对乙酰氨基酚的太赫兹时域光谱研究

郑转平，李爱东，李春艳，董 军

西安邮电大学电子工程学院，陕西 西安 710121

引 言

太赫兹(Terahertz, THz)波(0.3～10 THz)处于微波和红外波之间，属于远红外波段。它是电子学向光子学的过渡区，一直被称为THz空隙。近年来，由于超快光学技术、半绝缘半导体生产及其微加工技术的发展，稳定可靠的THz辐射源成为了一种常规技术，使得基于THz波的各种技术开始突飞猛进的发展[1-2]。现阶段，THz领域的研究及应用越来越广泛，其中最突出的就是THz时域光谱技术[3-4]。它是基于飞秒超快激光技术获得物质在THz波段的特征指纹谱，继而可以有效地研究物质在低频下的作用模式。据调研，很多生物大分子的低频振动模式大多是由于分子间的集体振动、分子间氢键的摆动及大官能团扭动引起的[5]。而THz波恰好处于远红外波段，对分子间相互作用及周围环境极其敏感，并且其具有良好的穿透性和特殊的光谱特质，可以运用在物质的无接触式鉴别[6]。因此，利用THz时域光谱技术可以对药品成分、药品质量以及药品含量进行快速检测。

近年来，因为药品的滥用造成的危害事件的报道越来越多，药品的质量安全问题不断引发各界人士的关注。因为，药品一旦变质，其有效成分就会大打折扣。变质的药品会伴随着其化学性质的改变而毒性增强。服用了变质药品的患者，极有可能会产生身体损伤并且诱发其他并发症，从而危害到生命健康。因此，对于药品的快速有效检测及其功能的揭示变得极其重要。

对乙酰氨基酚(Paracetamol，APAP，N-乙酰-P氨基苯酚)，又名扑热息痛、必理通等，是一种解热镇痛消炎类药，广泛被用于治疗疼痛和发烧，也可用于对阿司匹林过敏或不耐受的患者，具有安全、副作用小等特点。目前被广泛应用于医学临床的治疗[7]。阮健等测定了不同浓度的对乙酰氨基酚注射液的拉曼光谱[8]； 李锐测定研究了对乙酰氨基酚的红外吸收光谱[9]。而针对对乙酰氨基酚的宽带THz吸收谱及其吸收谱来源解析的文章，并未发现有相关报道。然而，研究药物分子的THz时域光谱，不仅可以对其进行有效标定，而且其吸收峰揭示的分子间作用模式对于药品的生化功能研究有重大意义。

基于此，采用THz时域光谱技术，实验测试了对乙酰氨基酚在0.3～4.5 THz范围内的THz光谱； 接着，采用密度泛函理论对实验所得指纹吸收峰进行了模拟； 通过实验和理论比对，对吸收峰的来源进行了讨论和归纳； 最后，对比了对乙酰氨酚样品与商用品牌药片的THz吸收谱，发现变质前后的对乙酰氨基酚药片的THz吸收谱存在明显差异。

1 实验部分

1.1 样品制备

乙酰氨基酚样品购于西安优博生物科技有限公司，纯度大于99%，使用之前均未曾经过进一步纯化处理。中美史克品牌的对乙酰氨基酚片购买于中美天津史克制药有限公司。实验中，对乙酰氨基酚和分散剂(聚四氟乙烯)比例分别为1∶2和1∶4，其余药品都选用的是纯样品。所有样品重量均为120 mg，经过研钵研磨7 min，使样品呈均匀粉末状，然后在压片机10 MPa的压力下保持5 min，制成直径为13 mm，厚度为0.7～1.1 mm，表面平滑且无裂痕的样本。

对乙酰氨基酚的药品熔点为168～172 ℃，因此中美史克品牌的对乙酰氨基酚药品选择了两组温度(170和190 ℃)分别为熔点范围内和超过熔点范围，用烘箱对药品分别进行两组温度下时长均为1 h的烘烤，获取其变质药品。表1为所测几种样品的编号和厚度。

表1 样品编号和厚度Table 1 Sample number and thickness

1.2 仪器及参数

XRD实验采用的是D/Max2550VB+/PC型X射线衍射仪。其中，X射线源为铜靶(电压40 kV，电流40 mA)，数据采集范围是5～50°。

THz光谱测试使用的是莱仪特太赫兹(天津)科技有限公司的(Advantest，TAS7500SU)光谱仪。采用透射式测试系统，飞秒激光器产生超短激光脉冲，THz脉冲产生方式为光电导天线，光谱范围为0.5～7 THz，动态范围为50 dB，频谱分辨率为7.6 GHz，实验都是在室温中进行。

1.3 计算方法

运用原子线性轨道的密度泛函理论进行单分子理论计算，计算方法选用B3LYP[10-11]，基组采用6-311G(d, p)，对单个对乙酰氨基酚分子进行结构优化和振动模式分析，收敛程度为“tight”。晶胞模拟计算中，运用平面波赝势密度泛函理论，采用局域密度泛函PBE(Perdew-Burke-Ernzerhof)方法，常规保守赝势[12-14]。平面波的截断能为1 000 eV。具体的，能量偏差为5.0×10-8eV·atom-1，最大力偏差为1.0×10-5eV·Å-1，最大应力偏差为0.02 GPa，最大位移偏差为1.0×10-5Å。图1为对乙酰氨基酚单个分子(a)及晶胞结构(b)。红色虚线代表晶胞中分子间的氢键，每个晶胞都有4个分子。对乙酰氨基酚的晶胞参数如下[15]： 空间群P21/a(Z=4)，a=12.930 Å,b=9.400 Å,c=7.100 Å,α,γ=90.00°，β=115.90°，晶胞体积为V=776.272 Å3。

图1 对乙酰氨基酚分子结构(a)及晶胞结构(b)Fig.1 The molecular structure (a) and crystal cell (b) of paracetamol

2 结果与讨论

图2是对乙酰氨基酚的X衍射谱。在测试THz特征谱之前，为验证对乙酰氨基酚的纯度，先测试了其X衍射谱，并与已存库数据进行了比较。其中，图2(a)是本次X实验结果，图2(b)为晶体库已保存的数据[15]。由比较发现，对乙酰氨基酚为单斜晶体及P21/a对称性。从图2可以看出，测试结果与模拟所用结构的数据匹配良好，这也为THz吸收谱的准确解析奠定基础。

图2 对乙酰氨基酚的X衍射实验谱(a)及参考文献数据(b)Fig.2 The Powder XRD pattern (a) and the data previously published (b) [15] of paracetamol

图3是对乙酰氨基酚的THz实验谱。由图可见，纯样品的对乙酰氨基酚(图3a)在2.4 THz以内可以清晰的观察到三个吸收峰，但高频部分由于吸收太过强烈，基本无法标定THz特征吸收峰。为了测试对乙酰氨基酚的宽带THz吸收谱，测试样品中加入了聚四氟乙烯分散剂。其中，对乙酰氨基酚与分散剂PTFE比例分别为1∶2(图3b)和1∶4(图3c)。通过比较，发现在0.3～4.5 THz测试范围中，随着分散剂的比例加大，对乙酰氨基酚高频的THz吸收峰愈加清晰。在混合比为1∶4(图3c)的谱图中，对乙酰氨基酚共获得了六个指纹特征吸收峰，分别位于1.46，1.88，2.11，2.95，3.48和4.27 THz。另外，还可以观察到一个位于2.52 THz的肩峰。

图3 对乙酰氨基酚的THz实验谱a： 纯样品； b： 1∶2混合样品； c: 1∶4混合样品Fig.3 The experimental THz spectra of paracetamola： The pure sample; b: The mixed samples with the ratio of 1∶2；c: The ratio of 1∶4

由对乙酰氨基酚的结构数据得知，它的晶胞共含有4个分子，其空间群为P21/a，对称性为C2h。由于每个分子含有20原子，则对乙酰氨基酚共有240个光学模式，其中包含21个分子间振动模式： 4Au+5Bu+6Bg+6Ag，但由于对乙酰氨基酚对称性为C2h，而对称性为Bg和Ag的模式并不显示红外活性，所以实际只有9个分子间光学模式。

为解析吸收峰的来源，本文首先采用气态理论的密度泛函B3LYP对对乙酰氨基酚的单个分子进行模拟。在0.3～4.5 THz范围内共获得4个光学模式，分别位于1.27，1.50，2.41及4.69 THz。其中，1.27 THz来源于苯环和CH3官能团的反向面外扭转； 1.50 THz主要源于CH3官能团的面外摆动； 2.41 THz主要来源于苯环和侧链的面外摆动； 4.69 THz来源于苯环和CH3基团的剪式面内振动。通过对实验和理论结果比对，发现位于1.46，2.11和4.27 THz的吸收峰有可能存在分子内作用模式的贡献。但由于气态方法只考虑分子内作用力，无法对实验吸收峰进行全面解析，所以在进一步的实验谱解析中，以晶胞为模型的固态密度泛函成为主要光谱解析手段。

图4是对乙酰氨基酚固态模拟结果和实验谱。理论计算采用基于固态理论的PBE泛函，谱图展宽采用半高宽为0.15 THz的洛伦兹函数。由图可见，模拟结果能较好地对实验谱进行重构。相较于单个分子的计算，固态理论计算在0.3～4.5 THz范围内，共得到了13个具有红外活性的光学模式(6a+7b)。表2给出了实验所测THz吸收峰和理论计算的光学模式。

图4 对乙酰氨基酚实验和固态模拟谱图Fig.4 The experimental and solid-state calculated spectra of paracetamol

表2 对乙酰氨基酚实验和理论计算结果Table 2 The experimental and theoretical results of paracetamol

通过实验和理论匹配，发现大于3.06 THz的光学模式，主要来源于分子内的振动。图5是大于3.06 THz的四种光学模式。由图可见，这四种光学模式均主要来源于CH3官能团的摆动及扭动。综合气态和固态密度泛函理论的计算结果，对乙酰氨基酚的THz吸收峰的来源情况归纳如下： 1.46和2.11 THz的吸收峰既有分子间作用力也有分子内作用力，1.88，2.52和2.95 THz的吸收峰主要源于分子间相互作用模式，而3.48和4.27 THz的吸收峰主要来源于分子内作用模式。

图5 对乙酰氨基酚的四种分子振动模式Fig.5 The four vibrational modes of paracetamol

图6为中美史克品牌的对乙酰氨基酚片在未变质和变质后的THz谱测试结果。由于测试中药片均为纯药片压制，所以只能在0.3～2.75 THz的测试范围内观察到清晰的吸收峰。由图6可见，未变质前的药片图6(b)(CZR)与对乙酰氨基酚样品图6(a)的THz吸收峰峰位一致。说明可以用对乙酰氨基酚的THz特征吸收峰对其商用药品进行标定。

图6(b)(CER)和(CNR)分别是药片经过170和190 ℃烘烤变质的药片所测试的THz吸收谱。其中，对乙酰氨基酚的熔点为168～172 ℃。由图可见，CER的测试结果并未有明显的变化，说明170℃的环境温度并未对乙酰氨基酚的分子三维结构造成破坏，也说明在熔点范围内，中美史克的对乙酰氨基酚能较好的保持性状。CNR是药片在超出熔点(190 ℃)情况下重制压片测试的THz谱。由图可见，能标定对乙酰氨基酚的三个特征吸收峰完全消失，说明分子间的三维结构已经完全被破坏，药品的物化性质已经发生了转变； 另一方面也说明位于1.46和2.11 THz处的吸收峰虽然有分子内作用力，但是贡献量较小，其主要来源仍然是分子间作用力。此外，CNR在0.69 THz处发现了一个新的吸收峰，说明分子间已经形成了新的三维结构，药片也开始产生了新的物化功能。此研究结果表明运用THz光谱仪完全可以对商用药品进行监测和检测。

图6 对乙酰氨基酚样品(a)和中美史克对乙酰氨基酚片(b)的THz吸收谱Fig.6 The THz spectra of paracetamol sample (a) and its commercial tablets (b)

3 结 论

测试了室温条件下对乙酰氨基酚在0.3～4.5 THz范围的THz光谱，结合密度泛函理论模拟计算，对测试到的七个特征吸收峰的来源进行了分析并归纳。研究发现，对乙酰氨基酚的THz特征吸收峰既有分子间相互作用，也有分子内作用力的贡献。通过对中美史克对乙酰氨基酚片变质前后的THz时域光谱的测试与分析，发现未变质的药片与对乙酰氨基酚样品的THz吸收峰完全一致； 当药片变质后，其THz特征吸收峰完全消失，说明通过其THz特征吸收峰完全可以辨别药品有无变质； 变质后的对乙酰氨基酚片出现新的特征吸收峰，说明其分子间新的相互作用力已经形成，开始产生了新的生化功能。本文的研究有望对药品的检测和监测、药物生化功能的揭示起到促进作用。