羊布鲁氏菌病的诊断与防治

朱应平

（山东省济南市钢城区农业农村局，山东 济南271104）

布鲁氏菌是一种对环境适应性强且对动物和人类侵害性大的致病菌，除了感染羊、牛、猪等家畜外，还可感染人类，在我国属于二类动物疫病。致病菌可通过消化道、呼吸道、昆虫叮咬和受损黏膜等渠道感染易感动物和人类[1]。

1 病原特点

羊布鲁氏菌是一种短杆（球）状的革兰氏阴性嗜氧菌，无荚膜无芽孢，对环境的耐受力极强，在干燥或湿润环境中均可存活数月。但对高温、紫外线光照不耐受，当环境温度超过100℃且湿度较小时，8 min可将其杀灭，在80℃的湿热环境中6 min可被杀灭。紫外线光照4 h也可杀灭此菌。同时，羊布鲁氏菌对大多数消毒剂不耐受。

2 流行病学

2.1 传染源

感染羊布鲁氏菌的病羊和隐性带菌羊。

2.2 易感动物

牛、羊、猪和人类均可感染，母畜发病率高于公畜，成年动物发病率高于幼龄动物，尤其是第一胎母畜更易感。

2.3 传播途径

母羊产道分泌物、粪尿、乳汁、羊水、胎衣和流产组织，种公羊的精液，病死羊的肉、组织脏器、羊皮、羊毛等均含有大量的羊布鲁氏菌。该致病菌可通过消化道、呼吸道、结膜或交配传播，也可通过吸血昆虫机械传播。

2.4 流行特点

一是无典型的流行季节。但夏季高温潮湿有利于布鲁氏菌滋生。二是呈地方性流行。在老疫区，母羊流产率低；在新疫区，主要危害妊娠母羊，导致流产率高。

3 临床症状

3.1 羔羊症状

羊布鲁氏菌对羔羊危害不大，许多羔羊感染后不会出现典型症状。

3.2 母羊症状

羊布鲁氏菌对母羊尤其是妊娠母羊危害大，发病初期，母羊食欲不佳、精神不振、逐渐消瘦，阴道分泌物呈黄色。一般在妊娠后3～4个月开始出现子宫内膜炎症状，阴道分泌物呈灰白色，突然流产，即使能够分娩出胎儿也多为死胎，且产后胎衣不下的几率非常高。未怀孕母羊感染后发情不规律，受胎率低。哺乳母羊感染后出现乳房炎，部分母羊还会出现关节炎等症状。

3.3 公羊症状

发病初期食欲和精神不振、喜卧，随着病情发展，公羊睾丸发热、萎缩，出现睾丸炎甚至坏死，精液品质明显变差，甚至丧失种用功能。

4 病理解剖

4.1 母羊

妊娠母羊流产组织呈黄色，内含大量胶样浸润物质。流产胎儿有明显的败血症状，尤其是流产胎儿的皮下和肌肉组织出血明显，胃肠黏膜充血。胎盘绒毛膜充血肿胀，并有许多出血点，部分组织呈糜烂状。母羊肝脏有坏死灶，真胃黏膜出血明显，脾脏淋巴结肿大。

4.2 公羊

公羊睾丸肿胀，阴囊皮肤上有少量出血点，病情严重的公羊睾丸上出现坏死灶。

5 诊断方法

5.1 显微镜诊断

无菌条件下采集病羊流产组织、胎衣、真胃内容物等制成涂片，用专用的布氏杆菌染色液对涂片进行染色，然后置于光学显微镜下观察致病菌，若能发现短小杆菌且颜色呈红色，即说明病料中含有布鲁氏菌。

5.2 致病菌的分离培养

无菌条件下采集病羊血液，接种至血液增菌液中，混匀后37℃下培养3 d，若血增菌阳性报警则提示为阳性菌。可接种到巧克力琼脂培养基上，置于二氧化碳培养箱内37℃下培养24～48 h，再置于超净台上观察，若发现培养基表面有光滑湿润的灰白色针尖状菌落，则初步判定为布鲁氏菌。

5.3 血清学诊断

5.3.1 酶联免疫吸附实验（ELISA）。ELISA实验检测仪器为酶标仪，可杜绝人为判断造成的误差，具有灵敏度和准确度高的特点，但是成本高。在96孔板中加入阴性、阳性和待检血清，25℃孵育1 h后洗涤，加入酶标抗体，25℃下孵育30 min后洗涤，加入TMB底物，避光孵育20 min后加入终止液，在酶标仪上检测450 nm处的吸光值，若S/P≥120%则为阳性。

5.3.2 虎红平板凝集实验 （RBPT）。RBPT实验耗时短、操作简便、成本低、灵敏度高，适用于羊群、牛群和生猪群体的普查。采集待检羊血液样本，离心收集血清，在玻璃板上加入虎红平板凝集抗原（粉红色）和等量待检血清，用无菌牙签混合后，4～5 min内观察反应结果，若仍为粉红色且无凝集则为阴性，若发现粉色变淡且出现凝集则为阳性。

5.3.3 补体结合试验（CFT）。CFT实验操作复杂，反应成分较多，但特异性和灵敏度高，假阳性率低。准备溶血素、抗原、补体、血清样本（阴性、阳性和待检血清）、2.5%红细胞悬液这五种材料，若出现40%溶血即为阳性，若出现100%溶血则为阴性。

5.3.4 试管凝集实验（SAT）。SAT实验成本低、敏感性强，但操作复杂，容易受实验人员主观判断的影响，因此不适于布鲁氏菌的普查。

5.4 分子生物学诊断

荧光定量PCR方法具有灵敏度和特异性高的特点，且能定量，但是仪器设备成本高，对操作人员的技术水平有一定的要求，因此目前只局限于实验室检测。

6 防治措施

6.1 定期筛查、检疫

每年对羊群进行2～3次布鲁氏菌血清学检测，若发现阳性病羊需要及时隔离和进行药物治疗，并对治疗后的病羊进行多次血清学检测，若3次以上均为阳性则需淘汰[2]。

6.2 自繁自养，降低外源性风险

养殖场最好采用自繁自养的饲养方式，这样可以杜绝外源性病菌侵袭。若必须引种，则需要对引种区域的羊只做好流行病学调查，并核查产地检疫证明。羊只到场后不能立即混群饲养，需要隔离30 d后进行布鲁氏菌病筛查，只有结果为阴性才能合群。隔离期间由养殖场派专门人员进行饲养管理。

6.3 合理护理羔羊

若母羊妊娠后期感染布鲁氏菌，则羔羊出生后体质较弱，也可能携带致病菌，因此需要做好羔羊护理工作。即羔羊出生后与母羊隔离饲养，初乳和常乳可以是其他非感染的健康母羊的乳汁。羔羊至5月龄后采集其血液样本进行布鲁氏菌筛查，若为阴性则继续饲养；若为阳性则进行隔离，并根据治疗情况决定淘汰与否。

6.4 环境消毒

由于布鲁氏菌对大多数消毒剂较为敏感，养殖户可通过日常消毒有效杀灭土壤和环境中的致病菌。羊舍、用具等可用2%氢氧化钠溶液或10%石灰乳喷洒消毒。及时更换垫草，保障羊舍和运动场地面干燥无粪污。对病死羊及其污染物要做好无害化处理[3]。

6.5 人员防护

养殖场人员必须做好自身消毒，接触羊群前后都需要用消毒液清洗衣物和手，并对衣物进行紫外照射消毒。

7 结语

综上所述，羊布鲁氏菌病传播途径广、侵袭性强，养殖户必须树立正确的防控意识，采取科学的防范措施。只有做好羊群净化工作才能从根本上降低疾病发生率。针对高发区域，可定期给羊只接种布鲁氏菌疫苗，以提高羊群整体免疫力。