武汉市青山地区女性HPV感染现状分析

李江萍 刘宗玉 辛焰 成曦子 廖国林 谢跃文

人类乳头瘤病毒 (Human papilloma virus，HPV) 是一种 DNA双链病毒，目前已经发现的四百多种亚型中，约40种可特异性感染人的皮肤和黏膜鳞状上皮细胞，诱发宫颈上皮等部位的良、恶性病变。宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，其发病率居女性恶性肿瘤第二位。其发生发展经历了癌前病变，早期浸润癌和浸润癌3个阶段。近年来宫颈癌发生率呈上升趋势。其发生与高危型人乳头瘤病毒(HPV)的持续感染密切相关[1]，HPV感染被视为宫颈癌疾病发生的主要潜在病因[2]。本研究对武汉市青山区2016年1月至2019年12月共计11 409例妇科体检HPV标本检测情况进行统计分析。以了解本地区 HPV 感染和基因型分布的情况，为本地区提供HPV感染的流行病学资料，为宫颈癌的干预治疗，HPV 疫苗及试剂的研发提供参考。

1 对象与方法

1.1 调查对象 HPV标本人群为2016年1月至2019年12月于我院妇科门诊查体患者和健康体检中心妇科查体人员，排除已确诊宫颈癌患者和其他严重疾病患者标本。标本人群均为武汉市青山地区居民。年龄14～85岁，共计11 409例。

1.2 仪器与试剂 HPV25分型使用仪器：博日基因扩增仪；试剂：艾康生物技术(杭州)有限公司人乳头瘤病毒基因分析(25型)检测试剂盒(PCR反向点杂交法)。

1.3 方法

1.3.1 标本采集：暴露宫颈，将采样刷置于宫颈口顺时针旋转3～5圈，取出宫颈刷置于采样瓶中，折断刷头，密闭送检。所有样品在 4℃下运送至实验室，并在 48 h 内进行测试。对每个患者，分别独立收集每个标本进行 HPV 基因分型检测。

1.3.2 检测：应用PCR反向点杂交法检测取得的宫颈脱落细胞，检测高危HPV(16.18.31.33.35.39.45.51.52.53.56.58.59.66.68.73)，低危HPV(6.11.26.40.42.43.44.81.83)共计25个型别。标本处理与PCR扩增、杂交、显色各个步骤操作严格按照仪器与试剂盒使用说明进行。

2 结果

2.1 HPV感染率青山区11 409例女性HPV标本检测中，HPV阳性1 646例，HPV感染阳性率14.43%。1 646例阳性标本共检出1 650个有高危亚型及469个有低危亚型，分别占比77.9%、22.1%。见表1。

表1 HPV感染率 例

2.2 不同HPV感染模式比较 HPV感染模式比较单一亚型感染为1 324例，混合型感染322例，分别占感染总例数的80.43%和19.57%。混合感染以双重感染较多见，占71.7%。1例标本检测出7个亚型，比较罕见。多重感染中，以高高危、高低危混合感染较多见，低低危混合感染较少见，HPV 52.16.58.18是多重感染中检出率最高的型别。见表2。

表2 不同HPV感染模式比较

2.3 HPV感染亚型 1 646例HPV阳性标本中，25种亚型均有检出，前10位中，高危型占8型，低危型2型。检出率最高的3种高危型分别是HPV52.16.58，分别占高危亚型20.1%(332/1 650)、14.1%(233/1 650)、11.5%(189/1 650)。低危型前3位分别为HPV81.6.42，分别占低危型22.2%(104/469)、18.6%(87/469)、15.8%(74/469)。见表3。

2.4 HPV52.16.58.阳性的年龄段分布 HPV52.16.58阳性年龄段分布HPV52.16.58感染率最高，且均为高危型，构成比超过8%。三型的年龄分布特征见表。可以看出在20～49岁年龄段HPV52.16.58三型阳性例数最多。此年龄段为女性性活跃期，也是HPV感染与宫颈疾病及宫颈癌发生的高发年龄段。见表4。

表4 HPV52.16.58.阳性的年龄段分布 例

3 讨论

因地域和民族的不同，各地区 HPV感染情况也是有差异的，明确流行的HPV 主要型别，可帮助设计常见感染亚型的检测试剂，并为疫苗的研制和应用提供依据。本研究发现：武汉地区女性 HPV 感染率为14.43%，宫颈脱落细胞中所检测的25种 HPV 亚型均有检出，其中高危型别 16 种，低危型别 9 种，最常见 5 种高危型别依次为:HPV52、16、58、53、56 型，需重视上述 HPV 感染的筛查及防治，针对武汉地区 HPV 感染的疫苗的研制及使用时，以及设计武汉地区常见感染亚型的监测试剂盒时，需考虑武汉地区 16 种高危型别，尤其是 HPV52、16、58、53、56型。

HPV感染在女性中较为普遍，有数据显示，性活跃期女性HPV感染率为50%～80%，且感染时通常无任何症状，同时50%～90%HPV感染可在感染后数月至两年内被体内免疫系统清除，只有极少数持续 HPV 感染，从而诱发宫颈上皮恶性转化导致宫颈癌[3,4]的发生。国内报道正常宫颈 HPV 感染率为 11%～37%[10-13]。本研究统计分析发现，武汉市青山区女性HPV总的感染率为14.43%。略低于2013年岑尧等[5]报道的15.7%，明显低于姜树朋等[6]武汉地区女性HPV总感染率为21.1%的报道。HPV单一亚型感染检出率明显高于多重亚型感染检出率，占HPV总检出率的80.43%，与张丽华等[7]报道的有区别，提示本地区HPV感染以单一型别感染为主。结果的差异与实验室如何进行HPV基因分型检测标准化有关，与标本采集、患者就诊构成有关，杨淑哲等[8]研究分析发现，我国大陆妊娠期女性HPV感染率25.1%，明显高于普通女性HPV感染率。

本研究中，混合型感染病例322例，占总感染病例19.57%。混合感染以双重感染多见，占71.7%。多重感染中，以高高危、高低危混合感染多见，低低危混合感染少见。HPV52.16.58.18是多重感染中检出率最高的四个亚型。因为高危型HPV感染后被体内免疫系统清除机率比低危型HPV小。HPV型别较多，机体单一型别感染与多重型别感染能不能引起宫颈病变发展，研究观点尚不一致，部分学者认为持续多重感染患者得其他疾病的风险明显增加[9]，HPV多重型感染，会加大持续性的感染危险性，且HPV 持续感染是宫颈病变的发生主要原因，多重感染容易引发宫颈病变。但也有学者认为HPV的多重型别感染不会导致宫颈癌发生率增加[10]。

HPV亚型众多，因地域不同有不同的流行特点。欧美地区高危型HPV16.18与宫颈癌发生最为密切，也是HPV二价疫苗研制的主要目标型别。一项针对全球宫颈癌患者 HPV 型别的 分析指出，宫颈癌的常见型别依次为 16、18、45、31、33、58 和 52 型，而亚洲地区 58 和 52 型高于欧美地区常见的 31、33、45型[11]。亚洲地区常见高危型为HPV16.52.58，国内常见为HPV16.18.58[12]。一项对我国 14 个省、市、自治区宫颈癌患者的 HPV 感染的调查显示，宫颈癌患者HPV 总感染率 53.5%，其中以 HPV16 和 58 为最高，并呈现出北方以 16 型为主，南方以58型为最高的地区分布特征[13,14]。山东地区女性最常见的三种高风险 HPV感染基因型HPV 16、58、52，最常见的三种低风险 HPV 基因型HPV 54、6、55[15]。单一和多重感染，纯高风险、低风险和混合感染的流行与年龄相关[16]。武汉地区高危型HPV16.52.58为优势感染基因亚型[6]，此次研究发现武汉青山地区常见高危型为HPV52.16.58，基本符合我国HPV流行现状[6,17]。HPV流行尽管存在地域区别，但HPV16型地域感染情况变化不大，在不同地区都有较高的检出率，同时HPV16型是与宫颈癌疾病发生联系最紧密的亚型[18]，也是全球范围内女性最常见的HPV感染型别[19]。

宫颈癌的发生与HPV高危型持续感染密切相关，绝大多数宫颈癌患者均可检出HPV高危型别。HPV高危型与宫颈癌前病变相关已形成共识。是否合并HPV感染对宫颈疾病的治疗预后与评价有重要作用。目前大多数宫颈癌患者都能够从早期筛查得到疾病的预防，并且从感染HPV 到发展为浸润癌通常需要至少10年时间，因此通过早期预防与治疗阻止患者宫颈癌的发生发展成为可能[20]。

随着分子生物与免疫学的发展，二价、四价、九价宫颈癌疫苗的陆续出现，为预防和控制HPV感染相关的宫颈癌及其癌前病变提供了更多选择。但因各种疫苗适用人群与年龄存在差异，且没有一种疫苗能够抵抗所有的HPV感染，注射了疫苗也并不等于一定不会患宫颈癌，接种过疫苗的女性仍应定期进行宫颈癌筛查。同时已上市疫苗不一定能够满足中国女性预防接种的需求[21]。不同地区应重视本地区 HPV感染型别的筛查、防治及相关 HPV 疫苗研发，建立健全宫颈癌筛查制度，加强 HPV 感染及宫颈癌防治知识的宣教，加强对 HPV 高危人群的管理，早期筛查及防治HPV 感染，可有效降低HR-HPV 感染率，从而降低本地区宫颈癌的发病率[22]。