国主要分布在海南岛、西沙群岛和台湾岛[4]。诺丽通常生长在海滩上的灌木丛中，还有石头多的海边、路边、溪流和湿地中。丽的组成成分复杂多样，人们在诺丽中已发现了160多种有效成分。国外有人发现诺丽果中含有茜素、氨基酸、黄酮、亚油酸、胡萝卜素、维生素A、1-甲基醚、谷甾醇、生物碱、蒽醌、维生素C、萜类化合物、钾、莨菪亭（7羟基6甲氧基香豆素）等化学成分[5]。美国拉特格斯大学何池唐领导的研究小组发现诺丽果中含有脂肪酸酯、芦丁、环烯醚萜苷和黄酮苷等成分。詹姆斯杜克从中发现了5种维生素和矿物质，以及23种化学成分[6]。从以上科学研究成果可以得出，生物碱、酚类物质和有机酸是诺丽中含有的主要有效成分，酚类物质的主要组分是蒽醌[7]。己酸和辛酸是有机酸中最主要的组分[8]。水分含量占到诺丽果重量的90.0%，干物质主要为蛋白质、膳食纤维、可溶性固体；蛋白质含量占诺丽果汁干物质总重量的11.3%；异亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸构成了氨基酸的主要成分；钙、磷、钾和硫是矿物质的主要成分，干基重量的8.4%为矿物质，也有试验报道诺丽果中含有硒元素[9，11]。诺丽果中每100g干物质含有24～128mg维生素，主要成分是抗坏血酸[10]，除此之外,还含有维生素A[2]。诺丽果汁中主要的微营养成分是酚类物质，包括茜根定一甲醚（Rubiad in1methylEther）、羧基偶氮磺胺（Rubiazol）、蛋白质思钠（Nordamna canthal）、桃叶珊瑚苷（Aucubin）、茜素（Alizarin）、桑酮（Morindone）、赛洛宁（Xeron ine）、红芽大戟根含虎刺醛（Damnacantha）,以及其他的蒽醌糖苷类物质（Anthraqu inone coside）[10]。

世界范围内关于诺丽的药理学作用研究主要有以下几点[11]：（1）抑菌作用，诺丽果能显著抑制大部分细菌的生长繁殖。诺丽果中含糖类较多,在常温密闭条件下，这些糖类不会发酵分解为酸而腐烂，所以诺丽果很适合长途运输，不需要特殊的保鲜条件。（2）抗氧化作用，诺丽果实抗氧化活性很强，可阻止铜作用的低密度脂蛋白氧化过程。采用DPPH 自由基捕获分析诺丽果汁的抗氧化能力，发现每100ml果汁与140mg抗坏血酸及210mg没食子酸清除自由基的作用一致。（3）抗菌消炎作用，诺丽果汁能够抑制部分与胸部、肺和结肠癌细胞有关的环氧酶（COX1，COX2）的活性，同时表现出消炎的作用[12]。

诺丽已被美国药典收录,其中详细介绍了诺丽的增强免疫力、抗霉菌、抗病毒、杀菌、抗癌、抗过敏等功效[13]。现代医学研究表明，诺丽果汁中的多糖同时具有抗肿瘤作用和免疫调节作用，可以用诺丽果或者诺丽果与其他植物合用治疗多种疾病[14]。

海南文昌鸡主要生长在海南文昌、东方、定安等地，是海南传统优秀的地方鸡品种，其体型小巧灵活，脚爪短小，毛色金黄，肉香汤鲜，营养美味，具有色、香、味、型、营养俱佳，具有食物来源广、活泼好动、饲养性价比高等特点。笔者通过在海南文昌鸡日粮中添加诺丽酵素，研究其对海南文昌鸡的生长性能和免疫性能的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物及分组

本试验于2020年11月15日至2021年1月15日在海南省东方市大田镇大田村科技扶贫示范养鸡场进行。选取平均日龄70d、平均体重0.8kg、毛色和体型基本一致的文昌鸡母鸡100只，之前未注射过疫苗，随机分为4组：对照组（A组）和3个试验组（低剂量组B组、中剂量组C组和高剂量组D组），每组25只。4组试验用鸡所用的饲料配方完全相同，同日各组鸡所用的饲料重量完全相同，没有剩料，饲养管理方式也完全相同。A组鸡饲喂的饲料未添加诺丽酵素，B、C、D组鸡饲料中分别混合了50mg/kg体重、100mg/kg体重和150mg/kg体重的诺丽果发酵液。

1.1.2 试验药物

诺丽酵素，黑色液体，含量≥90%，由海南晶乐生物技术公司提供。新城疫Ⅳ系活疫苗（Lasota株），规格：500羽份/瓶，由广东大华农动物保健品股份有限公司生产。

1.2 试验方法

新城疫疫苗接种，颈部皮下注射，每只鸡注射0.5 ml。每日夜间清理剩料并称重，每日上午喂料，记录给料的重量，计算出每天各组鸡的平均日采食量。在鸡70、100和130日龄时，对鸡称重，记录重量，计算各组鸡的平均日增重、平均日采食量和料重比。在130d时采集每只鸡的抗凝血5ml，用高速离心机（12000 r/min）离心，测定各组鸡血清中的NDV抗体效价和细胞因子；再将鸡处死，立即完全剥离鸡的胸腺、脾脏和法氏囊，用干净的滤纸吸净这些免疫器官表面的污物，用电子天平准确称重，把每个器官的重量记录下来，与鸡的编号一一对应。按照以下公式分别计算胸腺、法氏囊和脾脏的免疫器官指数。计算公式：免疫器官指数=免疫器官湿重/鸡的体重×100%。测定NDV抗体效价的方法：采用微量血凝抑制试验（HI）来检测血清中的抗NDV血凝抑制抗体的效价。细胞因子的测定方法：用ELISA双抗夹心法，检测各组文昌鸡血清中的IL-2、IL-4、IFN-γ的含量。

2 结果与分析

2.1 诺丽酵素对文昌鸡生长性能的影响

由表1可知，70d时4组鸡的平均只重很接近，到130d时，A组的平均日增重均低于其他3组；A组的料重比均高于其他3组；D组平均日增重最大，但是C组的料重比最低，单位体重增重所耗费的饲料最少，养殖的经济效益最高。结果表明：诺丽酵素能有效地促进文昌鸡的生长发育，节省饲料，缩短了生长期，获得较高的经济效益。

表1 诺丽酵素对文昌鸡生长性能的影响

2.2 诺丽酵素对文昌鸡免疫器官指数的影响

由表2可知，C组的法氏囊指数、脾脏指数和胸腺指数均高于其他3组，A组的法氏囊指数、脾脏指数和胸腺指数均低于其他3组。结果表明：诺丽酵素能有效地刺激文昌鸡免疫器官指数提升，促进免疫器官的发育成熟。

表2 诺丽酵素对文昌鸡免疫器官指数的影响

2.3 诺丽酵素对文昌鸡血清中的细胞因子水平的影响

由表3可知，C组IFN-γ、IL-2、IL-4的浓度均高于A、B、D组；A组IFN-γ、IL-2、IL-4的浓度均低于B、C、D组。结果表明：诺丽酵素能有效刺激文昌鸡体内产生较高的细胞因子浓度，反映出鸡的免疫功能增强。

表3 诺丽酵素对文昌鸡血清中的细胞因子水平的影响

2.4 诺丽酵素对文昌鸡NDV抗体效价的影响

由表4可知，C组的NDV抗体效价均高于A、B、D组；A组的NDV抗体效价均低于B、C、D组。结果表明，诺丽酵素与NDV La Sota株弱毒苗合用能提高文昌鸡抗NDV抗体效价，促进抗体的产生，增强疫苗的免疫原性，与该疫苗有协同作用。

表4 诺丽酵素对文昌鸡NDV抗体效价的影响

3 讨论

本试验结果显示，当日粮中添加100mg/kg体重的诺丽酵素时，文昌鸡表现出的生长速度最快，综合料肉比最低，表明该比例的诺丽酵素添加，能有效降低饲料消耗，提高养鸡的经济效益。.

胸腺、法氏囊和脾脏是文昌鸡的非常重要的免疫器官，免疫应答主要依靠他们完成，免疫器官指数的数值多少与文昌鸡的免疫性能高低成正比。Rivas等[15]证实了胸腺、法氏囊及脾脏的重量大小与鸡的免疫功能强弱成正比，免疫器官的重量与动物机体免疫应答的功能强弱和抵抗外来病原微生物侵袭的本领密切相关，当免疫器官指数值增大，表明动物体内的体液免疫和细胞免疫功能提升，反之，免疫功能则降低。本试验结果表明，3种不同剂量的诺丽酵素添加到日粮中均可有效使文昌鸡的胸腺指数、法氏囊指数和脾脏指数变大，使文昌鸡的免疫功能增强，抵抗病原微生物入侵的能力增加。

机体免疫应答时，抗原刺激外周T淋巴细胞，使其发育成各种不同功能的细胞，这些细胞分泌多种细胞因子，干扰细胞的介导免疫，调节机体的体液免疫应答[16]。Th1细胞可以产生细胞因子IL-2和IFN-γ，细胞因子IL-2和IFN-γ能辅助T淋巴细胞活化、增殖、分化和成熟为免疫效应细胞，对抗原特异性识别和结合，产生免疫效应。Th2细胞可以产生细胞因子IL-4，细胞因子IL-4可以促进B细胞增殖、分化和成熟为抗体分泌的细胞。这些细胞因子的浓度高低与动物机体免疫功能强弱成正比。本试验结果表明，3种不同剂量的诺丽酵素均可明显提高文昌鸡血清中IFN-γ、IL-2、IL-4的浓度，说明诺丽酵素对机体的细胞免疫和体液免疫均有的促进作用。

抗体水平高低与体液免疫功能成正比，其作用是为机体抵御、清除和灭活入侵的病原微生物。抗体和特定的病原微生物结合，使巨噬细胞能识别、吞噬、清除它们[17]。日粮中添加诺丽酵素后，能显著提高文昌鸡体内的NDV抗体的滴度，接种后能快速诱导抗体的产生，3个剂量组的抗体滴度均明显高于空白对照组，表明诺丽酵素与疫苗合用能加强机体的体液免疫功能。

药物呈现的效果与给药剂量息息相关，药物的量效关系通常是一道坡度线，大多数药物在较少的剂量范围内，药效与药量多少呈正比，药物剂量过小就没有任何药物效果，增加药物剂量，药物效果显现并不断增强；当药物剂量超过极量后，药效不再增强，继续增加剂量，毒性反应增强，药效不断降低[18]。当药效出现最强时刻的药物剂量，就是最优的给药剂量。本试验结果表明：文昌鸡免疫器官指数、细胞因子和抗体滴度与诺丽酵素给药的剂量成正相关，中剂量（100mg/kg）的给药方式对文昌鸡的生长和免疫性能效果影响最明显。