市售复方甘草含片与复方甘草片组分稳定性比较研究

薄双琴，刘雪枫，景明，朱英布，李宗民，王静

1.甘肃中医药大学药学院，甘肃 兰州 730000；2.甘肃祁连山药业股份有限公司，甘肃 酒泉 735000

复方甘草片收载于《中国药典》，复方甘草含片为国家药品标准，处方由甘草浸膏粉、阿片粉、樟脑、八角茴香油和苯甲酸钠组成，各成分共同发挥了祛痰、镇咳、消炎的作用［1］。复方甘草片的用法为吞服，这样阿片粉中原本含量甚微的吗啡经胃肠吸收、肝脏代谢到达气管、支气管时所剩无几，其他成分在咽部、喉部及气管的浓度也相应降低，药效作用无法充分体现，导致临床疗效不理想［2］。而八角茴香油和樟脑易挥发，在制备、贮存过程中会造成损失，影响药物的疗效。复方甘草含片是将八角茴香油和樟脑制备成β-环糊精包合物，可减少其挥发损失，提高药物稳定性［3］。同时复方甘草含片通过薄膜包衣，既解决储存过程中八角茴香油和樟脑的散失，又掩盖了阿片等成分的不良气味，改善了口感，提高了患者用药的顺应性，也克服了药片吸潮变色等问题。笔者通过对复方甘草含片和复方甘草片生产销售和临床应用的调查，将市售的复方甘草含片与复方甘草片组分稳定性进行了比较研究，期望为复方甘草含片的临床应用和推广提供理论依据。

1 仪器与材料

安捷伦1260 型高效液相色谱仪，Agilent Chem Station for LC Systems 色谱工作站（DAD 检测器）；色谱柱CAPCELL PAK C18 柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；BT25S 型电子天平；Secura125-1CN 电子天平。

甘草酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110731-201619，纯度：93.0%）；吗啡对照品（中国食品药品检定研究院，批号：171201-201324，纯度：99.1%）；八角茴香油（江西百草药业有限公司，批号：20180501，纯度：90%）；樟脑（广西梧州黄埔化工药业有限公司，批号：YZ1806015，纯度：97%）。

复方甘草含片（甘肃祁连山药业股份有限公司，批号：1811068、1811069、1811070）；复方甘草片（甘肃莫高实业发展股份有限公司制药厂，批号：1903181、1903191、1903201）。

2 方法与结果

2.1 甘草酸和吗啡含量测定

2.1.1 复方甘草含片含量测定［4］药品规格：每片含甘草浸膏粉112.5 mg、阿片粉4 mg、樟脑2 mg、八角茴香油2 mg、苯甲酸钠2 mg，12 片×2 板/盒。含量：批号1811068、1811069、1811070 样品甘草酸含量分别为6.81 mg/片、6.92 mg/片、6.86 mg/片，吗啡含量分别为0.38 mg/片、0.39 mg/片、0.38 mg/片。

2.1.2 复方甘草片含量测定［5］药品规格：每片含甘草浸膏粉112.5 mg、阿片粉4 mg、樟脑2 mg、八角茴香油2 mg、苯甲酸钠2 mg，100 片/瓶。含量：批号1903181、1903191、1903201 样品甘草酸含量分别为7.03 mg/片、6.97 mg/片、7.00 mg/片，吗啡含量分别为0.39 mg/片、0.38 mg/片、0.38 mg/片。

2.2 八角茴香油含量测定［6］

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取八角茴香油适量，置10 mL 量瓶中，加95%乙醇至刻度，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 分别称取复方甘草含片和复方甘草含片各25 片的粉末，置于25 mL 具塞试管中，用20 mL95%乙醇作为溶剂，超声处理（240 W，40 kHz）30 min，用95%乙醇定容至25 mL，放置过夜。次日离心10 min（3 000 r/min），精密吸取上层清液5 mL，用0.45 μm 微孔滤膜滤过，精密量取续滤液1 mL，置10 mL 量瓶中，加95%乙醇至刻度，摇匀，即得。

2.2.3 阴性样品溶液的制备 取复方甘草含片和复方甘草片的处方组分及辅料，分别按其样品制备工艺制成八角茴香油阴性对照样品，再按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液，在307 nm 波长处测定吸光度，阴性样品无干扰，方法专属性良好。

2.2.4 最大吸收波长的选择 称取八角茴香油对照品适量，用25 mL95%乙醇溶解，于紫外可见分光光度计200～800 nm 范围内扫描，结果在307 nm 波长处有最大吸收。

2.2.5 精密度试验 取八角茴香油对照品溶液，在307 nm 连续测定6 次，记录吸光度，RSD=1.12 %，方法精密度良好。

由3位MRI诊断医师分析所有MRI图像，结果不一致时经讨论达成一致，观察患者增强MRI图像特征，计算增强MRI在结直肠癌淋巴结转移诊断准确率。

2.2.6 稳定性试验 取同一批的复方甘草含片样品（批号1811068）及复方甘草片样品（批号1903181）制备供试品溶液，分别于0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h 测定，记录吸光度，RSD 分别为1.54 %、1.38%，供试品溶液在5 h 内稳定。

2.2.7 重复性试验 称取同一批复方甘草含片（批号1811068）及复方甘草片（批号1903181）各6 份，分别制备供试品溶液，测定含量，RSD 分别为0.89%、0.93%，方法的重现性良好。

2.2.8 加样回收试验 精密称取已知含量的复方甘草含片样品（批号1811068）及复方甘草片样品（批号1903181）各6 份，分别加入一定量的八角茴香油对照品，分别测定吸光度，计算回收率，平均回收率分别为97.08%、96.66%，RSD 分别为1.15%、1.09%。

2.2.9 样品含量测定 依法制备复方甘草含片和复方甘草片各三批样品的供试品溶液，分别测定吸光度，计算八角茴香油含量，结果复方甘草含片三批样品的含量分别为0.83 mg/片、0.91 mg/片、0.87 mg/片，复方甘草片三批样品的含量分别为0.65 mg/片、0.63 mg/片、0.60 mg/片。

2.3 樟脑含量测定［7］

2.3.1 色谱条件与系统适用性 选择CAPCELL PAK C18色谱柱（250 mm×4.60 mm，5 μm），流动相为甲醇-乙腈∶水（15∶45∶40）；检测彼长289 nm；流速1 mL/min；柱温35 ℃。理论板数按樟脑峰计算应不得低于3 000。

2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取樟脑对照品适量，置容量瓶中加甲醇制成每1 mL含200 μg的溶液，即得。

2.3.3 供试品溶液的制备 分别称取约为复方甘草含片和复方甘草片各25 片的粉末，精密称定，加入甲醇20 mL，超声处理（240 W，40 kHz）10 min，放冷，用0.45 μm 微孔滤膜滤过，将滤液移至50 mL 量瓶中，加甲醇定容，摇匀，依法测定。

2.3.4 阴性样品溶液的制备 取复方甘草含片和复方甘草片的处方组分及辅料，分别按其样品制备工艺制成樟脑阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制成阴性样品液，按上述色谱条件测定，阴性样品没有干扰，方法专属性良好。

2.3.5 线性关系的考察 精密称取樟脑对照品10 mg，置25 mL 容量瓶中，加入甲醇溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密吸取2 μL、4 μL、6 μL、8 μL、10 μL，按上述色谱条件测定，记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标，对照品进样量为横坐标绘标准曲线，障脑在40～400 μg/mL 范围内呈良好的线性关系。

2.3.6 精密度试验 精密吸取樟脑对照品溶液10 μL，按上述色谱条件连续进样6 次，记录色谱峰面积，RSD=1.06 %，方法精密度良好。

2.3.7 稳定性试验 取同一批的复方甘草含片样品（批号：1811068）及复方甘草片样品（批号：1903181）制备供试品溶液，分别于0 h、2 h、4 h、6 h、8 h 进样测定，记录色谱峰面积，RSD 分别为0.93 %、0.97%，供试品溶液在8 h 内稳定。

2.3.8 重现性试验 称取同一批复方甘草含片样品（批号1811068）及复方甘草片样品（批号1903181）各6 份，分别制备供试品溶液，测定含量，RSD 分别为0.97%、1.01%，方法的重现性良好。

2.3.9 加样回收试验 精密称取已知含量的复方甘草含片样品（批号1811068）及复方甘草片样品（批号1903181）各6 份，分别加入一定量的樟脑对照品，依法测定，计算回收率，平均回收率分别为96.26%、97.07%，RSD 分别为1.03%、0.96%。

2.3.10 样品含量测定 依法制备复方甘草含片和复方甘草片各三批样品的供试品溶液，测定樟脑含量，复方甘草含片三批样品的含量分别为0.98 mg/片、1.02 mg/片、0.96 mg/片，复方甘草片三批样品的含量分别为0.72 mg/片、0.78 mg/片、0.69 mg/片。

2.4 稳定性考察［8］

2.4.1 影响因素试验 按照2020 版《中国药典》9001原料药物与制剂稳定性试验指导原则的要求，将复方甘草含片和复方甘草片分别在高温、高湿与强光照射条件下进行实验，考察八角茴香油、樟脑、甘草酸、吗啡各组分的含量变化，分析比较影响因素对各组分稳定性的影响。

高温试验：将复方甘草含片和复方甘草片置于40 ℃温度条件下进行高温试验，分别在第5 天和第10 天取样检测，同时将室温条件下第0 天的检测结果作为对照。结果见表1。

表1 高温试验结果（n=3）

高湿试验：将复方甘草含片和复方甘草片置于温度25 ℃±2℃、相对湿度75%±5%条件下进行高湿试验，分别在第5 天和第10 天取样检测，同时将室温条件下第0 天的检测结果作为对照。结果见表2。

表2 高湿试验结果（n=3）

强光照射试验：将复方甘草含片和复方甘草片置于光照强度4 500 Lx±500 Lx 条件下进行强光照射试验，分别在第5 天和第10 天取样品检测，同时将室温条件下第0 天的检测结果作为对照。结果见表3。

表3 光照分解实验结果（n=3）

2.4.2 加速试验 将复方甘草含片和复方甘草片的铝塑包装样品，置于40 ℃±2 ℃、相对湿度75%±5%条件下放置6 个月，分别在第0 月、1 月、3 月、6 月末时取样检测，同时将室温条件下第0天的检测结果作为对照。结果见表4。

表4 加速试验结果（n=3）

3 结论

3.1 制备工艺方法

3.1.1 复方甘草含片的制备［4］取甘草浸膏粉，加水适量，加热搅拌使溶解，冷却，搅拌下缓缓加入适量稀盐酸溶液，继续搅拌30 min，静置2 h，滤过，于滤渣中加入稀氨水，加热搅拌使溶解，浓缩成稠膏状，干燥，粉碎成细粉；取处方量的樟脑和八角茴香油，混合，用等量无水乙醇稀释，搅拌下缓慢加入到β-环糊精的饱和水溶液中，40 ℃下搅拌3 h，冷藏24 h，滤过，滤渣低温干燥；取处方量的阿片粉、苯甲酸钠、甘草浸膏纯化粉、β-环糊精包合物及适量辅料，充分混匀，制粒，干燥，压片；将素片置包衣锅中，喷施薄膜包衣液，干燥。

3.1.2 复方甘草片的制备［5］取甘草浸膏烘干，研碎，加苯甲酸钠、阿片粉混合均匀，喷入用乙醇溶解的樟脑和八角茴香油的混合物，压制成片，即得。

3.2 复方甘草含片制备工艺特点

3.2.1 挥发性组分包合 复方甘草含片的制备是将挥发性组分八角茴香油和樟脑采用β-环糊精包合后以固体粉末形式再与其他组分混合［9］，而复方甘草片的制备是将挥发性组分八角茴香油和樟脑用乙醇稀释后直接喷散在组分总混合物表面。挥发性组分包合特点：（1）避免挥散损失，增加药物的稳定性［10］；（2）掩盖不良气味，增加患者用药的顺应性。

3.2.2 纯化制粒包衣 复方甘草含片的制备是将甘草浸膏进行纯化后再与其他组分混合制成颗粒后压片，再对素片进行薄膜包衣。而复方甘草片的制备是将甘草浸膏研碎，与其他组分混合不经制粒直接压片，对素片不进行包衣。复方甘草含片制备工艺特点：（1）甘草浸膏纯度提高，减少服用剂量；（2）制成颗粒增加药物流动性，避免压片过程中粉末分层和细粉飞扬［11］；（3）薄膜包衣可掩盖阿片粉的特殊恶臭味，增加了片剂的外在美观［12］。

3.3 用法影响疗效

曾玲珠［13］通过临床疗效分析得出，复方甘草片含服治疗的临床效果优于吞服，并且能明显减少患者的药物不良反应。因阿片粉的特殊恶臭味及其他组分的不良气味造成患者含服复方甘草片的顺应性差，故将其改变工艺制成的复方甘草含片的顺应性明显提高。

3.4 组分的稳定性

在高温条件下复方甘草含片和复方甘草片甘草酸、吗啡含量基本没有损失，但八角茴香油和樟脑都有损失，而且复方甘草片的损失更严重。（1）八角茴香油含量损失率：复方甘草含片33.7%、复方甘草片44.3%；（2）樟脑含量损失率：复方甘草含片32.3%、复方甘草片42.6%。

在高湿条件下复方甘草含片和复方甘草片甘草酸、吗啡含量基本没有变化，但八角茴香油和樟脑都有损失，而复方甘草片损失更大。（1）八角茴香油含量损失率：复方甘草含片21.9%、复方甘草片30.7%；（2）樟脑含量损失率：复方甘草含片20.8%、复方甘草片29.6%。

在强光照射条件下复方甘草含片和复方甘草片甘草酸、吗啡、八角茴香油和樟脑含量均有损失，而且复方甘草片损失更严重。（1）八角茴香油含量损失率：复方甘草含片49.1%、复方甘草片69.6%；（2）樟脑含量损失率：复方甘草含片48.4%、复方甘草片67.5%；（3）复方甘草含片和复方甘草片甘草酸、吗啡含量损失均小于10%。

复方甘草含片和复方甘草片在市售包装条件下，通过温度40 ℃、湿度75%、4 500 Lx±500 Lx 光照的影响因素实验和温度40 ℃、湿度75%加速试验，结果显示两种制剂甘草酸、吗啡、八角茴香油和樟脑含量都有损失，复方甘草含片的抗光解性、热稳定性和湿稳定性明显优于复方甘草片，应避光保存。

4 讨论

复方甘草片在市售的镇咳祛痰药物中占据较大的市场份额，是大多数家庭的常备药物。复方甘草片同时含有西药和中药成分，其中中药原料PLE（甘草粉提取物）的含量达80%以上，使其在具有了温和的镇咳祛痰作用的同时，又能够减少其他化学成分对肝脏的损害。复方甘草含片是在保持成分含量不变的条件下，改进制备工艺而得到的新型剂型。复方甘草含片质量更加稳定，改善了患者的顺应性，适合工业生产,具有广阔的市场前景。