临床实验室儿童生化检验项目实施WS/T 780-2021的建议

丁海峰，张琪，周剑涛，

临床实验室儿童生化检验项目实施WS/T 780-2021的建议

丁海峰1，3，张琪2，周剑涛1，2

（1.黄冈职业技术学院，湖北 黄冈 438002；2.武汉千麦医学检验实验室有限公司，湖北 武汉 430012；3.黄冈市临床检验中心，湖北 黄冈 438000）

临床实验室将于2021年10月1日实施《儿童临床常用生化检验项目参考区间》（WS/T 780-2021），WS/T 780-2021涉及分析项目17项，亚组参考区间指标组89项。临床实验室，尤其是基层医疗机构实验室，实验验证转换参考区间面临收集儿童样本的困难。本文建议实验室根据各自条件采用不同方式确认WS/T 780-2021生化检验项目参考区间值，如评估、实验验证，以及允许基层临床实验室采用属地县（市）医院实验室验证或评估的参考区间值。

参考区间；行业标准；实施建议；临床实验室

儿童检验指标参考区间的制定对儿科临床的疾病诊断、疗效观察、预后判断及健康评估都起着至关重要的作用。中华人民共和国卫生行业标准《儿童临床常用生化检验项目参考区间》（WS/T 780-2021）[1]于2021年4月19日发布，将于2021年10月1日正式实施。临床实验室当前需要做一系列准备工作，将目前实际应用的儿童临床常用生化检验分析项目的参考区间规范为行业标准，即WS/T 780-2021文件所规定的28天～18岁中国儿童临床常用生化检验项目参考区间。实验室转换检验项目参考区间，一般原则是每个项目应按照新建立参考区间[2] [3]相应的年龄与性别分组进行验证。WS/T 780-2021涉及儿童临床常用生化检验分析项目17项，亚组参考区间指标共计89项。实验室要获取每年龄组儿童的标本，尤其是新生儿和婴幼儿的标本进行检测验证，面临的困难很大。部分临床实验室及其从事具体生化检验项目工作的检验同仁，对于临床实验室儿童临床常用生化检验项目如何实施WS/T 780-2021所规定的参考区间，感到困惑。本文围绕临床实验室儿童临床常用生化检验项目如何实施WS/T 780-2021进行讨论，提出一些实施策略、方法或建议，供同仁参考。

1 临床实验室应首先考虑引用WS/T 780-2021文件的参考区间

医疗卫生机构实验室报告和解释儿童临床常用生化检验项目检验结果，应该首先考虑引用WS/T 780-2021文件的参考区间（见条款5.1.1）：由于建立儿童参考区间的研究工作量和成本巨大，实施难度较高，临床实验室引用参考区间比自己建立参考区间更为现实、可行；本参考区间是基于中国健康儿童大样本多中心研究的结果；研究中的检验结果可溯源至国际公认参考方法或标准物质，参见附录 B；实验室在使用本文件的参考区间时应考虑到生化指标实验室检测的方法学差异。这是文件对临床实验室提出的要求，临床实验室应该自觉执行，将各实验室目前的儿童临床常用生化检验项目参考区间规范为WS/T 780-2021文件所规定的参考区间值。

2 临床实验室可采用不同方式评价引用WS/T 780-2021文件的参考区间

根据条款5.1.2 的要求，使用WS/T 780-2021文件的参考区间前应进行必要的验证或评估。因此，实验室是否适合引用WS/T 780-2021文件的参考区间可采用两种评价方式，即验证或评估。

如何选择不同的评价方式？参考区间的转化涉及2个重要问题，即分析系统的可比性和实验项目人群的可比性。WS/T 780-2021文件参考区间的适用性主要取决于实验室检验结果与参考区间建立时检验结果的可比性以及人群的适用性（见条款5.1.2 注1）。根据条款5.2.2，实验室在应用WS/T 780-2021文件参考区间前应对分析全过程的质量管理和目标应用人群进行评估，尤其应征求临床医生的评审意见。

若有理由认为与参考区间研究的分析质量和参考人群有足够可比性，可直接使用WS/T 780-2021文件的参考区间，即不需要对参考区间进行验证。

若对分析质量和目标应用人群可比性不确定或实验室管理体系要求对引用的参考区间进行验证（见条款5.2.3），实验室应该进行参考区间验证。

3 采用评估方式确定引用WS/T 780-2021文件的参考区间

实验室通过评价其与其他实验室或诊断试剂制造商建立参考区间的分析前、分析中、分析后程序，参考区间的估计方法，参考人群的地理分布和人口统计学资料完全一致时，参考区间可不经验证直接使用。

临床实验室经过对儿童临床常用生化检验项目全过程的质量管理和目标应用人群进行评估，且征求临床医生的评审意见后，若认为与WS/T 780-2021文件参考区间研究的分析质量和参考人群有足够可比性，即可确定直接使用WS/T 780-2021文件的参考区间。否则，需要进行验证。

如何证明实验室儿童临床常用生化检验项目与WS/T 780-2021文件参考区间研究的分析质量和参考人群有足够可比性？这需要实验室提供评估报告予以证实，其报告内容必须包括（但不限于）下述内容：

3.1 分析全过程的质量管理

检验过程中为保证检测结果的准确性，要进行全程、各环节质量控制：一是标本的质量控制，标本要求采用血清检测（提供标本采集手册或项目检测SOP文件）；血液样本采集与处理原则按 WS/T 225、WS/T 661[4]及儿科临床标本采集有关要求执行（提供标本采集手册）；血液样本处理及保存[5]（提供标本采集手册或项目检测SOP文件），样本在采集后2 h内及时分离血清，检查并剔除溶血、黄疸和乳糜样本。二是实验室操作管理，实验室儿童临床常用生化检验项目SOP文件符合《医疗机构临床实验室管理办法》[6]及仪器说明书的要求。三是实验室设备及试剂的要求，实验室使用的临床实验室常用的生化分析系统及其配套试剂和校准品符合《全国临床检验操作规程》[7]（4版）要求；临床常用生化检验项目检测方法和检测结果的计量学溯源符合表1。

表1 临床常用生化检验项目检测方法和检测结果的计量学溯源

实验室儿童临床常用生化检验项目性能验证资料，精密度和正确度满足WS/T 403的有关要求；实验室每年至少两次使用配套校准品对分析系统进行校准，以及实验室内的结果可比性等进行验证，评价结果符合相关要求；实验室每份血清样本检测一次。四是室内质控和室间质评的要求，室内质量控制使用正常和异常两个浓度水平的配套质控物，每分析批前、批后及每隔100测试即进行质控物分析；实验室每年定期参加国家卫生健康委临床检验中心组织的临床常用生化检验项目正确度验证及室间质量评价活动，结果符合要求。

3.2 目标应用人群

临床实验室儿童生化检验项目适用对象包括：一是应用年龄范围，28天～18岁；二是应用人群地域，位于东北、华北、西北、西南、华中、华南、华东地区；三是应用种族，阐明是否存在不同种族、海拔、特殊生活习惯等方面的差异。

3.3 临床医生的评审意见

转化的参考区间均需要进行临床验证，以评估其临床适用性。提供征求临床医生对参考区间评审且通过评审的调查资料。

上述这些内容，如果实验室与WS/T 780-2021文件参考区间研究的分析质量和参考人群一致，应该确定实验室适合引用WS/T 780-2021文件参考区间，无需进行参考区间验证。

评估报告中所包含的内容看似很多，但对于临床常用生化检验项目通过了CNAS认可的实验室，或者日常按照ISO15189建立质量体系管理运行的实验室而言，其现有资料应该能够满足评估的需要。对于不满足的方面应该按照WS/T 780-2021文件进行改进使其达到要求。

4 采用验证方式确定引用WS/T 780-2021文件的参考区间

若对分析质量和目标应用人群可比性不确定，或实验室管理体系要求对引用的参考区间进行验证，实验室应该按WS/T 402 有关规定进行参考区间的验证。

每个项目应按照新建立参考区间相应的年龄与性别分组进行验证。参考区间的验证步骤与判断标准按照WS/T 780-2021文件实施，本文不详细描述。

参考区间验证实验过程并不困难，难的是获取验证所需要的标本。对于容易收集到验证标本的实验室，例如二级及二级以上的综合医院、儿童专科医院等，采用参考区间验证方式可能比评估方式出具评估报告更加容易。

参考区间验证结果按照WS/T 780-2021文件判断标准判断是否符合要求，若符合要求，可使用参考区间。

对于未通过验证的情况，实验室首先要评价分析质量，若证实导致验证未通过是分析系统的检测质量问题，则应改进分析系统的检测质量。若证实验证未通过是验证人群差异导致的，如不同地域、种族、海拔、特殊生活习惯等因素，则应按WS/T 402要求建立或引用适宜的参考区间。

5 基层临床实验室确定引用WS/T 780-2021文件参考区间的建议

临床常用生化检验项目是临床常见的基础检验项目，各级各类医疗卫生机构实验室一般有能力开展儿童临床常用生化检验项目。然而，不同临床实验室检测的标本来源，数量差异很大。二级医院以下的基层临床实验室检测标本数量有限，加上基层临床实验室用于有效保存血液标本的条件（例如-80℃低温冷冻冰箱）有限，要完成WS/T 780-2021文件所涉及到17项目的分析性能验证，或89项的亚类参考区间的验证，难度很大[8]。笔者认为，对于基层临床实验室不一定要求每一个实验室去做参考区间的验证与评估。基层临床实验室执行WS/T 780-2021文件，允许直接应用县（市）行政区域医疗体系资源，采用当地县（市）医院实验室验证或评估的参考区间。执行过程中，基层临床实验室应定期（至少半年）与县（市）医院实验室进行检验结果比对。比对结果应符合WS/T 406的要求。

[1]中华人民共和国国家卫生健康委员会.WS/T 780-2021儿童临床常用生化检验项目参考区间[S].2021-04-19.

[2]中华人民共和国卫生部.WS/T 402-2012 临床实验室检验项目参考区间的制定[S].2012-12-24.

[3]NCCLS-C28-A2 How to Define and Determine Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline -Second Edition.

[4]中华人民共和国国家卫生健康委员会.WS/T 661-2020 静脉血液标本采集指南[S].2020-3-26.

[5]中华人民共和国卫生部.WS/T 225-2002临床化学检验血液标本的收集与处理[S].2002- 4-20.

[6]中华人民共和国卫生部.医疗机构临床实验室管理办法[Z].2006-6-1.

[7]尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程(第4版)[M].北京:人民卫生出版社,2015.

[8]宋文琪,彭晓霞,沈颖,等.临床实验室儿童参考区间制定的流程与挑战[J].中华检验医学杂志, 2017,40(5):345-351.

R-331

A

1672-1047（2021）05-0108-03

10.3969/j.issn.1672-1047.2021.05.28

2021-09-06

丁海峰，男，湖北罗田人，副教授。研究方向：临床检验。

[责任编辑：曾华]