急性淋巴细胞白血病患者GLUT3、TSLC1 的表达及临床意义

谭卡

（开封市中心医院血液内科，河南 开封 475000）

急性淋巴细胞白血病是起源于淋巴祖细胞的一种肿瘤性疾病，多发于儿童，成人发病占比约15～20%[1]。急性淋巴细胞白血病主要表现为原始淋巴细胞恶性增殖并侵入肝、脾等组织器官，严重影响患者的正常生理功能。研究指出，年龄、遗传以及生活习惯等原因均会对急性淋巴细胞白血病的治疗造成影响，也因此提升了急性淋巴细胞白血病治疗的难度[2]。本研究就急性淋巴细胞白血病患者葡萄糖转运蛋白-3（Glucose transporter 3，GLUT3）、肿瘤抑制物1（Tumor suppressor in lung cancer 1，TSLC1）的表达及临床意义进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018 年4 月至2020 年4 月期间我院诊治的59 例急性淋巴细胞白血病患者作为研究对象的研究组。研究组男性31 例，女性28 例；年龄17～71 岁，平均年龄32.45±6.79 岁。纳入标准：经形态学、细胞遗传学、免疫学、分子生物学分型诊断，符合《血液病诊断及疗效标准》中急性淋巴细胞白血病的诊断标准[3]；在我院住院治疗且临床资料、实验室资料完整者；患者及其家属均知晓本研究内容和目的，同意参加本研究并签署知情同意书。排除标准：存在心、肝、肾等严重病变者；存在原发性或者继发性的中枢神经系统病变者；合并人类免疫缺陷病毒感染者或遗传学免疫缺陷者；精神疾病或存在相关家族史者。另选取53 例同期非急性淋巴细胞白血病患者作为研究对象的对照组。对照组男性28 例，女性25 例；年龄19～70 岁，平均年龄为33.14±7.25岁。纳入标准：经确诊的缺铁性贫血和巨幼细胞贫血患者；患者同意参加本研究并签署知情同意书。排除标准：患有自身免疫疾病者；患有恶性肿瘤者；入组前3 个月内存在感染病史者；急性淋巴细胞白血病患者；获得性免疫缺陷综合征患者；近期使用激素治疗者。两组患者在一般资料上差异不具有统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 获取单个核细胞

患者局麻后，于髂前上棘进行骨髓穿刺，抽取患者骨髓液5 mL，置于抗凝试管内，按照等体积比将其加入 Ficoll 分离液（上海根生生物科技有限公司），1500 rpm 离心15 min 后分离试管中层内的单个核细胞，置于零下80℃超低温冰箱保存待检。

1.2.2 实时荧光定量反转录聚合酶链反应（Reverse Transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）

使用Trizol 总RNA 提取试剂盒对单个核细胞总RNA 进行提取，并检测纯度。用逆转录试剂盒将总RNA 逆转录为模板链cDNA，以cDNA 为模板，以GAPDH 为内参，进行RT-PCR 检测。TSLC1 引物：F（正向引物）：5，-GGT GAT GGG CAG AAT CTG TTT AC-3’，R（反向引物）：5，-ACC AGG ACT GTG ATG GTG GTG T-3’，PCR 反应条件：94 ℃ 30 S，59 ℃ 30 S，55 ℃ 30 S，72 ℃1 min，连续进行30 个循环。GLUT3 引物：F（正向引物）：5’-GTG TCT CCC ACT GCC CTA C-3’，R（反向引物）：5，-GCC CAG AAT AAA GTC CAA A-3’，PCR 反应条件：95 ℃ 30 S，95 ℃ 30 S，60 ℃ 30 S，72 ℃ 30 S，连续进行38 个循环。

对比不同临床病理特征（年龄、性别、疾病分型、血红蛋白、血小板计数、白细胞计数）的急性淋巴细胞白血病患者GLUT3、TSLC1 表达情况。

1.3 观察指标

1.3.1 GLUT3 的表达情况

采用实时荧光定量PCR 测定骨髓单个核细胞中 GLUT3 RNA 的表达量。GLUT3 的相对表达量≥1.9 视为GLUT3 阳性[4]。

1.3.2 TSLC1 的表达情况

采用实时荧光定量PCR 测定骨髓单个核细胞中TSLC1 RNA 的表达量。TSLC1 的相对表达量＞26%视为TSLC1 阳性[5]。

1.4 统计学方法

本研究数据均采用SPSS22.0 软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差（）表示，采用t检验；计数资料以例数（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 对比两组GLUT3、TSLC1 的表达情况

研究组GLUT3 的阳性表达率明显高于对照组（P＜0.05），研究组TSLC1 的阳性表达率明显低于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 两组GLUT3、TSLC1 的表达情况（例（%））

2.2 对比不同临床病理特征的急性淋巴细胞白血病患者GLUT3、TSLC1 表达情况

年龄、性别、疾病分型、血小板计数不同者GLUT3、TSLC1 的表达无明显差异（P＞0.05）；血红蛋白（异常）、白细胞计数（异常）者GLUT3阳性率明显高于血红蛋白（正常）、白细胞计数（正常）者（P＜0.05）。白细胞计数（异常）者TSLC1阳性率明显高于白细胞计数（正常）者（P＜0.05）。

3 讨论

急性淋巴细胞性白血病是因原癌基因、抑癌基因发生多位点突变，丧失对细胞生长的调控，致使B、T 淋巴细胞的克隆异常增殖。研究表明，白血病患者会因为脊髓缺氧而导致白血病细胞的增殖，引起细胞中GLUT3 的代谢增强，检查可见GLUT3 处于异常表达状态[6]。TSLC1 为肿瘤抑制因子，研究指出TSLC1 可活化凋亡蛋白半胱天冬酶，诱导肺癌细胞凋亡。众多学者认为，TSLC1与人类多种肿瘤发生、发展存在关联，可作为抑制肿瘤生物侵袭性的一种重要受体蛋白[7]。本研究中，急性淋巴细胞白血病患者GLUT3 阳性表达率高于对照组、TSLC1 阳性表达率低于对照组，表明在急性淋巴细胞白血病中，GLUT3 与TSLC1均出现异常表达，两者表达情况与急性淋巴细胞白血病的发生有密切的关系。且血红蛋白（异常）、白细胞计数（异常）者GLUT3 阳性率明显高于血红蛋白（正常）、白细胞计数（正常）者，白细胞计数（异常）者TSLC1 阳性率明显高于白细胞计数（正常）者。这些结果提示GLUT3、TSLC1 与急性白血病的发生、发展有关。

综上所述，在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个细胞中GLUT3 阳性表达率高、TSLC1 阴性表达率高，推测GLUT3、TSLC1 参与了急性淋巴细胞白血病发生、发展的过程，并可能对急性淋巴细胞白血病的预后评估以及指导治疗具有重要意义。