奥拉西坦联合丹红注射液对缺血性脑卒中患者BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表达水平的影响

刘 洁 任利霞

1.黄河三门峡医院医院感染管理科，河南三门峡472000；2.黄河三门峡医院药学部，河南三门峡472000

缺血性脑卒中又称作脑梗死，是由局部脑组织区域血液供应障碍导致脑组织损伤等的一种脑组织缺氧性坏死疾病[1]。研究显示，约35%的急性缺血性脑卒中患者会在发病后3个月发生认知功能障碍，严重影响了患者的生活质量[2-3]。奥拉西坦是一种γ-氨基丁酸（GABA）类益智药，能够改善患者的学习能力，保护患者的神经系统，但也有可能会使患者出现精神兴奋和睡眠障碍等情况[4]。脑卒中在祖国医学中归属于中风的范畴，其基本病机为血瘀阻络，因此采用丹红注射液治疗能够改善血液流动情况，有助于患者康复[5]。同时，丹红注射液还能扶正祛邪、醒脑开窍，可促进患者神经功能和脑组织康复[6]。基于此，本研究探究以上两种药物联合应用对缺血性脑卒中患者的治疗效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取黄河三门峡医院2015年10月至2018年10月收治的100例缺血性脑卒中患者。纳入标准：①发病时长＜48 h；②符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南》及国家中医药管理局脑病急症科研协作组的《中风病诊断与疗效评定标准》中的诊断标准[8]，且经过相应的影像学检查确诊。排除标准：①合并恶性肿瘤或重要脏器器质性病变者；②由于其他病因导致患者出现认知障碍；③对奥拉西坦或丹红注射液过敏者。通过抽签法将100例缺血性脑卒中患者随机分为观察组及对照组，每组各50例。观察组男27例，女性23例；年龄27～83岁，平均（59.19±3.88）岁；平均病程（12.65±8.35）h；病灶位置：单侧31例，双侧19例；文化水平：本科及以上17例，中学22例，小学及以下11例。对照组男26例，女24例；年龄26～82岁，平均（60.04±3.76）岁；平均病程（12.47±8.54）h；病灶位置：单侧30例，双侧20例；文化水平：本科及以上18例，中学23例，小学及以下9例。两组患者性别、年龄、平均病程、病灶位置及文化水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究患者均知情同意，本研究经本院医学伦理委员会审核通过。

1.2 方法

两组均给予血管扩张、溶栓、降颅压、抗血小板、促进细胞代谢等常规治疗。对照组在常规治疗的基础上联合奥拉西坦（石药集团欧意药业有限公司生产，生产批号：262150921，规格5 ml∶1 g）治疗，将其加入0.9%氯化钠注射液100 ml中静脉滴注，2.0 g/次，1次/d，治疗15 d。观察组在对照组基础上给予丹红注射液（山东丹红制药有限公司生产，生产批号：15080847，规格10 ml/支）治疗，将20 ml丹红注射液加入250 ml木糖醇注射液中静脉滴注，1次/d，治疗15 d。

1.3 观察指标及评价标准

1.3.1 临床疗效评价 以蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评分作为疗效评价标准。显效：MoCA评分＞6分；有效：MoCA评分4～6分；无效：MoCA评分＜4分。总有效率=（显效+有效）例数/总例数×100%。

1.3.2 炎症因子指标 两组患者在治疗前后于清晨空腹状态下抽取5 ml外周静脉血，以3000 rpm离心30 min，分离上层血清，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测白细胞介素-6（IL-6）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）水平，试剂盒购自北京百晶生物技术有限公司，所有操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.3.3 蛋白表达水平 两组患者在治疗前后于清晨空腹状态下抽取5 ml外周静脉血，BCL-2一抗兔多克隆抗体购自美国abcam公司，BAX一抗兔多克隆抗体购自瑞士Enzo life公司，Caspase-3一抗兔多克隆抗体购自美国abcam公司。二抗山羊抗兔IgG购自北京北京百晶生物技术有限公司。采用蛋白免疫印迹（western blot）法检测BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表达水平，DAB显色，以GAPDH做内参，并采用Image-Pro Plus 6.0软件分析图像，统计BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表达水平。

1.4 统计学分析

本研究采用SPSS 26.0统计学软件进行数据分析，患者临床疗效等计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，组间两两比较采用卡方分割法，炎症因子水平、蛋白水平等正态分布的计量资料以（）表示，采用独立样本t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床疗效比较

研究期间无病例脱落情况发生。观察组治疗总有效率为96.00%（48/50），明显高于对照组的80.00%（40/50），差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组临床疗效比较[n（%）]

2.2 两组炎症因子水平比较

治疗前两组患者IL-6、hs-CRP水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后两组患者的炎症因子水平均得到显著改善，且观察组各因子水平显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组炎症因子水平比较（± s）

表2 两组炎症因子水平比较（± s）

组别 n IL-6（ng/L） hs-CRP（mg/L）治疗前 治疗后 t值 P值 治疗前 治疗后 t值 P值观察组 50 105.13±10.07 75.02±6.82 17.506 0.000 4.27±1.06 2.19±0.38 13.061 0.000对照组 50 104.88±9.39 93.16±7.47 6.907 0.000 4.31±1.14 3.36±0.61 5.196 0.000 t值 0.128 6.751 0.182 11.512 P值 0.898 0.000 0.856 0.000

2.3 两组蛋白表达水平比较

治疗前两组患者BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表达水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后两组患者各蛋白表达水平得到显著改善，且观察组BCL-2水平明显高于对照组、BAX及Caspase-3水平明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 两组蛋白表达水平比较（± s）

表3 两组蛋白表达水平比较（± s）

组别 n BCL-2 BAX Caspase-3治疗前 治疗后 t值 P值 治疗前 治疗后 t值 P值 治疗前 治疗后 t值 P值观察组 50 0.32±0.06 0.88±0.11 31.603 0.000 1.06±0.22 0.32±0.06 22.946 0.000 1.67±0.23 0.58±0.10 30.732 0.000对照组 50 0.33±0.05 0.59±0.09 17.857 0.000 1.04±0.20 0.61±0.08 14.115 0.000 1.63±0.19 0.92±0.18 19.182 0.000 t值 0.905 14.428 0.476 20.506 0.948 11.676 P值 0.367 0.000 0.635 0.000 0.345 0.000

3 讨论

缺血性脑卒中由于发病机制比较复杂、临床治疗难度较大，无法被彻底根治，及时恢复供血可改善患者缺氧表现、缩短病程和减少后遗症的发生[9]。但由于该病好发生于中老年人，出现后遗症的风险较高，多为神经认知功能和运动功能障碍[10]。故在缺血性脑卒中的发病过程中，及时改善梗死区血液循环、加强神经功能保护，对减缓疾病的发生发展具有一定意义。中医辨证治疗在缺血性脑卒中治疗中的应用越来越普遍，得到了广泛肯定。丹红注射液的主要成分为红花和丹参提取物，其中红花能够润燥散肿，丹参能够通络活血、启闭开窍[11]。奥拉西坦是新一代的脑代谢改善药物，研究发现其药效是吡拉西坦的3～5倍，能够显著改善脑组织代谢能力，帮助患者恢复脑组织缺氧缺血导致的脑功能障碍[12-13]。

认知功能对于缺血性脑卒中患者的生活能力具有较大的影响，出现认知功能障碍的患者几乎无法正常生活。本研究发现，观察组临床疗效明显高于对照组（P＜0.05）。提示采用奥拉西坦联合丹红注射液治疗缺血性脑卒中的效果更佳，可显著改善患者的认知功能。以往研究认为，奥拉西坦能够通过血脑屏障，有选择性地作用于纹状体、海马体和大脑皮层，并激活、改善和保护受损神经细胞功能[14]。

IL-6是机体免疫反应的重要因子，能够促进免疫反应细胞的增殖和分化。hs-CRP是炎症反应的标志物，同时还是一种致炎因子。hs-CRP能够通过激活补体途径促使心室重构，导致心肌受损，加重脑组织供血不足的情况，会使缺血性脑卒中患者的病情加重。本研究发现，治疗后观察组炎症因子水平明显低于对照组（P＜0.05）。提示奥拉西坦联合丹红注射液治疗缺血性脑卒中能够降低炎症因子水平，与以往的研究结果一致[10]。研究发现[15]，丹红注射液中的红花黄色素和丹参酮能够促进血管内皮细胞的生长，减少血小板聚集，调节纤维蛋白酶原平衡，同时丹红注射液可扩张脑部血管，改善血液黏稠度，提高病灶血液流量和营养供给。

细胞凋亡发生在多个生理、病理过程中，BCL-2家族的构成比例是调控细胞凋亡的关键因素，BCL-2能够抑制细胞凋亡，BAX能促进细胞凋亡，Caspase-3的激活能有效促进细胞凋亡。研究显示，BCL-2能够阻止CytC的释放，抑制Caspase-3的激活反应，从而阻止神经元细胞的凋亡。本研究中，治疗后观察组各项蛋白表达水平明显优于对照组（P＜0.05）。提示奥拉西坦联合丹红注射液治疗对BCL-2、BAX、Caspase-3等的调节作用更加显著，可通过对细胞凋亡的抑制来保护神经元细胞，从而促进缺血脑卒中患者康复。

综上所述，联合应用奥拉西坦和丹红注射液的治疗方案能够有效提高缺血性脑卒中的临床疗效，缓解机体炎症反应，这可能与其对BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表达水平的调节作用有密切关系。本研究入选病例有限，且随访时间较短，结果可能产生误差，联合治疗的远期效果还有待于大样本研究，在今后的研究中希望可以扩大样本量以及进行多中心的试验证实。