抗核抗体与抗β2糖蛋白-1抗体水平的相关性研究*

胡琼文，田 华，刘春艳，李智杰，宋姗姗，雷胡芯，廖 璞

中国科学院大学重庆医院/重庆市人民医院检验科，重庆 400014

抗核抗体(ANA)是一组以自身真核细胞为靶抗原的自身抗体，是诊断自身免疫性疾病的基础[1-2]。抗磷脂综合征(APS)是一组由抗磷脂抗体介导的，以动静脉血栓形成、反复妊娠失败及血小板减少为特征的自身免疫性疾病[3]。抗β2糖蛋白-1(β2GP-1)抗体作为APS分类标准中的实验室指标，参与了国际APS评分系统血栓风险评估及病理妊娠风险评估[4-6]。本研究通过对ANA核型、滴度与抗β2GP-1抗体水平进行相关性分析，探讨了ANA阳性患者是否存在更高的血栓或病理妊娠风险。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2019年5月至2020年8月本院检验科常规检测ANA谱的125例新鲜血清标本，其中ANA阳性患者(ANA阳性组)标本80例，ANA阴性患者(ANA阴性组)标本45例。

1.2仪器与试剂 仪器：德国Leica荧光显微镜、iFlash3000A全自动化学发光分析仪、-80 ℃低温冰箱、CycleBlot48全自动免疫印迹仪、Mk3酶标仪、100～1 000 μL加样枪，5～50 μL加样枪。试剂：ANA IgG检测试剂盒(间接免疫荧光法,欧蒙医学)、ANA谱(IgG)检测试剂盒(德国胡曼)、抗β2GP-1抗体检测试剂盒(亚辉龙)。

1.3方法 ANA谱检测采用化学发光免疫分析法进行抗β2GP-1抗体水平检测，按照试剂说明书，抗β2GP-1抗体水平大于20 AU/mL判为阳性。采用抗β2GP-1抗体阳性非定值质控品进行室内质量控制。绘制Levey-Jennings质控图，质控规则采用12S预警，13S、22S、R4S失控的规则，观察和控制检测过程的精密度。

2 结 果

2.1两组基线资料比较 两组年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。ANA阳性组女性占比与ANA阴性组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。两组抗PM-Scl抗体阳性例数比较，差异无统计学意义(P>0.05)，其余抗体阳性例数比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组基线资料比较

2.2ANA核型与滴度特征分布情况 ANA阳性组中ANA核型以核颗粒型(30例)、核均质型(18例)为主，ANA滴度以1∶1 000(32例)、1∶320(27例)为主；抗β2GP-1抗体阳性血清中ANA核型以核颗粒型(6例)、胞浆颗粒型(4例)为主，ANA滴度以1∶100(5例)、1∶1 000(4例)为主。

2.3相关性分析 ANA阳性组ANA核型、滴度与抗β2GP-1抗体定量相关性分析结果表明，ANA核型、滴度与抗β2GP-1抗体定量之间不存在线性相关性。见图1。

注：A为ANA滴度与抗β2GP-1抗体定量相关分析；B为ANA核型与抗β2GP-1抗体定量相关分析。

3 讨 论

APS是以动脉和(或)静脉血栓形成、复发性宫内胎儿丢失、血小板减少症、溶血性贫血和神经系统疾病与循环抗磷脂抗体存在为主要特征的系统性自身免疫性疾病[3]。β2GP-1作为一种天然抗凝剂可抑制血液凝固的内在途径及凝血酶原活性，已被鉴定为主要抗原目标，这导致了抗β2GP-1抗体干扰天然抗凝剂β2GP-1的稳态特性从而使机体处于易栓状态[7]。

化学发光技术已被应用于自身抗体检测[8-9]，有研究表明新的化学发光免疫分析法对抗心磷脂抗体和抗β2GP-1抗体的测定具有较高的诊断性能[10-11]。本研究通过对80例ANA阳性患者和45例ANA阴性患者的血清进行抗β2GP-1抗体定量检测，发现ANA阳性组比ANA阴性组中抗β2GP-1抗体阳性者所占比例更高，Pearson相关分析发现ANA核型、滴度与抗β2GP-1抗体定量之间不存在线性相关性。

ANA作为自身免疫性疾病(AID)重要的生物学标志，是临床应用中最广泛、最基础的一组自身抗体。临床上ANA常见于系统性红斑狼疮等系统性AID患者，也可以见于器官特异性AID患者，如自身免疫性肝病等，此外，ANA还可以出现于慢性感染性疾病、肿瘤及健康人群中[12]。本研究发现ANA阳性患者与ANA阴性患者相比有更高的抗β2GP-1抗体阳性例数，而抗β2GP-1抗体可干扰天然抗凝剂β2GP-1的稳态特性从而使机体处于易栓状态，因此推断ANA阳性患者存在潜在更高的血栓或不良妊娠风险，临床上需警惕。

本研究对患者ANA核型、滴度与抗β2GP-1抗体水平的相关性进行研究，目前国内外相关研究报道较少。但本研究存在一定的局限性，由于总标本例数和抗β2GP-1抗体阳性例数均较少，统计学上存在一定的偏倚，后续需要增加总标本例数以得出更加信服的结论。