人乳头瘤病毒、液基薄层细胞学及DNA倍体联合筛查在宫颈癌患者诊断的临床价值

高 燕，杨 红，张晓红，葛俊丽，贺艳丽，张红菊，李晓勤

(空军军医大学第一附属医院，西京医院妇产科，陕西 西安 710032)

在女性恶性肿瘤中，宫颈癌临床发病率居第二，我国因为宫颈癌死亡人数约为5万/年，诱发宫颈病变常见因素为人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)[1，2]。对其进行有效筛查与患者预后监测属于宫颈癌防治重点，因此优化筛查方式，提高筛查准确性对防癌治癌具有重要意义。有报道称，HPV对皮肤以及组织细胞亲嗜性较高，和宫颈癌的发生关系密切，在宫颈癌患者中，高达99% HPV显示阳性[3]。液基薄层细胞学(thinprep cytologic test，TCT)优势之一为无创安全，其检测结果能够为宫颈疾病临床早期诊治提供重要依据[4]。当前，TCT已经在临床得到广泛应用，可在一定程度上提高宫颈癌病变检出率，但是敏感度有待提高[5]。现阶段，临床越来越重视DNA倍体分析结果对癌症的诊断指导价值。本文主要探究这三种方式联合筛查在宫颈癌诊断中的应用价值，为临床诊断提供一定指导及依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料256例宫颈病变病例取自2019年3月至2021年4月西京医院妇产科，纳入标准：①具有乳头样增生、宫颈糜烂、肥大或者接触性出血等临床症状；②有性生活史或者为已婚妇女；③初次发现宫颈病变；④精神意识正常。排除标准：①接受过宫颈或者盆腔治疗；②合并生殖系统肿瘤病变或者急性阴道炎等；③宫颈炎急性期。所有患者自愿参与，研究经医院伦理委员会审批。

1.2 方法①HPV检测：由相关专业人员经分子导流杂交方法获得测定结果。②TCT检测：收集宫颈脱落细胞后送检。依据The Bethesda System[6]TBS报告系统，由美国癌研所(National Cancer Institute，NCI)予以细胞学诊断。DNA倍体分析：采用毛刷采集样本，完成制片过程后，予以Feulgen-Thionin染色，最后经DNA定量分析系统获得细胞核DNA分析结果。如果异常细胞数目≥3，则为DNA倍体阳性[7]。③病理检查：利用甲醛固定在阴道镜下获得的宫颈活检组织，常规包埋之后进行病理切片，最后染色，安排2位经验丰富病理医师一起阅片，并作出统一诊断。

1.3 统计学方法应用SPSS 22.0统计学软件进行数据处理。计数资料以例数(%)表示，比较采用χ2检验；对照病理检查结果，以Kappa法进行一致性分析，其中Kappa值0.41～0.60为中等一致，其数据越大，一致性越好。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 单独诊断比较DNA倍体分析诊断效能最高，见表1与表2。

表1 三种检查方式与病理结果对照 (n)

表2 诊断结果比较 [%(n)]

2.2 联合方案与病理对照见表3。HPV+TCT诊断敏感度90.67%(68/75)，特异度74.59%(135/181)，准确性79.30%(203/256)，Kappa值0.57；HPV+DNA倍体，敏感度66.67%(50/75)，特异度95.58%(173/181)，准确性87.11%(223/256)，Kappa值0.67；TCT+DNA倍体，敏感度96.00%(72/75)，特异度88.40%(160/181)，准确性90.63%(232/256)，Kappa值0.79。HPV+TCT、TCT+DNA倍体敏感度明显更高(P<0.05)；HPV+DNA倍体特异度最高(P<0.05)，且TCT+DNA倍体优于HPV+TCT(P<0.05)；TCT+DNA倍体、HPV+DNA倍体准确性更高(P<0.05)；TCT+DNA倍体Kappa值最高，为最优诊断方式。

表3 联合方案与病理对照 (n)

3 讨论

以往研究指出，TCT属于宫颈细胞学筛查重要方式，但因为受取材(TCT检测为形态学检查，临床上仅能取到宫颈部位表层细胞，通常难以取得深层细胞)、标本制作以及诊断医师自身水平等因素影响，临床容易产生漏诊现象[8]。本研究中，TCT敏感度仅为65.33%，Kappa值0.42，与上述观点基本一致。说明TCT诊断尽管与病理检查中等一致，但敏感度较差，建议临床将其联合其他方式进行诊断，通过各自诊断优势，达到补充目的，从而使宫颈癌诊断更完善。相关研究表明，50%～75%人群受到过HPV病毒感染，大部分为一过性，而宫颈癌病变一般为HPV持续感染所致[9]。本研究对照发现，HPV对宫颈癌诊断敏感度68.00%，稍高于TCT，但是特异度稍低，分析原因，可能与HPV检测仅反映宫颈部位病毒感染状态，无法反映宫颈细胞学情况与病理学变化等相关。因此，HPV检测单独进行宫颈癌的诊断时，有明显局限，导致诊断效能并不理想。本研究中，与其他单独诊断方式相比，DNA倍体诊断价值更高，与杨颖谕等[10]研究观点基本一致。分析原因，HPV主要经人体E6以及E7癌基因等和相应宫颈上皮组织细胞基因组有效结合，可以通过干扰染色体性能，使得DNA倍体发生异常改变，该类病变持续进展将会引发宫颈癌；对于病变细胞而言，相较于细胞形态学改变，染色体在形态以及数目方面的改变更早[11]。DNA倍体检测可直接了解DNA倍体情况，故获得的诊断结果更为准确。DNA倍体检测主要通过分析细胞核之中DNA水平及倍体状况，判断癌细胞情况，其采取定量检测及分析系统，了解细胞DNA指数值，为评估癌细胞提供了可靠数据信息依据。当前，DNA倍体为宫颈细胞学筛查范畴内新方法，其不仅具有检测快、人为因素误差小、操作可重复性高、检测效能高等优势，而且对细胞病理医师方面的要求较低，故比较适合在基层医院应用，具有推广应用价值。

本研究中，TCT联合其他两种方式，均能获得较高诊断敏感度。考虑到其他方式的应用，对TCT所致漏诊病例具有减少以及消除作用，因此敏感度得到有效提升。本研究显示，HPV+DNA倍体可有效提高宫颈癌诊断特异度。有研究指出，HPV诊断特异度不高，可能因为HPV感染所致变化和形态学变化无法同步[12，13]。而DNA倍体分析能够获得肿瘤病灶生物学特征，其为早于通过形态学了解到的信息，能够为病灶生物学特征判定提供重要补充，同时也有助于增加医师对肿瘤形态学的认识[14，15]。因此，HPV+DNA倍体诊断特异度更高。此外，本文经比较发现，DNA倍体联合其他方式准确性更高。在联合诊断方案中，由于不同检测技术具备各自优缺点，能够相互弥补，从而减少漏诊误诊，但是DNA倍体诊断敏感度、特异度以及准确性均更高，故其联合TCT或HPV诊断价值更高。

综上，不同方式联合诊断各有优点，其中DNA倍体联合HPV或TCT，可明显提高诊断准确性，具有重要检测价值。