液相色谱法测定土壤中灭多威和灭多威肟*

吴彦冬，白 雪，段路路

(上海化工院检测有限公司，上海 200333)

氨基甲酸酯类农药发展于上世纪下半叶，最早在1926年毒扁豆生物碱被发现有杀虫效果。由于该化合物具有类似于有机磷类农药的杀虫机理(抑制生物体内的乙酰胆碱酯酶)，且有机磷农药是使用十分广泛的杀虫剂农药。所以，介于可以预测到的广泛研究前景，该化合物被开始作为先导化合物进行研究。通过美国化学企业的研究，发现了甲萘威、吡唑威、灭多威等一系列杀虫剂。本世纪，灭多威占据了大部分在氨基甲酸酯类农药的市场销售份额。这些杀虫剂由于高毒性，不仅在杀虫上有应用，还具有杀螨、杀线虫的活性。灭多威又称万灵、灭多虫，是一种广谱性的速效杀虫剂。灭多威肟，又名甲硫基乙醛肟，一般是合成灭多威的中间体。

灭多威是农业生产中常见的杀虫剂。目前灭多威的测定方法主要采用液相色谱法[1-3]。灭多威肟的测定方法主要有气相色谱法和液相色谱法[4-5]。目前尚未见到相关土壤中灭多威和灭多威肟同时测定方法。本文针对土壤中灭多威和灭多威肟的检测，建立了一种简便而快速地检测的土壤中灭多威和灭多威肟的分析方法。

1 实 验

1.1 仪 器

LC-20A(包括PDA检测器SPD-M20A、柱温箱CTO-20A、自动进样器SIL-10AXL)，日本岛津；SHA-C水平震荡仪；高速旋转离心仪；筛网等试验设备。

1.2 试剂及标准品

灭多威和灭多威肟标样(100 μg/mL，溶于乙腈)，购置于安谱公司。乙腈(HPLC纯)，超纯水(由超纯水机制得)。

1.3 仪器参数

色谱柱：Shim-Pack VP-ODS C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm)。流动相A：乙腈，流动相B：超纯水。梯度洗脱见表 1。柱温30 ℃。流速1 mL/min。检测波长232 nm。外标法定量。

表1 梯度洗脱表Table 1 Gradient table

1.4 样品前处理步骤

将采取的土壤在30 ℃以下风干，去除其中的碎石、木片等杂质，经非金属材质的2mm筛网过筛，得到实验用土。取10 g实验用土，与实验用水按照质量体积为1 g:10 mL的比例进行混合，得到100 mL的实验混合液。利用0.05 mol/L的盐酸溶液或0.05 mol/L的氢氧化钠溶液将实验混合液pH调整到中性。将混合液放置于水平震荡仪中常温震荡3 h，静置后，取其中30 mL溶液离心20 min。取上清液经0.45 μm滤膜过滤后，置于2 mL样品瓶中，待进样。对于静置后试验溶液分层或有机物干扰较大的情况，可利用正己烷萃取后，取水层溶液过滤后进样。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

通过分析一定质量浓度的灭多威和灭多威肟标准溶液，通过紫外可见吸收光谱分析，发现灭多威肟在219～308 nm有较强的吸收峰；灭多威在215～245 nm有较好的吸收峰。综合不同吸收波长的液相色谱图，经过优化，在232 nm波长中两个化合物有较好的吸收峰形。

2.2 提取方法选择

由于灭多威肟遇酸分解为醛酮，故提取样品时的水溶液pH值应保持在中性或弱碱性条件，以防止灭多威肟分解。灭多威和灭多威肟均溶于水，故本方法中采用纯水作为提取试剂进行前处理。

2.3 工作曲线配置

分别取一定量灭多威和灭多威肟标准溶液，利用水稀释后，得到10 μg/mL的混合标准使用液。分别取一定量的混合标准使用液，利用实验用水稀释后，制备灭多威和灭多威肟质量浓度为5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、100 μg/L、500 μg/L、1000 μg/L的标准系列。待液相色谱稳定后，将标准系列溶液由低浓度至高浓度按1.3节的仪器条件进样，以标准系列溶液中两种化合物的浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标，建立目标化合物的校准曲线。

在上述仪器条件下，灭多威和灭多威肟在5 μg/L～1 μg/mL浓度范围内具有良好的线性关系，其线性回归方程为：

ρ(灭多威)=149.910A-315.214， 相关系数R=0.9999

ρ(灭多威肟)=1258.32A-571.449， 相关系数R=0.9999

本方法测定灭多威和灭多威肟的最低检出限为0.05 mg/kg。

图1 灭多威和灭多威肟液相色谱图Fig.1 Methomyl and Methomyl oxime LC separation

2.4 方法精密度

取不同浓度的样品按照上述提取方法进行平行试验。实验数据如表2、表3所示。

表2 灭多威方法精密度表(质量浓度≈0.05mg/kg)Table 2 Method precision table of Methomyl (consentration≈0.05 mg/kg)

表3 灭多威肟方法精密度表(质量浓度≈0.05 mg/kg)Table 3 Method precision table of Methomyl oxime (consentration≈0.05 mg/kg)

取一定质量的已知浓度的土壤样品，加入一定量的混合标准溶液，按试验方法进行测试，进行回收率实验，实验数据如表4、表5所示。

表4 灭多威回收率结果表Table 4 Recovery result of Methomyl

表5 灭多威肟回收率结果表Table 5 Recovery result of Methomyl oxime

由表2～表5可以看出本方法对于两种化合物的相对平行偏差均小于1%，RSD为2.418%和7.382%，回收率均大于85%，平均回收率为96.7%和92.3%，具有良好的方法精密度及回收率，满足测试方法要求。

3 结 论

通过试验结果表明，利用pH=7的水作提取剂，水平震荡 3 h后，取上层清液过滤，离心过滤后待进样，采用乙腈和水梯度洗脱作流动相，利用反相色谱的方式，在检测波长为232 nm，流速为1.0 mL/min的条件下，可以同时分离测定灭多威和灭多威肟两种物质。该方法检出限为0.05 mg/kg，精密度及回收率测试满足土壤检测的方法要求。相较于采用甲醇、乙腈等有机试剂做提取剂的方法，该方法在保证检出限在μg/kg级别的同时，具有操作方便的特点，适用于大批量的土壤样品的测定工作。