血清NGF、TGF-β1和PTGFR在子宫内膜异位症患者中的水平变化及诊断价值

王兰兰

复旦大学附属妇产科医院妇科，上海 200090

子宫内膜异位症(EMT)是妇产科的常见疾病，随着人工流产和剖宫产手术比例的增加，EMT的发病率逐年增加，受到学者们的高度关注[1]。EMT的临床表现个体差异较大，且发病后往往没有特异性的临床表现，早期筛查具有一定的难度。目前EMT的诊断主要根据临床症状、B超和妇科检查等综合评估，而确诊则要依靠病理检查，但病理检查为有创检查，不能多次进行，患者的接受度不高，导致临床应用有限[2-3]。血清学指标在EMT诊断中的应用越来越受到学者们的关注。神经生长因子(NGF)是一种神经细胞调节因子，对疼痛具有调节作用，是反映疼痛严重程度的指标[4]。转化生长因子β1(TGF-β1)是一种多功能抗炎因子，对炎症和纤维化具有调节作用，在EMT发病的多个环节中也发挥重要作用[5]。前列腺素F2α受体(PTGFR)在促进子宫平滑肌收缩方面具有一定作用，还与痛经的发生密切相关[6]。本研究检测了EMT患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平，探讨了3项指标对EMT的诊断价值，以期为临床诊疗工作提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2019年1月至2020年12月在本院就诊的EMT患者117例作为EMT组，年龄24～45岁，平均(38.63±2.36)岁；病程1～48个月，平均(5.73±1.83)个月；美国生育学会修正的EMT分期法(r-AFS)分期Ⅰ～Ⅱ期35例，Ⅲ期37例，Ⅳ期45例。选择同期在本院进行体检的健康女性45例为对照组，年龄22～45岁，平均(38.19±3.29)岁。纳入标准：EMT组患者均接受腹腔镜或者开腹手术病理检查确诊为EMT；临床资料完整。排除标准：6个月内使用过影响本研究检测指标的激素类药物；合并血液系统疾病、恶性肿瘤、感染性疾病；存在意识障碍和精神性疾病；妊娠期或哺乳期女性。两组年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有研究对象对本研究均知情同意，并签署知情同意书。本研究经本院医学伦理委员会审核通过。

1.2方法

1.2.1痛经严重程度评价 采用视觉模拟评分法(VAS)对EMT患者的痛经严重程度进行评价，评分为0～10分，0分无疼痛，10分为疼痛难以忍受，分数越高疼痛越明显。根据VAS评分将痛经严重程度分为轻度(1～3分)、中度(4～6分)和重度(7～10分)，117例EMT患者中，轻度39例，中度48例，重度30例。

1.2.2血清NGF、TGF-β1和PTGFR检测 抽取研究对象肘静脉血约5 mL，在室温下静置20 min，然后3 000 r/min离心10 min，离心半径为15 cm，取血清放置于-80 ℃的冰箱中保存待测。采用酶联免疫吸附试验检测血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平，所用试剂盒购自美国R&D公司，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3观察指标 比较EMT组与对照组血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平；比较不同r-AFS分期EMT患者的血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平；比较不同痛经严重程度EMT患者的血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平；分析EMT患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平之间的相关性；分析血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平对EMT的诊断价值。

2 结 果

2.1两组血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平比较 EMT组血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平比较

2.2不同r-AFS分期EMT患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平比较 r-AFS Ⅳ期患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ期患者，Ⅲ期患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同r-AFS分期EMT患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平比较

2.3不同痛经严重程度EMT患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平比较 重度痛经患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平明显高于中度和轻度痛经患者，中度痛经患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平明显高于轻度痛经患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 不同痛经严重程度EMT患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平比较

2.4EMT患者血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平间的相关性分析 相关性分析结果显示，EMT患者血清NGF水平与TGF-β1、PTGFR水平呈正相关(r=0.636、0.816，P<0.05)，血清TGF-β1水平与PTGFR水平呈正相关(r=0.729，P<0.05)。

2.5血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平对EMT的诊断价值 ROC曲线分析结果显示，血清NGF、TGF-β1、PTGFR联合检测诊断EMT的灵敏度为83.8%，特异度为99.5%，曲线下面积(AUC)为0.982，明显高于血清NGF、TGF-β1和PTGFR单独检测。见表4、图1。

表4 血清NGF、TGF-β1和PTGFR诊断EMT的效能

图1 血清NGF、TGF-β1和PTGFR单独及联合检测诊断EMT的ROC曲线

3 讨 论

EMT是一种雌激素依赖性疾病，多发生于育龄期女性，其发病率呈逐年上升趋势。EMT的病理特点为子宫内膜无限制生长，侵犯临近的器官并远处转移，具有治愈困难、复发率较高等特点。EMT形成过程大致分为细胞增殖、分化和侵入3个过程，临床诊断较困难[7]，因此，寻找具有准确性强、灵敏度高的诊断指标具有重要的临床价值。

本研究发现，EMT组血清NGF水平明显高于对照组，并且随着EMT患者r-AFS分期的升高和痛经严重程度的加重逐渐升高，说明NGF与EMT发生、发展和痛经严重程度具有密切关系，与SZUBERT等[8]的研究结果类似。现已知NGF广泛分布于机体的各个器官和组织中，靶器官中的NGF水平与交感神经和感觉神经在靶区的密度具有明显的相关性[9]。NGF可以作为致痛物质直接与细胞表面的受体结合，激活机体编码血管活性肠肽、神经肽Y和降钙素的相关基因的表达，增加感觉神经末梢的兴奋性，参与EMT的发生、发展过程[10]。1项动物实验发现，敲除NGF表达相关基因后的小鼠神经纤维消失，疼痛感知能力明显降低，给予外源性的NGF后小鼠出现温度、痛觉过敏[10]。本研究中，血清NGF取截断值为64.92 ng/L时，诊断EMT的灵敏度为80.3%，特异度为86.7%，AUC为0.885，说明血清NGF对EMT具有较高的诊断效能。

本研究结果显示，EMT组血清TGF-β1水平明显高于对照组，并且随着EMT患者r-AFS分期的升高和痛经严重程度的加重而逐渐升高，与 LEE等[11]的研究结果相似。EMT常常表现为病灶周围大量的淋巴细胞浸润，免疫球蛋白和补体沉积，自然杀伤细胞(NK细胞)活性降低，免疫功能紊乱，导致机体的炎症介质释放和细胞因子激活，而TGF-β1是与免疫功能紊乱相关的重要细胞因子，在EMT发生、发展过程中具有重要作用[12]。有研究显示，血清TGF-β1水平升高时，主要影响的是机体的免疫功能，可明显降低NK细胞和细胞毒性T淋巴细胞的活性，导致免疫逃逸，逃避免疫监视，使异位子宫内膜不能被识别，导致异位子宫内膜出现类似恶性肿瘤的侵袭性[13]。此外，TGF-β1还能够引起纤维母细胞聚集、纤维蛋白沉积和胶原蛋白沉积，引起盆腔粘连，参与EMT的发生、发展。本研究发现，当血清TGF-β1取截断值为92.22 ng/mL时，其诊断EMT的灵敏度为82.1%，特异度75.6%，AUC为0.842，具有较高的诊断效能。

本研究发现，EMT组血清PTGFR水平明显高于对照组，并且随着EMT患者r-AFS分期的升高和痛经严重程度的加重而逐渐升高，说明PTGFR参与了EMT的发生、发展过程。子宫内膜是前列腺素合成的重要部位，前列腺素F2α(PGF2α)是一种强烈的血管收缩剂，可以通过与PTGFR结合引起子宫平滑肌的强烈收缩，导致子宫血流量降低，局部组织缺血缺氧，从而引起疼痛反应；其还可以直接对子宫传入神经纤维产生刺激，进一步加剧疼痛反应[14]。另一方面，炎症因子可以刺激局部子宫内膜产生PGF2α，增强伤害感受器的敏感性，导致痛觉过敏[15]。本研究发现，当血清PTGFR取截断值为212.48 ng/mL时，诊断EMT的灵敏度为80.3%，特异度为80.0%，AUC为0.863，说明血清PTGFR对EMT具有较高的诊断效能。本研究还发现，血清NGF水平与TGF-β1、PTGFR水平呈正相关，且血清TGF-β1水平与PTGFR水平呈正相关。上述3项指标均与疼痛、免疫具有一定联系，NGF激活中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞等炎症细胞，导致大量的炎症介质释放，从而引起PGF2α和TGF-β1等细胞因子的大量释放，进一步加强伤害感受器的敏感性，刺激机体大量表达PTGFR，促进EMT的发生、发展，加重痛经。3项指标联合检测诊断EMT的灵敏度为83.8%，特异度为99.5%，AUC为0.982，明显高于NGF、TGF-β1和PTGFR单独检测，说明联合检测可以提高对EMT的诊断效能。

综上所述，血清NGF、TGF-β1和PTGFR水平与EMT的发生、发展及痛经严重程度有关，3项指标联合检测对EMT具有较高的诊断效能。