甘肃栽培肉苁蓉的鉴别研究

苏学秀 张富娴 贾存勤 滕泽学 杨 丽 陈小娟 杨世琴*

1.甘肃省白银市药品检验检测中心，甘肃 白银 730900；2.甘肃汇勤生物科技有限公司，甘肃 靖远 730600

肉苁蓉为常用的滋补中药，具有补肾阳、益精血、润肠通便的功能，常用于治疗肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力、肠燥便秘等[1];具有调节免疫、抗氧化抗衰老、改善记忆[2]、抗病毒抗肿瘤等药理作用[3]，主产于中国内蒙古、新疆、甘肃、宁夏等产区[4]。甘肃栽培肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉CistanchedeserticolaY. C. Ma的干燥带鳞叶的肉质茎，又称荒漠肉苁蓉[5]。《中国药典》2015年版一部收载肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉CistanchedeserticolaY. C. Ma或管花肉苁蓉Cistanchetubulosa(Schenk)Wight的干燥带鳞叶的肉质茎[1]。为了更好地鉴别甘肃栽培肉苁蓉，本文建立了甘肃栽培肉苁蓉显微、薄层色谱鉴别方法，为鉴别甘肃栽培肉苁蓉提供依据。

1 仪器设备及材料

详见表1。

2 肉苁蓉样品

试验用肉苁蓉是2018年10月及2019年4月在甘肃种植产区酒泉市、张掖市、武威市、白银市采挖的检品，经笔者贾存勤正高级工程师鉴定为列当科植物肉苁蓉 Cistanche deserticola Y. C. Ma的干燥带鳞叶的肉质茎，见表2、图1。

3 显微鉴别

由于肉苁蓉一般较为粗大，显微镜视野有限，采用显微数码成像技术建立了甘肃栽培肉苁蓉的粉末显微鉴别方法。

3.1 方法 取肉苁蓉样品粉碎过4号筛的粉末，用水合氯醛试液透化后[6]，使用电子成像显微镜，在40倍物镜下观察其显微特征，并拍照见图2。

表1 仪器设备及材料

表2 肉苁蓉样品信息

A.肉苁蓉鲜品图 B.肉苁蓉饮片图图1 肉苁蓉样品性状特征图

A.导管；B.厚壁细胞；C.薄壁细胞；D.淀粉粒；E.纤维图2 肉苁蓉显微特征图

4 薄层色谱鉴别

4.1 色谱条件的优选

4.1.1 提取方法 对不同的取样量(0.5 g、1.0 g、1.5 g)，不同的提取方式(水浴回流加热、超声)，不同提取溶剂(乙醇、乙醚、甲醇)，不同提取时间(10 min、15 min、20 min)，分别进行考察，确定了最佳的提取方法。

4.1.2 展开条件 对不同的点样量(0.5 μL、1.0 μL、1.5 μL、2.0 μL、2.5 μL)，不同薄层板(G板、GF254板、聚酰胺板)，不同展开剂[甲醇-醋酸-水(2∶1∶7 )、甲醇-乙酸乙酯-水(2∶1∶7 )，不同温湿度(T:17 ℃,RH:40%; T:22 ℃,RH:50%; T:25 ℃,RH:60%)，不同检视条件(365 nm、254 nm)进行了比较，优化了薄层色谱条件(T：温度，RH：干湿球法测定得的相对湿度)。

4.2 对照溶液制备

4.2.1 对照品溶液制备 精密取松果菊苷对照品11.20 mg(按89.7%计)、毛蕊花糖苷对照品12.04 mg(按92.5%计)，分别置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，分别制成每 1.00 mg/mL 的松果菊苷对照品溶液，1.11 mg/mL的毛蕊花糖苷溶液，作为对照品溶液。

4.2.2 对照药材溶液的制备 称取肉苁蓉对照药材粉末1.02 g，加甲醇20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液浓缩至近干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为样品溶液。

4.3 样品溶液制备 取5批次肉苁蓉粉末各1.0 g，加甲醇20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液浓缩至近干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为样品溶液。

4.4 展开 吸取“4.3”的5批次样品溶液、“4.2.1”对照品溶液、“4.2.2”对照药材溶液各 2 μL 点于同一聚酰胺薄层板上，在温度为22～25 ℃，湿度为40%～50%条件下，以甲醇-醋酸-水(2∶1∶7 ) 为展开剂，展开，取出，晾干。

4.5 检视 将“4.4”项薄层板置于紫外光灯( 365 nm) 下检视，结果见图3。

S1：肉苁蓉对照药材；S2：松果菊苷；S3：毛蕊花糖苷; S1-5:肉苁蓉样品图3 肉苁蓉薄层色谱图

5 结果与讨论

5.1 显微鉴别结果 粉末呈棕褐色。薄壁细胞呈不规则多边形，排列紧密，壁略弯曲。厚壁细胞呈类多角形，壁厚，隐约可见层纹。导管为螺纹、网纹导管。淀粉粒较多，为长卵形、球形、长圆形，长 8～40 μm，脐点多呈点状、裂缝状;复粒极少,由2分粒组成[7]。纤维长梭形，有的中间有隔。

5.2 薄层色谱鉴别标准 取本品粉末1 g，加甲醇20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液浓缩至近干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。另取肉苁蓉对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。再取松果菊苷对照品、毛蕊花糖苷对照品，加甲醇分别制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各2 μL，分别点于同一聚酰胺薄层板上，在T:22～25 ℃，RH：40%～50%条件下,以甲醇-醋酸-水(2∶1∶7)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。5批样品试验结果，方法专属性强、斑点清晰、分离效果佳、稳定性好。

6 结论

本文首次建立的甘肃栽培肉苁蓉的显微、薄层色谱鉴别方法，完善了质量控制标准，为甘肃栽培肉苁蓉的鉴别提供了依据，建议可作为荒漠肉苁蓉的品种鉴定依据。