原发性干燥综合征患者miR-146a表达和中医证型及中医体质的相关性研究

孙红艳,史红霞，吕安坤

(1. 新疆医科大学中医学院,新疆 乌鲁木齐 830017；2. 新疆医科大学附属中医医院,新疆 乌鲁木齐 830000)

干燥综合征是第二大常见自身免疫性疾病，主要影响外分泌腺如唾液腺和泪腺，患者最初以口干、眼干为主要临床症状，随着病情进展可发展为复杂的全身性疾病。临床上干燥综合征的发病率为0.1%～4.6%，且发病率随地理区域的不同而不同[1]。干燥综合征可分为原发性和继发性，原发性干燥综合征的发病机制尚不明确，目前研究认为与遗传、环境(病毒感染)和免疫因素有关[2-3]，其中表观遗传在干燥综合征的发病中发挥了关键作用[4-5]。microRNA(miR)是一类非编码蛋白质的单链小分子RNA，其参与调节发育、生长、衰老、凋亡、T淋巴细胞和B淋巴细胞分化、先天和适应性免疫反应等，在免疫耐受及自身免疫疾病预防方面发挥了非常重要的作用[6-8]。miR在不同种疾病中表达谱各异，在自身免疫性疾病、心血管及肿瘤等疾病的诊断预后中显示出重要价值[9]。在固有和适应性免疫中，免疫细胞中表达的miR能发挥极其重要的作用，这些miR序列的变化有可能会导致原发性干燥综合征等多种自身免疫性疾病，具有作为诊断生物标志物的潜在价值[10]。其中miR-146a参与了T细胞和B细胞的成熟和功能调节，参与了干燥综合征的发病[11]。笔者既往研究发现，原发性干燥综合征患者以气阴两虚证多见[12]；荟萃分析发现，miR-146a表达上调会增加原发性干燥综合征的患病风险[13]。本研究进一步观察了原发性干燥综合征患者与健康人、气阴两虚证和非气阴两虚证患者之间miR-146a的表达是否存在差异，并分析其中医体质特点，旨在为临床诊治该病提供更多参考。

1 资料和方法

1.1一般资料 选择2017年3月—2019年9月在新疆医科大学附属中医院风湿科就诊的60例原发性干燥综合征患者作为患者组，均符合西医诊断标准，年龄18～75岁；排除继发性干燥综合征患者，有肾、肝、造血系统等严重原发性疾病者，重度心肺功能不全者，妊娠期、哺乳期妇女及精神病患者，合并系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等其他风湿疾病者。选择同期健康体检者30例作为对照组，年龄18～75岁，均身体健康。2组参与者均对研究知情并签署书面知情同意书，研究符合《赫尔辛基宣言》伦理要求。

1.2研究方法 ①收集2组一般资料，包括性别、民族、年龄、身高、体重。②根据中华中医药学会发布的《中医体质分类与判定》对2组进行中医体质辨识，比较2组9种中医体质占比情况。③采集2组受试者清晨空腹外周血5 mL，按照试验要求进行分离，按试剂盒说明书采用实时定量聚合酶链反应方法检测2组血miR-146a表达量。④依据新疆医科大学附属中医医院风湿科自行制定的“2013年版燥痹诊疗规范”对患者组患者进行中医辨证分型，比较气阴两虚证与非气阴两虚证患者血miR-146a表达量。⑤分析原发性干燥综合征的危险因素。

2 结 果

2.1患者组与健康组一般资料比较 患者组年龄明显高于健康组(P=0.002 )，2组性别、身高、民族、体重比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。见表1。

表1 原发性干燥综合征患者组与健康组一般资料比较

2.2患者组与健康组中医体质比较 2组特禀质、湿热质、阳虚质占比比较差异均无统计学意义(P均>0.05)；患者组平和质占比明显低于健康组(P<0.05)，阴虚质、气虚质、血瘀质、气郁质、痰湿质占比明显高于健康组(P均<0.05)。见表2。

表2 原发性干燥综合征患者组与健康组中医体质比较 例

2.3患者组与健康组miR-146a相对表达量比较

患者组和健康组miR-146a相对表达量分别为1.20±0.18和1.01±0.11，患者组明显高于健康组(t=5.48,P<0.001)。

2.4患者组气阴两虚与非气阴两虚者miR-146a相对表达量比较 患者组辨证为气阴两虚证29例、湿热浸渍证16例、脾气虚证15例，将湿热浸渍证和脾气虚弱证合并为非气阴两虚证。气阴两虚证和非气阴两虚证患者miR-146a相对表达量分别为0.99±0.16和1.01±0.14，二者比较差异无统计学意义(t=0.38,P=0.71)。

2.5原发性干燥综合征患者多因素分析 以患者与健康为分组变量，即以疾病发生与否作为因变量，以年龄、平和质、阴虚质、气虚质、血瘀质、痰湿质、气郁质、miR-146a自变量进行非条件Logistic回归多因素分析，发现阴虚质、年龄和miR-146a是原发性干燥综合征的危险因素(P均<0.05)。见表3。

表3 原发性干燥综合征患者非条件Logistic回归分析

3 讨 论

原发性干燥综合征是一种常见的全身性自身免疫疾病，症状的严重程度如眼干和腮腺肿胀可能与miR-146a表达有关[11]。Pauley等[14]研究发现，干燥综合征小鼠唾液腺、外周血中以及干燥综合征患者外周血中miR-146a表达上调，随着疾病进展小鼠唾液腺中的miR-146a表达逐渐升高 。Zilahi等[15]研究发现干燥综合征患者血miR-146a、miR-146b及TRAF-6基因表达上调，而IRAK-1表达下调。Gauna等[16]在研究唾液腺上皮细胞时发现，CD86∶CD80的蛋白质比例改变可以上调miR-146a的表达量，进而参与免疫中的T细胞调控，最终影响干燥综合征的疾病进展。朱丽娟等[17]发现miR-146a在原发性干燥综合征患者血清中高表达，miR-155低表达，二者呈负相关，可能参与原发性干燥综合征发生发展过程，对原发性干燥综合征早期诊断有一定参考价值。王笑颜等[18]研究发现miR-146a在原发性干燥综合征患者稳定组和活动组均高表达且与细胞因子IL-17、IL-6和TNF-α含量呈正相关,提示miR-146a与IL-6、IL-17和TNF-α共同参与了原发性干燥综合征发病。Jiang等[19]发现抗SSA抗体阳性的原发性干燥综合征患者血miR-146a表达明显上调，提出检测miR-146a可以提高原发性干燥综合征的诊断率，可作为患者的预后预测指标。

本研究结果显示，原发性干燥综合征患者外周血中miR-146a相对表达量高于健康人，但气阴两虚证与非气阴两虚证患者的miRNA-146a表达量不存在差异。提示miR-146a表达上调对于原发性干燥综合征临床诊断和预后判断以及作为新的治疗靶点可能有用，但miR-146a不能作为区别其中医证型的指标。中医体质分析发现原发性干燥综合征患者主要表现为阴虚质、气虚质、气郁质、血瘀质、痰湿质，而健康人多为平和质，提示平和质者多健康，而偏颇体质者多患病。相关性分析发现，原发性干燥综合征易感性与年龄、阴虚质及miR-146a表达量有关，提示年龄增长、中医体质的变化和miR-146a表达量升高可能影响疾病的发生。

干燥综合征多发于45岁以上女性。从中医理论上讲“年四十，而阴气自半也”，说明随着年龄增长，人体的功能会发生变化。这一年龄段由于脏腑经络、气血津液的衰退，正气日渐受损，久之损及阴阳，故而临床多见阴虚质和阳虚质。血本属阴，妇人又以血为主，故四十岁以上女性的阴气更容易亏损，从而加重阴液的亏损，易产生阴虚质，又容易生燥热，如果外遇燥、湿、热毒等邪气，就容易化燥生热，继而发为燥痹。中医言“阴虚血必滞”，津液为血液的组成部分之一，二者同源，如津液充足则营血充盈，脉道流利而血运畅通；反之，如津液不足则血液亏损，营血不充则脉道不利，血液运行不畅则日久成瘀。故阴虚质者常因虚致瘀，影响气血津液的生成输布，继而导致阴虚更重，阴液亏损不能濡养五官清窍及脏腑经络，继而出现眼干、口干、关节疼痛等症状。人体的体质会受到众多外在因素的影响，比如环境因素、饮食习惯等，体质如果不同则疾病的易感性往往也会不同，原发性干燥综合征是否发病及发病的倾向性与此有关，同时对中医证候表现及预后都会有影响。

总之，原发性干燥综合征患者中医证型以气阴两虚证多见，年龄增加、阴虚质及miR-146上调是原发性干燥综合征发病的危险因素；miR-146a可以考虑作为诊断原发性干燥综合征的生物学指标，但其与中医辨证分型无明显关系；在治疗和预防疾病时，可考虑利用中医特色调节体质，从而预防疾病的发生。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。