浅谈高校家兔胃切除外科实验研究探讨

魏 玲，王鸿骁，杨国淋⋆

（1.南充职业技术学院农业科学技术系 637131；2.川北医学院 637000）

实验动物和动物实验是生物医学研究不可缺少的材料和手段，生命科学的发展常常需要使用动物模型来作为临床研究的基础。实验动物对于人类研究生命科学具有重要的意义，是生命科学研究条件中的首要要素，其中实验动物模型的选择和动物实验的结果直接影响到研究课题的确立和研究成果的水平[1]。动物实验是培养学生外科手术操作能力、科研能力、科研思维必不可少一门课程，能够更好地将理论与实践结合，使学生在实践中进行科研创新。大学生开放性实验是在综合运用该课程所学的知识基础上，以学生为主体，按实验目的进行操作，在老师的指导下由学生独立完成，从而培养学生的实践能力和创新精神。实验动物疾病模型广泛应用于医学研究，建立的很多动物模型已经广泛被应用于治疗人体疾病，如胃食管反流模型，胃溃疡动物模型，Ⅱ型糖尿病模型，急性心肌梗塞动物模型，家兔肺炎衣原体感染模型等[2-6]。胃是人体重要的消化器官之一，是食物的中转站和临时仓库，是人体消化道中最庞大的部分，目前关于胃的研究很多，家兔的胃切除模型常常被用于研究家兔的功能研究。严杰等[7]人采用电针家兔足阳明经头面“四白学”，躯干“梁门”穴，下肢“足三里”穴，观察其对胃黏膜损伤的防御性保护作用，从而证实了足阳明经与胃具有相关性。郭涛等[8]通过研究幽门螺杆菌及其培养上清液粗提蛋白对兔离体胃壁细胞酸分泌的影响，证实了幽门螺杆菌及其分泌的空泡毒素（VacA）可能通过下调壁细胞H+-k+ ATP酶表达水平来抑制组胺刺激的壁细胞酸分泌。罗小林等[9]通过观察家兔不同胃切除手术术后残胃黏膜的病理改变，分析残胃病变的发生率和病变程度，讨论不同术式的优劣性。Vera等[10]以125i标记的猪胃动素为示踪剂配体，采用直接结合技术对兔胃窦和十二指肠平滑肌组织胃动素受体进行了研究。

本文以家兔为实验动物模型对部分胃切进行开放性探索实验研究，旨在培养学生的动手能力，同时开拓学生的科研思维，也为开展此类实验的研究者提供一定的参考意义。

1 实验动物与材料

家兔10只，雌雄兼有，12月龄，3.0±0.2kg，由川北医学院实验动物中心提供。麻醉剂：3%戊巴比妥钠；常规手术器械：方盘、腰盘、3号刀柄、有齿镊、无齿镊、组织剪、弯头止血钳、直头止血钳、肠钳、持针钳、三角针、圆针、刀片、保定器、绑定器、碘伏、酒精、棉球等由川北医学院实验动物中心实验室提供。主要实验器械如图1所示

图1 实验器械

2 家兔胃切操作流程

手前家兔先禁食禁水12h，整个手术在屏障系统的无菌实验室完成，要求学生严格按照无菌原则进行外科手术实验，避免手术过程中感染，手术严格模拟临床手术过程中的注意事项和操作。实验分为10个动物实验小组，每组由4人组成，包括主刀、一助、器械护士和麻醉师，分工明确，知晓职责。在手术开始前学生生要重点学习家兔的生物学特性、知道胃在解剖学上的位置、无菌知识、手术器械的分类和使用、动物福利等理论知识。对家兔的保定、抓取、耳缘静脉注射等实验能熟练操作。家兔胃切除实验手术流程主要包括：①家兔保定；②耳缘静脉注射麻醉；③开口；④ 结扎；⑤胃切除；⑥缝合；⑦术后护理。

2.1 家兔的保定

右手抓住家兔颈背部皮肤，轻轻提起，左手托住其臀部，使其呈坐位姿势，类似于怀抱婴儿（抓取的过程注意不要直接抓取家兔的耳朵），然后用家兔专用固定器保定家兔，让其四肢伸展俯爬在固定器上如图2。

图2 家兔的保定

2.2 耳缘静脉麻醉

首先使用精度为0.1g的电子称重家兔，然后按1.0mL/kg计算浓度为3%戊巴比妥钠麻醉剂量。在所需部位先揪除毛发，然后先碘伏后用酒精棉球擦拭使耳缘静脉血管突出，左手拇指和食指在上部，中指、无名指和小指在耳缘下部，夹住家兔的耳朵固定。右手持注射器使针头由静脉中末端针尖斜面朝上进针注射麻醉剂，具体操作示意图见图3-4。

图3 耳缘静脉消毒

图4 耳缘静脉注射

2.3 开口

待家兔完全麻醉后，将其四肢和头部固定在家兔固定板上，为避免动物麻醉过程中发生窒息，可将舌头拉伸至嘴角。然后在手术部位用剃毛刀除毛，将肋弓上边缘到脐平面的毛剃干净，裸露皮肤进行碘伏消毒，然后铺设创巾，由助手将皮肤绷紧，主刀手慢慢的进行开口，沿腹白线割开皮肤，再沿着腹白线切开肌肉暴露腹腔，寻找合适的胃组织，一般选取胃底，体部血管少的部位。具体操作如图5-8。

图5 家兔固定

图6 除毛

图7 割开皮肤后

图8 腹腔中暴露的胃

2.4 家兔胃切除和缝合

家兔切口找到合适的胃组织后，先做牵引线，无需打结，需穿过浆膜和肌层，一助用止血钳对侧夹起胃组织隔开胃壁并做好纱布止血准备，防止胃糜涌出，防止割到血管，然后将胃糜倒入腰盘之中，进行取材，切2cm2胃组织于盘上留样。然后进行胃缝合，缝合包括胃壁缝合，肌肉缝合，皮肤缝合3个部分。根据缝合原则，胃壁缝合采用康奈尔缝合，然后依次进行肌肉缝合和皮肤缝合，肌肉缝合采用连续缝合方式，皮肤缝合采用间断缝合方式，具体操作流程见图9-16。

图9 做牵引线

图10 夹取胃组织

图11 割开胃壁

图12 取材

图13 胃组织

图14 胃壁缝合

图15 肌肉缝合

图16 皮肤缝合

2.5 术后护理

家兔胃切除手术完成后，待动物苏醒，将其放在清洁的专业兔笼中饲养，温度维持在25℃左右，在术后12h内饮水里面加入20%葡萄糖或维生素C，之后按照正常饲养条件每日定时喂养，每日观察动物健康状况，一周后记录动物的存活率。

3 小结与讨论

本实验经术后良好的护理 10只家兔全部存活，存活率达到100%。在开展家兔胃切除实验中需要注意以下几点：①麻醉的种类和剂量，动物的体型和种类的不同，对麻醉的耐受程度也有很大的差异，因此要对动物的体型和种类选择麻醉剂的种类和剂量，手术过程中如果家兔出现呼吸加快或者苏醒的状况则表明麻醉深度不够，要补充麻醉药物，在手术过程中还需注意检测家兔心跳及呼吸情况；②兔胃切除开口不宜过大，一般在5cm左右，如果开口过大一方面不利于家兔伤口愈合，而另一方面容易引起后期感染；③重视动物福利，实验过程中要遵守3R原则，术后应得到良好护理，家兔胆小怕惊，对声音敏感，耐寒不耐热，耐干不耐湿，术后护理必须提供清洁安静的饲养环境是保证动物术后恢复和存活率的重要保证。

家兔胃切实验手术中包含了动物外科手术的基本知识，学生通过本外科实验能在理论的基础上更加深入掌握该技能，使学生能够充分理解手术前的准备、手术过程中的无菌观念、麻醉方法及麻醉时出现意外的处理、手术的切口和缝合方法等知识，通过动物活体实验可以激发学生的同情心理，学生充分体会到动物福利，3R原则等抽象概念，本研究为开展类似实验研究的师生提供了一定的参考价值。