胰腺癌患者手术前后血清S100A9、MMP-9变化及其相关性

朱晓龙 张光亮 裴建灰 朱乐恒

作者单位：平煤神马医疗集团总医院普外科，河南，平顶山467000

胰腺癌是消化道常见恶性肿瘤，转移快，患者生存时间短，病死率高。据统计大部分胰腺癌患者在1年左右死亡，5年生存期患者不超过4%［1］。手术是治疗胰腺癌的首选方式，然而相关研究显示胰腺癌患者手术及周围淋巴结清扫后，生存时间一般约为11～20 个月，5年存活率不超过25%［2］。钙结合蛋白A9 复合物（S100 calciumbinding protein A9，S100A9）可促进免疫与炎症修复，其异常表达上调和多种恶性肿瘤的发生及发展有关，具有促癌作用［3］。基质金属蛋白酶9（Matrix Metalloprotein-9，MMP-9）由结缔组织细胞分泌，参与细胞外基质降解过程，使内皮细胞迁移增殖，促进新血管和基底膜形成，在肿瘤周围组织浸润、远隔转移中发挥重要作用［4］。本研究将比较手术前后胰腺癌患者血清S100A9、MMP-9 含量差异，分析两项指标的相关性，分析其与临床病理与预后的关系。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2016年5月至2018年2月原发性胰腺癌行手术治疗的患者60 例作为胰腺癌组，其中男性34 例，女性26 例；平均年龄（60.25±6.04）岁；肿瘤位置：胰头25 例，胰体11 例，胰尾24 例；肿瘤大小：≤4 cm 者28 例，＞4 cm 者例32例；肿瘤分化：高分化26 例，中分化22 例，低分化12 例；临床分期［5］：Ⅰ期8 例，Ⅱ期11 例，Ⅲ期20 例，Ⅳ期21 例。纳入标准：①符合《胰腺癌诊治指南（2014）》胰腺癌诊断标准［6］；②Karnofsky评分［7］＞60 分；③术前未接受过放化疗以及其他生物治疗。排除标准：①合并自身免疫或血液疾病；②合并感染性疾病；③合并重要脏器功能障碍；④合并手术相关禁忌症；⑤妊娠或哺乳期妇女；⑥合并认知障碍或精神疾病。另选取30 例同期于本院进行健康体检者作为对照组，其中男性16 例，女性14 例；平均年龄（60.87±5.95）岁。两组患者性别、年龄资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经医院伦理委员会批准，患者或家属签署知情同意书。

1.2 方法

对照组于体检当日、胰腺癌组于术前、术后7 d、术后1 个月抽取空腹静脉血4 mL，室温下离心分离血清，用于S100A9 测定的血清置于-20℃条件下保存待检，用于MMP-9 测定的血清置于-8℃条件下保存。S100A9 试剂盒来源于上海沪震实业有限公司，MMP-9 试剂盒来源于上海瑞齐生物科技有限公司，酶联免疫吸附法操作按试剂盒说明书进行。对胰腺癌组患者进行随访，随访时间为术后2年，随访方式为电话随访和门诊复查，随访周期为3 个月，生存起始时间为胰腺癌手术后，主要终点事件为死亡时间，次要终点事件为随访结束。生存期的计算方法为术后到死亡或随访结束所历经的时间。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0 统计软件进行统计分析，计量资料采用（）表示，组间比较行t检验；采用Pearson 相关性分析血清指标之间的关系，以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 血清S100A9、MMP-9 含量比较

血清S100A9、MMP-9 含量：术前＞术后7 d＞术后1 个月＞对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 血清S100A9、MMP-9 含量比较（±s）Table 1 Comparison on contents of serumS100A9 and MMP-9（±s）

表1 血清S100A9、MMP-9 含量比较（±s）Table 1 Comparison on contents of serumS100A9 and MMP-9（±s）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与术前比较，bP＜0.05。

组别对照组胰腺癌组术前术后7 d术后1 个月n 30 60 60 60 S100A9（μg/L）150.08±14.88 211.06±20.94a 197.46±18.33ab 169.64±15.40ab MMP-9（ng/mL）18.29±1.73 91.06±8.14a 82.33±7.04ab 40.71±4.25ab

2.2 胰腺癌组患者血清S100A9、MMP-9 含量相关性分析

胰腺癌组患者术前、术后7d、术后1 个月血清S100A9水平与血清MMP-9 含量呈现正相关（r=0.341、0.314、0.303，均P＜0.05）。

2.3 胰腺癌组患者术前血清S100A9、MMP-9 含量与临床病理特征的关系分析

胰腺癌组患者术前肿瘤＞4 cm、肿瘤分化程度低、临床分期Ⅲ期或Ⅳ期、淋巴结转移患者血清S100A9、MMP-9 含量高于肿瘤≤4 cm、肿瘤分化程度高、临床分期Ⅰ期或Ⅱ期、未发生淋巴结转移者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 患者术前血清S100A9、MMP-9 含量与临床病理特征的关系分析（±s）Table 2 Relationship between preoperative serum S100A9，MMP-9 levels and clinicopathological features（±s）

表2 患者术前血清S100A9、MMP-9 含量与临床病理特征的关系分析（±s）Table 2 Relationship between preoperative serum S100A9，MMP-9 levels and clinicopathological features（±s）

临床病理特征性别年龄（岁）肿瘤位置肿瘤大小肿瘤分化临床分期淋巴结转移男女≤60＞60胰头胰体胰尾≤4 cm＞4 cm低分化中分化高分化Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期无有n 34 26 29 31 25 11 24 28 32 12 22 26 8 11 20 21 28 32 S100A9（μg/L）209.77±20.06 212.75±20.98 208.05±19.97 213.88±20.43 209.98±18.77 211.03±19.43 212.20±17.05 205.11±17.73 216.27±18.43 218.96±16.33 214.63±16.75 204.39±15.64 197.41±18.30 200.71±17.95 214.30±15.40 218.60±16.63 201.73±14.95 219.22±20.66 t/F 值0.559 1.109 0.091 2.382 4.170 5.363 3.708 P 值0.548 0.272 0.913 0.021 0.020 0.008 0.001 MMP-9（ng/mL）90.80±8.03 91.40±9.05 89.05±8.71 92.94±8.08 90.76±7.05 91.21±8.46 91.30±9.01 86.11±7.84 95.39±8.28 96.77±7.46 94.06±8.43 85.89±7.01 81.64±7.41 84.25±6.95 93.07±7.77 96.30±8.08 83.13±8.01 98.00±8.44 t/F 值0.271 1.768 0.029 4.439 10.981 11.333 6.971 P 值0.787 0.082 0.971＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.4 手术后1 个月血清S100A9、MMP-9水平与预后的关系分析

60 例患者依照术后1 个月血清S100A9、MMP-9水平，将大于等于平均值的患者纳入高表达组，将小于平均值的患者纳入低表达组，其中S100A9 高表达患者2年生存率6.45%（2/31）低于S100A9 低表达患者的27.59%（8/29），中位生存时间14.7 个月短于S100A9 低表达患者的19.1 个月，差异均有统计学意义（P＜0.05）。MMP-9 高表达患者2年生存率8.57%（3/35）低于MMP-9 低表达患者的28.00%（7/25），中位生存时间15.3 个月短于MMP-9低表达患者的18.6 个月，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见图1。

图1 手术后1 个月血清S100A9、MMP-9 不同表达状态患者2年总生存曲线Figure 1 The 2-year overall survival curves of patients with different expressions of serum S100A9 and MMP-9 at 1 month after surgery

3 讨论

胰腺癌的早期诊断仍缺乏客观有效的指标，探寻胰腺癌有效诊断标志物是临床重要难题之一。近年来，关于胰腺癌发生发展机制研究有了较大进展，多种蛋白或基因均参与其发生及发展过程［8］。

S100A9 是钙结合蛋白S100 家族的重要成员之一，参与多种癌细胞初始发育和转移性疾病发展过程［9］。胰腺癌患者S100A9 可能通过TGF-β/SMAD4 信号通路影响肿瘤的生长及迁移，同时S100A9 作用于远处部位，如肝脏、肺等，通过改变微环境，创造一个有利于转移细胞粘附及生长的条件，这说明S100A9 在胰腺癌的发生、迁移、侵袭中具有重要作用［10］。MMP-9 是研究广泛的基质金属蛋白酶之一，参与多种生物过程，通过降解细胞外基质蛋白使得细胞外基质重构，调节细胞黏附性，降解血管基底膜和血管周围基质，促进癌细胞侵袭及转移，在新的肿瘤血管系统生成中具有不可或缺的作用［11］。相关文献报道显示，MMP-9蛋白在人类多种恶性肿瘤如肝癌、食管癌、胃癌、结肠癌、肾癌等均呈现高表达，并与肿瘤的侵袭、生长、转移等不良预后相关［12］。

临床上可通过检测癌症患者血清S100A9、MMP-9 表达水平，依照其浓度变化来判断患者手术治疗后病情变化，预测患者预后状态，发挥病情监测作用。郭涛弦等［13］研究比较癌症患者手术前后S100A9、MMP-9 表达水平变化，结果显示患者手术后S100A9、MMP-9 表达水平明显降低。本研究中胰腺癌患者手术后1 个月血清S100A9、MMP-9表达水平均明显低于治疗前，患者术后血清S100A9、MMP-9 表达趋势与上述研究结果一致，说明手术治疗可有效降低患者S100A9、MMP-9 表达水平，改善患者疾病与预后。Mroczko 等［14］研究显示胰腺癌患者S100A9、MMP-9 表达水平与其病理分期及淋巴结转移相关。本研究中，随着肿瘤直径增大、临床分期升高、出现淋巴结转移，患者血清S100A9、MMP-9 表达水平也随之增高，这一结果更加证实了血清S100A9、MMP-9 与胰腺癌增殖及转移有密切关系，其表达水平的升高，可作为胰腺癌诊断、预测预后的重要生物学标志，这与刘翔等［15］研究报道中显示的胰腺癌患者血清S100A9、MMP-9 高表达与其临床病理特征相关的结论相吻合。本研究进一步分析术后1 个月患者血清S100A9、MMP-9 含量与患者生存期的关系，结果显示S100A9、MMP-9 高表达患者生存时间短于低表达患者，进一步说明血清S100A9、MMP-9含量可对胰腺癌患者的预后进行判断，Liao 等［16］研究结果支持本结论。

综上所述，S100A9、MMP-9 在胰腺癌的发生、发展、转移与预后评估等方面具有较大的潜在价值，但其是否能够作为胰腺癌患者预后评估的可靠指标，还需要多中心，大样本的临床数据和研究支持，S100A9、MMP-9及其相关信号通路可能是胰腺癌治疗中的潜在目标之一。