RhCcEe抗原配合性输血在长期、定期输血患者中的应用

刘爱菊，陈仕顺，韦金华，韦 婷

（河池市人民医院输血科，广西河池 547099）

地中海贫血等相关疾病患者需长期依赖输注红细胞，随着医疗技术的发展，提高了临床输血效果的安全性，但红细胞血型抗原同种免疫问题开始引起临床医师的重视[1]。Rh血型是较复杂的血型系统，红细胞免疫原性强，Rh血型检测的重要性仅次于ABO型[2]。RhCcEe抗原配合性输血是指针对RhD、RhE、Rhe、RhC、Rhc 5种血型进行抗原配型输注，但长期、定期输血患者由于受多次血型抗原刺激，其体内产生血型同种抗体，提升溶血性输血反应风险、加重输血安全事件发生率[3]。长期、定期输血的患者，其血清同种抗体比率较高，其中以Rh抗体为主，因此Rh系统相合输注是非常有必要的。基于此，本研究拟通过临床对照，研究RhCcEe抗原配合性输血在长期定期输血患者血液输注中的应用，为RhCcEe抗原配合性输血的推广提供依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020年4月至2021年4月河池市人民医院收治的80例长期定期输血患者作为研究对象，进行前瞻性研究，按随机数字表法分为观察组和对照组，两组各40例。观察组患者中男性21例，女性19例；年龄2～68岁，平均（38.55±2.12）岁；患者构成比：15例地中海贫血患者，15例慢性白血病患者，10例败血症患者。对照组患者中男性23例，女性17例；年龄2～68岁，平均（38.62±2.18）岁；患者构成比：16例地中海贫血患者，17例慢性白血病患者，7例败血症患者。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经由河池市人民医院医学伦理委员会批准，所纳入患者及其家属知情同意并签署知情同意书。纳入标准①符合地中海贫血、慢性白血病、败血症等诊断标准[4-6]者；②满足输血指征者[7]；③IgG型抗体筛查阴性；④需长期输注红细胞者。排除标准：①既往存在过敏反应史者；②RhD阴性者等。

1.2 检验方法 ①试剂与仪器：ABO/RhD血型定型检测卡、Rh血型分型检测卡及抗球蛋白检测卡（长春博迅生物技术有限责任公司，规格：6孔/卡）；抗球蛋白试剂、ABO及RhD标准血清（上海血液生物医药有限责任公司，规格：2 mL/支）；不规则抗体筛选红细胞（长春博德生物技术有限责任公司，规格：5 mL/支）；谱细胞（生产厂家：匈牙利雷格恩斯有限公司，规格：0.8%）；全自动血型分析仪（Hamiltn Microlab Starlet IVD，规格：SA-120型）、毛细管离心机（江苏贝索生物工程有限责任公司，规格：YZ-DM1424）。②输血前血清学检测具体方法：ABO、RhD血型鉴定主要采取试管法与微柱凝胶法进行两次鉴定，若鉴定一致则录入血型鉴定结果。采集患者静脉血3 mL，经抗凝剂抗凝，常规离心，经盐水介质试管法鉴定ABO、RhD血型。于输血前后采集患者外周静脉血2 mL，采取微柱凝胶法检测RhCcEe血型抗原。对于出现混合视野的患者，无法鉴定血型抗原者，则通过从静脉血中提取的DNA样本进行RhCcEe基因分型，采用毛细管离心技术，分离自身红细胞及输入红细胞后，按基因检测结果筛选相合血液，再进行微柱凝胶法鉴定。观察组患者交叉配血时选择ABO、RhC、c、D、E、e抗原相合性或相容性的血液进行RhCcEe抗原配合性输血；对照组患者交叉配血时选择ABO及RhD相合（常规配血方案）的血液进行。每次输血后对两组受试者的输血效果进行密切监测，并筛查两组患者每次输血后至下次输血前有无不规则抗体。在患者血清中加入洗涤后的A型、CCDee红细胞，30 ℃孵育30 min，离心后取红细胞，使用细胞放散液，出现与C阳性细胞凝集而与E阳性细胞不凝集者，则为抗体特异性为抗-C。在患者血清中加入洗涤后的A型、ccDEE红细胞，30 ℃孵育30 min，离心后取红细胞，使用细胞放散液，与E阳性细胞凝集而与C阳性细胞不凝集者，则为抗体特异性为抗-E。

1.3 观察指标 ①观察组受血者Rh表型分布：统计CCDee、CcDEe、CcDee、ccDEE、ccDEe、CCDEe、ccDee、CCDEE、CcDEE的频数。②两组患者不规则抗体阳性率：对两组患者的静脉血进行不规则抗体筛查，针对筛查阳性者，采用谱细胞进行抗体鉴定。③不良反应：包括迟发性溶血性输血反应和迟发性血清学反应。不良反应发生率为发生不良反应的例数占总例数之比。

1.4 统计学分析 数据采用SPSS 22.0统计学软件进行分析，计数资料用[例（%）]表示，行χ2检验或校正χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组受血者Rh表型分布 观察组抗原表型分布频率为CCDee＞CcDEe＞CcDee＞ccDEE＞ccDEe＞CCDEe＞ccDee=CCDEE=CcDEE，见表1。

表1 观察组受血者Rh表型分布（例）

2.2 两组受试者不规则抗体阳性率比较 观察组患者不规则抗体阳性率低于对照组，差异有统计学意义（P＜ 0.05），见表2。

表2 两组患者不规则抗体阳性率比较[例（%）]

2.3 两组不良反应发生情况比较 观察组患者未发生迟发性溶血性输血反应和迟发性血清学反应，对照组患者中有10例发生迟发性溶血性输血反应和迟发性血清学反应，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 两组患者不良反应发生情况比较[例（%）]

3 讨论

随着我国新型铁促排药物的临床应用，长期依赖输血患者寿命得以延长，但多次异体输血会产生红细胞血型同种抗体，导致部分患者难以寻找相合的献血者血液，逐渐成为临床难题[8]。有研究结果显示，长期、定期输血患者同种抗体阳性率在10%左右，同型血液输注可预防因血型抗体不同而引起的免疫反应，同时提高临床输注效果[9]。

Rh血型有50多个抗原，其中D抗原最强，因此常被列为常规检查。由于事先检测是否存在D抗原，故相关输血的不良反应较少。相比之下，其他几个抗原由于未被重视，且都具有一定的免疫原性，输血后会刺激机体产生不规则抗体，引起交叉配血不合[10-11]。长期定期输血导致红细胞同种抗体增加，进而导致输血费用增加，还会造成急救用血困难。国外有研究报道，30%左右的长期输血患者体内可检出同种抗体[12]。国内深圳某医院资料统计，RhCcEe同型输血出现同种抗体者占比为2.08%[13]。对长期输血的患者所做的同种抗体鉴定，以Rh血型为主，这表明Rh血型抗体是引起免疫性溶血性反应的常见抗体，因此进行RhCcEe抗原配合性输血理论上可提高输血的安全性和有效性[14-15]。本研究中，观察组患者血中抗原表型分布频率较高的有CCDee、CcDEe、CcDee、ccDEE、ccDEe、CCDEe， 这与王雨涵等[16]研究结果相符。本研究中观察组患者未检测出ccDee、CCDEE、CcDEE这3种表型，原因可能一方面这几种表型分布频率低，另一方面可能与样本量较少有关。本研究结果还显示，观察组患者的不规则抗体阳性率低于对照组，观察组患者未发生迟发性溶血性输血反应和迟发性血清学反应，对照组中两种不良反应的总发生率高达25.00%，组间差异有统计学意义。由此可见，未进行RhCcEe抗原配合性输血在反复输血后产生不规则抗体的概率和不良反应发生率均升高,与张秋会等[17]研究结果相符。对长期、定期输血患者推行RhCcEe抗原配合性输血，可有效预防同种免疫的发生，因为长时间输注Rh抗原不合的异体血，会使不规则抗体风险增高，迟发性溶血性输血反应和迟发性血清学反应增加[18]。

综上所述，本研究证实临床采取RhCcEe抗原配合性输血使长期定期输血患者不容易产生不规则抗体，且降低不良反应的发生概率，提高了长期、定期输血治疗的有效性和安全性。因此，针对长期、定期输血患者，临床上用RhCcEe抗原配合性输血是有益且必要的。