邓荟芬,赵文河,龙 平,刘 哲
(1.湖南省生物机电职业技术学院,湖南 长沙 410127;2.山东省德州市农产品质量检测中心(德州市畜牧兽药检测中心),山东 德州 253015;3.平江县农业农村局,湖南 平江 414500;4.韶山市畜牧兽医水产服务中心,韶山 411300)
苎麻(Boehmeria nivea)是荨麻科苎麻属多年生作物[1],起源于中国中西部地区。在我国南方,高蛋白饲草缺乏,严重制约着畜牧业的发展。苎麻的生物产量大,蛋白质含量高,维生素含量丰富,年生物产量大,具有发展成为植物蛋白质饲料的优势[2]。但是,苎麻是一种传统的纤维作物,含有大量的木质纤维素,不利于动物消化吸收。有效降低苎麻体内的木质纤维素成为苎麻饲用的关键。苎麻可在青贮过程中得到安全保存,并且在发酵过程可有效降低木质纤维素。但是,苎麻含有大量木质纤维素,工业化加工困难,动物消化吸收困难,寻求能高效降解苎麻木质纤维素的方法至关重要。青贮是对苎麻安全保存的有效方法,并且在发酵过程中可以进行木质纤维素的生物降解。青贮过程中添加纤维素酶制剂,可以降解木质纤维素含量,提高家畜利用效率[3]。
李文杨[4]等人研究发现,纤维素酶可显著提高青贮中的可溶性碳水化合物(WSC)、粗蛋白(CP)、乙酸(LA)以及干物质(DM)的含量。张雪蕾[5]等研究表明,纤维素酶可显著降低苎麻青贮pH 值和中性洗涤纤维(NDF)含量,使其饲用价值得到改善。李莉等添加纤维素酶对象草进行青贮,发现添加纤维素酶后显著提高了WSC,显著降低了NDF、ADF 和pH值[6]。甄霆等利用不同添加剂对黑麦草青贮品质进行研究,发现添加纤维素酶能够显著降低NDF 和ADF的含量[7]。本试验将饲用苎麻与麦麸进行混合,使原料的含水量达到青贮要求,拟通过添加不同量的外源纤维素酶,降解混合青贮的中的粗纤维,提高苎麻青贮品质,为苎麻饲用推广提供一定的理论依据。
本试验选用苎麻品种湘饲纤兼用1 号,在湖南农业大学耘园基地栽培。2018 年5 月2 日收获,株高60 cm 左右,全株切碎至1~2 cm 备用。
麦麸由临泉县金禾面粉有限公司生产,蔗糖购自湖北惠林食品有限公司。
纤维素酶(10 000 U·g-1)由湖南尤特尔生化有限公司生产。
本试验采用单因素完全随机设计,分为4 个处理组,分别为添加蒸馏水10 mL 作为对照(Ⅰ),添加纤维素酶1g/kg(Ⅱ),添加纤维素酶2g/kg(Ⅲ),添加纤维素酶3g/kg(Ⅳ),每组6 个重复,纤维素酶溶解于10 mL 蒸馏水中后进行添加。
1.3.1 试验设计
将苎麻与麦麸按比例(80%苎麻+18%麦麸+2%蔗糖)混合后,按照试验方案,将不同添加量的纤维素酶分别溶于蒸馏水,均匀喷洒在青贮料上,搅拌均匀。用聚乙烯真空袋进行青贮,每袋300 g,6 个重复,青贮在室温条件下进行,于发酵30 d 后开包检测。
1.3.2 感官评定
试验30 d 后将青贮开封,用四分法取出样品,对样品颜色、茎叶结构状态、气味进行观察并记录。青贮饲料的发酵品质依据德国农业协会青贮感官评分法进行评价,评分标准见表1[8]。
表1 青贮饲料感官评定标准
1.3.3 营养成分及青贮品质测定
参照《饲料分析及饲料质量检测技术(第4 版)》方法进行干物质(Dry matter,DM)、粗脂肪(Ether extract,EE)、粗蛋白(Crude protein,CP)含量检测[9]。可溶性碳水化合物(Water-soluble carbohydrates,WSC)利用蒽酮比色法[10]进行测定。酸性洗涤纤维(Acid detergent fiber,ADF)、中性洗涤纤维(Neutral detergent fiber, NDF)、酸性洗涤木质素(Acid detergent lignin,ADL)含量利用范氏洗涤纤维法[11]进行测定。
pH 值利用pH 计(雷磁PHS-3C型)进行测定[12];采用苯酚-次氯酸比色法对氨态氮(Ammoniacal nitrogen,NH3-N)进行测定[13];气相色谱法测定挥发性脂肪酸(Volatile FattyAcid,VFA)[14];各处理评分参照VScore 评分体系及V- Score 分数分配计算标准[15]。
由表2 可知,对照组得分15 分,处理Ⅰ组得分18 分,处理Ⅱ组和处理Ⅲ组得分均为19 分。3 个处理组青贮饲料等级为优,对照组为良;与对照组相比较,在气味上来看,3 个处理组苎麻青贮饲料都有较重的香味;从结构上来看,对照组及处理组的青贮苎麻茎叶结构完整,无黏结成块现象;从颜色上来看,3 个处理组青贮饲料颜色和青贮前的颜色较为接近,优于对照组。
表2 各处理苎麻青贮饲料感官评分差异比较
由表3 可知,与对照组相比,处理Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组三个处理组的DM含量、WSC 含量和CP 含量比对照组显著升高(P<0.05);处理Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组三个组的NDF 和ADF 含量比对照组显著降低(P<0.05),处理Ⅱ组和处理Ⅲ组两个处理组的NDF和ADF 含量比处理Ⅰ组显著降低(P<0.05);与对照相比,处理Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组三个组的ADL 含量显著降低(P<0.05);与对照相比,处理Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组三个组的CF 含量显著降低(P<0.05)。
表3 各处理青贮饲料营养成分含量
由表4 可知,对照组及各处理组pH 值都小于4.2,符合优良青贮的要求;处理Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组三个组的LA 含量比对照组显著增加(P<0.05);三个处理组的AA 含量比对照组显著降低(P<0.05);三个处理组与对照组的PA 含量无显著差异;对照组及各处理组中均未检测到BA;处理Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组三个处理组的NH3-N/TN 值比对照组显著降低(P<0.05);三个处理组AA+PA 含量均低于0.6%,NH3-N/TN 值低于6%,且没有检测到BA,通过计算V-Score 评分都高于95 分,其中处理Ⅱ组得分最高,青贮品质最好。
表4 各处理青贮饲料发酵品质比较
人们通常以青贮中营养成分含量作为衡量其品质的重要指标。我们的研究发现,与对照组相比较,添加纤维素酶三个处理组的DM含量有了显著提高。这与马慧[16]等的研究结果一致。三个处理组的WSC 含量比对照组显著提高,说明青贮中添加纤维素酶可以增加WSC 的含量。郑晓灵等[17]研究也表明纤维素酶可显著提高甘蔗梢青贮中的WSC含量。与对照组相比较,三个处理组的CP 含量都有了显著的提高,这与花梅[18]等的研究结果一致。李莉[6]等研究发现添加0.05%纤维素酶对象草进行青贮可以降低ADF 和NDF 的含量,但是效果不显著,推测与添加量较少有关。
纤维素酶有降解NDF 和ADF 的作用,可以把植物细胞壁的纤维素分解为单糖和双糖[19],促进了木质纤维素的分解,为青贮发酵提供了更多的底物。我们的研究表明,与对照组相比,3 个处理组LA 含量显著升高,AA 和NH3-N/TN 值显著降低。魏晓斌[20]等利用纤维素酶对苜蓿进行青贮,研究发现纤维素酶苜对苜蓿原料可溶性糖不足有很好的弥补作用,显著提高LA 含量,显著降低AA 含量。王玉荣[21]等研究表明,在稻秸青贮发酵过程中添加纤维素酶可以显著降低NH3-N/TN 值,与我们的研究结果基本一致。
我们还发现,与处理组Ⅰ相比较,处理组Ⅱ和处理组Ⅲ的ADF 和NDF 含量显著降低,但是处理组Ⅱ与处理组Ⅲ之间无显著差异。推测纤维素添加量在一定范围内对ADF 和NDF 的降解呈正相关,但超过一定值后无显著影响。
添加纤维素酶可降解木质纤维素,提高LA 含量,降低AA 含量和NH3-N/TN 值,从而提高苎麻青贮的发酵品质、营养品质。从木质纤维素的降解效果和经济效益角度出发,纤维素酶试验的添加量以2 g/kg 为最佳处理。