系统性红斑狼疮病人外周血CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞水平的临床检验意义

文 /秦妮芳

在临床中，对于系统性红斑狼疮（SLE）而言，其是十分普遍的免疫性疾病，生成自身抗体、各个炎症细胞发生浸润等均是其有关的病理变化，免疫性异常是引发SLE最为关键的原因[1]。SLE患者具有许多免疫调节机制方面的异常，而其中，由自然杀伤细胞（NK）所生成的固有免疫最为普遍。在NK细胞的表面具有许多非特异性抗原受体，能够辨别并杀伤各类病毒感染细胞；其极有可能可以引导免疫耐受缺失而引发组织病理损害，进而参与到SLE发生的这一整个过程中。所以，分析并研究NK细胞所发生的改变，加之其与SLE发生、进展间所具有的关联性是十分关键的[2]。本研究特选取本院88例SLE患者，分析并研究外周血CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞的应用效果与价值。

1 对象及方法

1.1 对象

摘选2018年3月-2020年4月期间，我院接收的SLE病例88例，同时，在同一段时间中，摘选我院的健康体检者54例，把其作为对照组，对其就外周血CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞进行检测。对照组：男、女依次是31例、23例；年龄范围于19岁-64岁，平均（36.80±5.11）岁。SLE组：男、女依次是23例、65例；年龄范围于21岁-66岁，平均（43.16±6.02）岁；参照SLE疾病活动性指数（SLEDAI）评分，获活动组（共33例）、非活动组（共55例）；参照肾功能检测评判肾脏受累，获狼疮性肾炎（LN）组（共27例）、非LN组（共61例）。对比2组的一般资料后差异无统计学意义，（P＞0.05）。

1.2 方法

患者在住院后，对其各项资料进行收集，同时，辅助其就尿常规、血常规等进行检测，借助SLEDAI对其病情进行评估。同时，对患者的外周静脉血液进行采集，共3mL，放至EDTA-K2型抗凝管，在进行摇匀后，处于室温下进行储存，并借助流式细胞仪（型号即BD FACS Calibur）与有关的试剂对CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞总数、比例等进行检测。把50μL的全血标本放至BD Trucount型绝对计数管，并标识成管1、管2，对细胞总数进行调节，即1×107/mL，在管1加20uLCD4-APC、CD45-PerCP、CD3-FITC、CD8-PE，在管2加20uLCD（16+56）-PE、CD3FITC、CD45-PerCP、CD19-APC，在进行混匀后，处于20℃-25℃中，进行15min的避光反应，两管加10倍稀释后的BD Multitest IMK kit型溶血素，共450μL，在进行摇匀后，应用以上各项条件进行15min的孵育，之后，对样本进行上机检测，并应用BD Multiset型软件获得有关的数据，对其CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率进行检测。

1.3 观察指标

检测后，比较所得的CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率、SLEDAI评分、24h尿蛋白定量。

1.4 数据分析处理

将本文数据一律输入SPSS22.0这个软件中统计处理，CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率、SLEDAI评分、24h尿蛋白定量一律用（）来表示，组间差异性选择t检验，当P＜0.05时说明组间对比有意义。

2 结果

2.1 SLE组与对照组CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞

SLE组的CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率依次是（163.69±42.04）个/μL、（9.56±1.25）%，较之于对照组依次是（355.38±81.75）个/μL、（13.80±1.17）%低，P＜0.05。

2.2 活动组与非活动组CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞

活动组的CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率依次是（130.45±29.87）个/μL、（8.14±1.08）%，较之于非活动组依次是（177.93±7.16）个/μL、（9.79±1.52）%低，而其SLEDAI评分、24h 尿蛋白定量依次是（6.45±1.30）分、（1.46±0.02）g/天，较之于非活动组依次是（3.28±1.89）分、（0.63±0.09）g/天高，P＜0.05。

2.3 LN组与非LN组CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞

LN组的CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率依次是（109.06±22.74）个/μL、（7.95±1.03）%，较之于非LN组依次是（183.58±47.09）个 /μL、（9.27±1.68）% 低，而其 SLEDAI评分、24h尿蛋白定量依次是（7.46±1.97）分、（1.58±0.04）g/天，较之于非LN组依次是（2.72±1.03）分（、0.17±0.01）g/天高，P＜0.05。

3 讨论

SLE患者会出现免疫调节失衡，大多都会累及到免疫系统，在临床中对各类自身抗体进行分析与研究后，T淋巴细胞、B淋巴细胞等对于SLE所具有的作用已经得到明确，而其中，B淋巴细胞所生成的自身抗体是引发SLE最为核心的因素，而T淋巴细胞能够全方位地发挥出免疫调节功能，对B细胞带来刺激，让其发生活化、增殖等，同时，其还参与到细胞免疫[3]。对于NK细胞而言，其与SLE 间也紧密相连；其十分关键的生理功能是自然防御、免疫调节，是第三大类淋巴细胞谱系，可以借助主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHC-Ⅰ）分子对各个靶细胞进行辨别、清除；同时，NK细胞对于许多感染性疾病、免疫性疾病均发挥出了十分关键的作用。

在本次研究中，对SLE患者就CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞进行检测，SLE组的CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率较之于对照组低。P＜0.05；分析其原因，即：NK细胞会朝靶器官发生聚集，并使得机体对自身抗体无法进行抑制，这是由于处于活动期中的SLE患者机体中具有更多的自身抗体、循环免疫复合物，所以，NK细胞免疫调节对于SLE发挥出了十分关键的作用[4]。对于SLEDAI评分而言，其是参照患者的各项表现与症状、实验室检测对病情进行评判，进而给选取激素、免疫抑制剂等给予更多的参照[5]。在本次研究中，活动组的CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率较之于非活动组低，而其SLEDAI评分较之于非活动组高，P＜0.05；由此证明，在对NK细胞进行检测后，能够对SLE患者的病情进行评估；同时，活动组的24h尿蛋白定量较之于非活动组高，P＜0.05；由此证明，处于活动期中的SLE患者会出现十分严重的肾脏损害。在SLE患者的病情逐步出现进展后，会使得许多器官受到损伤，而其中，LN是十分普遍的并发症，其极有可能与各类免疫复合物在肾小球滤过膜中发生沉积、各类干扰素有所上升间紧密相连[6]。另外，SLE患者发生肾功能受损的总程度与淋巴细胞浸润间紧密相连，在CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞得到激活后，会释放出许多干扰素、细胞毒颗粒，进而引发了肾功能损害。在本次研究中，LN组的CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞、总百分率较之于非LN组低，而其SLEDAI评分、24h尿蛋白定量较之于非LN组高，P＜0.05；由此证明，在NK细胞逐步下降后， SLE患者会出现愈加严重的肾功能损害。有研究人员指出，对于MRL/lpr狼疮样小鼠而言，在其肾脏中，具有许多NK细胞、干扰素等，引发了肾脏组织损伤，且在病情愈加严重后，干扰素有所增多，而NK细胞有所下降，这是由于细胞因子会使得NK细胞发生凋亡，所以，在对NK细胞进行检测后，对于评判SLE患者所出现的肾功能损害是十分关键的，临床中需要更为关注到。对于NK细胞而言，其在适应性免疫调节中也具有十分关键的地位，且SLE是与许多免疫功能性异常间紧密相连的，所以，临床中需要更为关注对NK细胞与T淋巴细胞、自身抗体、细胞因子等所具有的关联性进行分析与研究，以确定NK细胞对于SLE所具有的作用。

综上所述，SLE患者具有更少的外周血CD3~-CD16~+CD56~+NK细胞，在全方位掌握其具体的情况后，能够给评判患者的病情、肾功能损害等给予更多的参照。