卵巢癌患者血清NDRG4、CD147的水平变化及其意义

周姝，王中芹，周延东，黄爱华

泰州市人民医院妇科，江苏泰州225300

卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤，其发病率占所有女性恶性肿瘤的2.5%，但病死率占5%［1］。由于卵巢组织结构和内分泌功能复杂，早期临床症状不明显，多数患者确诊时已处于中晚期，虽然手术、新辅助放化疗、靶向治疗技术不断提高，但是疗效有限，术后复发率较高［2］。因此，术前预测卵巢癌复发尤为重要，可优化个性化治疗，改善患者预后。抑癌基因N-myc下游调节因子4（NDRG4）是与细胞分化和肿瘤形成密切相关的基因家族成员［3］，参与细胞存活、肿瘤侵袭和血管生成，与肿瘤复发转移密切相关［4］。CD147又称细胞外基质金属蛋白酶诱导因子，是一种多功能跨膜糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族的成员，可介导细胞间黏附，刺激成纤维细胞合成和基质金属蛋白酶类产生，降解细胞外基质，促进肿瘤侵袭转移［5］。目前血清CD147、NDRG4与卵巢癌术后复发的关系尚不确定。因此，我们观察了卵巢癌患者血清中CD147、NDRG4的水平变化，并探讨了血清CD147、NDRG4与患者临床病理特征、术后复发的关系及对卵巢癌术后复发的预测效能，以期为临床诊治提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料选取2015年8月—2017年8月泰州市人民医院妇科住院部收治的卵巢癌患者263例（卵巢癌组），年龄51～72（62.35±4.35）岁。纳入标准：均行卵巢癌切除手术，经术后病理组织学证实为卵巢癌；术前未接受任何形式的治疗；临床资料和病理结果完整。排除标准：合并其他部位恶性肿瘤；发生远处转移者；不具备手术指征；随访失联。另选择同期于本院妇产科门诊体检健康的217例女性为对照组，年龄50～71（61.91±4.47）岁，卵巢癌组和对照组年龄比较差异无统计学意义（P均＞0.05）。本研究已经获得本院伦理会批准，患者及其家属均知情同意签署同意书。

1.2 血清NDRG4、CD147检测卵巢癌组术前采集肘静脉血3 mL（对照组体检当日）。采用FLUO star Omega全自动多功能酶标仪（德国BMG LABTECH公司）、酶联免疫吸附试验检测CD147，试剂盒购自艾美捷科技有限公司。采用罗氏Elec‑sys2010全自动电化学发光免疫分析仪、电化学发光免疫法检测NDRG4，试剂盒购自北京科美东雅生物技术有限公司。

1.3 随访方法所有卵巢癌患者出院后采用电话或者门诊复查等方式定期随访3年，统计复发例数；影像学和病理学检查提示新发病灶或转移灶者为复发。

1.4 统计学方法采用SPSS25.0统计软件。计量资料先采用Kolmogorov-Smirnov法进行拟合优度检验，符合正态分布以±s表示，比较采用独立样本t检验。绘制受试者工作特征曲线（ROC）分析血清NDRG4、CD147预测卵巢癌术后复发的效能。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 卵巢癌组、对照组血清NDRG4、CD147水平比较卵巢癌组血清NDRG4、CD147水平分别为（81.03±26.35）、（6.98±2.33）ng/L，对照组分别为（169.41±82.08）、（3.02±1.47）ng/L；卵巢癌组血清NDRG4水平低于对照组（P＜0.01），CD147水平高于对照组（P＜0.01）。

2.2 血清NDRG4、CD147水平与卵巢癌患者临床病理特征的关系与高度分化和FIGO分期Ⅰ期的卵巢癌患者比较，低中度分化、FIGO分期Ⅱ期卵巢癌患者血清NDRG4水平低、CD147水平高（P＜0.01），不同年龄和不同肿瘤直径的卵巢癌患者血清NDRG4、CD147水平比较，P均＞0.05，见表1。

表1 不同临床病理特征的卵巢癌患者血清NDRG4、CD147水平（ng/L，±s）

表1 不同临床病理特征的卵巢癌患者血清NDRG4、CD147水平（ng/L，±s）

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2.3 血清NDRG4、CD147水平与卵巢癌术后复发的关系本次随访期间无失访患者，随访期间复发110例。根据NDRG4、CD147水平均值将患者分为NDRG4高水平组（NDRG4≥81.03 ng/mL，129例）和NDRG4低水平组（NDRG4＜81.03 ng/mL，134例），CD147高 水 平 组（CD147≥6.98 ng/L，139例）和CD147低 水 平 组（CD147＜6.98 ng/L，124例）。NDRG4高 水 平 组 复 发 率 为36.43%（47/129），NDRG4低水平组复发率为47.01%（63/134），两组比较，P＜0.05；CD147高水平组复发率为51.08%（71/139），CD147低水平组为31.45%（39/124），两组比较，P＜0.05。

复发患者血清NDRG4、CD147水平分别为（70.51±8.32）、（7.95±0.73）ng/L，未复发患者血清NDRG4、CD147水平分别为（88.59±12.03）、（6.28±1.65）ng/L。复发患者血清NDRG4水平低于未复发患者，CD147水平高于未复发患者（P均＜0.01）。

2.4 血清NDRG4、CD147检测预测卵巢癌术后复发的效能血清NDRG4、CD147水平最佳截断值分别为78.13、7.26 ng/L时，单独及联合检测预测卵巢癌术后复发曲线下面积（AUC）分别为0.732（95%CI：0.648～0.816，P＜0.01）、0.801（95%CI：0.739～0.863，P＜0.01）、0.930（95%CI：0.880～0.980，P＜0.01），灵敏度分别为71.43%、66.67%、90.48%，特异度分别为72.85%、74.66%、92.76%。血清NDRG4、CD147联合检测预测卵巢癌术后复发的AUC大于单独检测（P均＜0.05）。见图1。

图1 血清NDRG4、CD147及二者联合检测预测卵巢癌术后复发的ROC

3 讨论

卵巢癌是妇科癌症死亡的第二大最常见原因［6］，5年生存率为26%～42%［7］。复发是导致卵巢癌患者死亡的主要原因，尽管接受了手术治疗和一线化疗，但仍有70%～80%的上皮性卵巢癌患者会复发［8］。大部分卵巢癌晚期患者容易复发并产生化疗耐药性，复发卵巢癌患者较首发患者恶性程度高，且多伴随着转移［9-10］。

NDRG4是最后一个发现的人类N-myc下游调控基因成员，主要通过靶基因转录调控细胞增殖和分化作用［11］。NDRG4在肿瘤的作用机制尚存有争议，现有报道显示NDRG4在食管腺癌中表达下调，其通过调控细胞周期相关蛋白Cyclin D1、CDK4和CDK6，抑制肿瘤细胞增殖［12］。NDRG4在大肠癌中表达降低，其通过抑制PI3K-AKT活性发挥抑癌作用［13］。但NDRG4在侵袭性脑膜瘤中发挥致癌基因作用，沉默NDRG4可诱导细胞凋亡，降低脑膜瘤细胞株的侵袭能力［14］。本研究结果表明，卵巢癌患者血清NDRG4水平降低，卵巢癌分化程度越低，FIGO分期越高，NDRG4水平越低，提示NDRG4可能在卵巢癌中发挥抑癌基因作用。李委佳等［15］通过体外实验发现，NDRG4通过抑制Wnt/β-catenin细胞信号通路及上皮间质转化相关蛋白的表达，降低卵巢癌细胞的侵袭和转移能力。刘巍等［16］通过转染特异性小分子干扰RNA-NDRG4下调NDRG4表达，凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（BCL-2）表达增高，Bax、p-P38/丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）表达降低，NDRG4表达下调可增加卵巢癌细胞增殖能力。本研究结果显示，NDRG4低水平组患者复发率高于NDRG4高水平组，复发患者血清NDRG4水平低于无复发患者，说明NDRG4表达缺失与卵巢癌术后复发有关。马欢等［17］也指出，高水平NDRG4卵巢癌患者具有较低的复发率。分析原因为NDRG4表达缺失，其抑制癌细胞增殖和分化能力下降，导致癌细胞侵袭性和转移能力增强，更容易发生肿瘤复发。

CD147是高度糖基化的Ⅰ型跨膜糖蛋白，可通过参与糖酵解代谢途径促使癌细胞快速分裂增殖，诱导免疫逃逸［18］。CD147作为细胞外基质金属蛋白酶诱导剂，通过诱导细胞外基质金属蛋白酶产生，导致细胞外基质降解，在肿瘤侵袭和远处转移中起着关键调节作用［19］。有报道显示，CD147在膀胱癌中表达上调，CD147高表达可通过上调胃泌素D表达，促使癌细胞增殖和肿瘤扩散［20］。高表达CD147通过上调脂肪形成基因脂肪酸合成酶和乙酰辅酶A羧化酶1促使新生血管和淋巴管形成，诱导宫颈癌细胞迁移和侵袭，CD147表达下调则抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭［21］。本研究结果显示，卵巢癌患者血清CD147水平明显增高，卵巢癌分化程度越低，FIGO分期越高，CD147水平越高，提示CD147可能在卵巢癌中发挥致癌基因作用。CHU等［22］指出，CD147表达与胃癌患者的无病生存期和总体生存率有关，CD147阳性患者无病生存率和总体生存率较低，CD147是胃癌肿瘤复发和预后不良的潜在指标。CD147高水平组患者复发率高于CD147低水平组，复发患者血清CD147水平高于无复发患者，说明CD147过表达与术后肿瘤复发有关，考虑其机制为：CD147过表达可介导细胞黏附和基质金属蛋白酶2的表达，促使细胞外基质降解和上皮间质转化，促使癌细胞侵袭转移，最终导致癌症复发［23］；通过提高卵巢癌自噬活性，抑制自噬细胞凋亡，促使癌细胞增殖和恶性进展［24-25］。本研究中ROC分析结果显示，NDRG4、CD147预测卵巢癌术后复发的AUC为0.732、0.801，提示NDRG4、CD147均可作为卵巢癌术后肿瘤复发的生物学指标，而联合NDRG4和CD147明显提高了复发预测效能，提示临床上可以联合检测血清NDRG4、CD147预测卵巢癌患者术后是否复发。

综上，卵巢癌患者血清NDRG4水平降低，CD147水平升高，血清NDRG4、CD147水平与卵巢癌患者临床病理特征、术后肿瘤复发有关，二者可作为卵巢癌术后复发的预测指标，联合检测预测效能更好。卵巢癌术后复发的因素有很多，本研究未排除其他因素进行回归分析，有待后续进一步研究。