变应性鼻炎患者Th17/Treg细胞比例与病情严重程度的相关性分析

张辰，李斌，郑沙盟

变应性鼻炎是目前我国人群中较为高发的呼吸系统疾病[1-3]。变应性鼻炎是人体接触特定的变应原之后，由体内IgE所介导的鼻黏膜非感染性疾病，若干种类的免疫活性细胞和细胞因子均参与发病过程[4-6]。在变应性鼻炎患者的发病早期，及时识别患者的病变严重程度，并采取积极的治疗措施，控制症状，被认为是变应性鼻炎的疾病控制准则[7-8]。近年研究结果显示，Th17 和Treg细胞免疫失衡是导致病变出现的主要原因之一，变应性鼻炎患者体内出现了Th17 细胞的过度激活和Treg 细胞表达水平的降低或者缺失[9]。本研究探讨变应性鼻炎患者Th17/Treg 细胞比例与病情严重程度的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 病例纳入标准 纳入标准：（1）确诊为变应性鼻炎，诊断标准参照文献[10]；（2）年龄＞18 岁，采集标本前未接受对结果可能产生影响的治疗；（3）自愿接受本研究方案，签署知情同意书。排除标准：（1）有鼻腔外科手术史；（2）就诊7d内有呼吸道感染或处于其他急性感染期；（3）合并恶性肿瘤等严重疾病；（4）合并自身免疫性疾病。

1.2 一般资料 收集2017 年1 月至2020 年3 月浙江省中医院收治的符合上述标准的变应性鼻炎患者177 例为观察组，另外收集同期进行健康体检者180例为对照组。两组一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。本研究已通过医院医学伦理委员会审批。

表1 两组一般资料比较

1.3 方法

1.3.1 Th17/Treg 细胞比例检测 在患者就诊后，未接受任何有效干预前抽取患者晨起空腹肘部外周静脉血5 ml，采用流式荧光法检测Th17 及Treg，计算Th17/Treg 细胞比例。使用Attune NxT流式细胞仪（上海沫锦医疗器械有限公司），试剂盒均购自上海邦景实业医疗科技有限公司。

1.3.2 鼻通气功能检查 在患者就诊后，未接受任何有效干预前采用NV1 鼻声反射仪[英国吉姆（GM）公司]进行检测，要求患者在安静环境中稳定10 min后开始检测，将探头放置在患者的鼻孔前，双侧鼻孔分别测试3 次，取平均值。记录鼻腔容积、鼻腔最小横截面积、最小横截面积与前鼻孔距离及鼻阻力。

1.3.3 血清炎性因子检测 在患者就诊后，未接受任何有效干预前抽取患者晨起空腹肘部外周静脉血5 ml，采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-12（IL-12）及白细胞介素-31（IL-31）。试剂盒均购自上海邦奕生物科技有限公司。

1.4 统计方法 采用SPSS 24.0 统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差表示，采用t 检验；计数资料采用检验；相关性分析采用Pearson 相关分析。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组Th17/Treg 细胞比例水平比较观察组Th17、Th17/Treg均高于对照组，Treg 低于对照组（均P＜0.05），见表2。

表2 两组Th17/Treg 细胞比例水平比较

2.2 两组鼻通气功能指标比较 观察组鼻腔容积、鼻腔最小横截面积、最小横截面积与前鼻孔距离均低于对照组，鼻阻力高于对照组（均P＜0.05），见表3。

表3 两组鼻通气功能指标比较

2.3 两组血清炎性因子水平比较 观察组IL-4、IL-6、IL-12、IL-31 均高于对照组（均P＜0.05），见表4。

表4 两组血清炎性因子水平比较

2.4 相关性分析 Th17、Th17/Treg 与鼻腔容积、鼻腔最小横截面积及最小横截面积与前鼻孔距离均呈负相关，Treg与鼻阻力、IL-4、IL-6、IL-12 及IL-31 均呈负相关（P＜0.05）；Th17、Th17/Treg与鼻阻力、IL-4、IL-6、IL-12、IL-31 均呈正相关，Treg与鼻腔容积、鼻腔最小横截面积及最小横截面积与前鼻孔距离均呈正相关（均P＜0.05）。见表5。

表5 Th17/Treg 细胞比例与鼻通气功能指标、血清炎性因子的相关性分析

3 讨论

以往有研究证明Th1/Th2 细胞的失衡是导致人体发生变应性鼻炎的主要原因之一[11]。而随着近年研究的持续深入，部分学者发现较为经典的Th1/Th2 细胞失衡学说没有办法将变应性鼻炎的发病机制完全解释清楚，而本研究重点分析的Th17/Treg 细胞可能在变应性鼻炎的发病过程中扮演的角色。Treg 细胞隶属于CD4+T 淋巴细胞群，能够通过T 细胞受体所介导的细胞间作用，对抑制效应性T 细胞的增殖和功能实现。人体若发生Treg 细胞的功能缺陷，可以导致多种疾病的发生，较为高发的如恶性肿瘤、变态反应性疾病及自身免疫性疾病等[12]。Th17 细胞也属于CD4+T 淋巴细胞的亚群，其区别于常见的Th1、Th2 及Treg等，Th17 细胞所分泌出的细胞因子IL-17具有强大的中性粒细胞趋化能力[13]。以往的变应性鼻炎动物模型研究结果显示，小鼠血清中的IL-17 含量明显增高[14]。

本研究结果显示观察组Th17 及Th17/Treg比例均高于对照组，而观察组Treg 低于对照组；这提示变应性鼻炎患者Th17 细胞异常激活，同时Treg 细胞降低，这说明Th17/Treg细胞的失衡与变应性鼻炎的发病具有一定的关联。随着患者病情的进展，变应性鼻炎患者会逐渐出现鼻部的通气功能障碍。鼻声反射技术是对鼻腔功能进行检测的常用手段之一，借助声波反射的原理对人体的鼻腔以及鼻咽腔所反射的声波信号进行捕捉，经过数据回传及计算处理后，得到鼻腔的横截面面积及鼻腔体积等参数[15]。变应性鼻炎患者鼻腔黏膜的敏感性明显增加，经过激发试验之后，能够使鼻腔容积和横截面积迅速降低。本研究结果显示变应性鼻炎患者的各类鼻通气功能指标与健康对照组差异均有统计学意义，这进一步说明变应性鼻炎患者的鼻黏膜敏感性显著提升。相关分析结果显示各类鼻通气指标与Th17、Treg 及Th17/Treg 比例均有相关性。

变应性鼻炎的发病过程涉及多种炎性细胞及相应的细胞因子，IL-4 及IL-6是较为典型的人体促炎性反应因子，由单核巨噬细胞分泌，可以诱导中性粒细胞趋化到鼻黏膜的局部，加重鼻腔内的炎性反应及临床症状。变应性鼻炎患者IL-12表达水平显著上升，其能够诱导CD4+Th细胞向Th1 细胞的分化过程。IL-31 是由人体已经活化的Th2 细胞分泌，也是介导患者皮肤瘙痒症状及变应性鼻炎T细胞之间的细胞因子。本研究结果显示变应性鼻炎患者各类炎性反应因子的水平均高于健康体检者，这说明变应性鼻炎患者存在较为明显的炎性反应。而且相关性分析结果显示各类炎性细胞反应因子同Th17、Treg 及Th17/Treg 比例均有相关性，这提示Th17/Treg 细胞比例失衡也可能是患者全身或局部炎性反应的重要影响因素，也是变应性鼻炎患者病情恶化的病理机制之一。

综上所述，变应性鼻炎患者外周血中Th17/Treg 细胞免疫紊乱，同时也是变应性鼻炎患者出现鼻通气功能障碍和全身炎症反应的主要原因之一，对于Th17/Treg 细胞免疫紊乱的研究可能成为治疗变应性鼻炎新的用药靶点。