宫颈癌筛查中应用液基薄层细胞学联合DNA倍体细胞检测的临床价值

潘 超，王晨庄，罗 思，叶玉婵，梁 聪

（东莞市横沥医院病理科，广东东莞 523460）

宫颈癌是比较常见的一种妇科恶性肿瘤，在我国，宫颈癌的发病率占妇科恶性肿瘤的第2位，由于宫颈的位置和功能的特殊，导致早期宫颈癌患者多会忽视自身症状，以至于50%的宫颈癌患者就医时已为中晚期，威胁患者的生命[1]。近几年，宫颈癌筛查在我国得到了大力推广，部分女性通过早期宫颈癌筛查得到了有效的治疗和控制。阴道镜病理活检是筛查宫颈癌的一种有效方法，即从阴道上取一小块或几块组织作病理检查，以确定诊断，但是由于其具有一定的创伤性，因此患者接受度较低[2]。目前临床上对于宫颈癌的筛查方法还有液基薄层细胞学（TCT）检测和DNA倍体细胞检测，这两种方法均有一定的诊断价值，但是可能存在漏诊情况[3]。因此本研究将该两种方法联合应用，旨在探讨TCT联合DNA倍体细胞检测在宫颈癌筛查中的检出情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2018年12月至2020年12月于东莞市横沥医院做健康体检时70例疑似宫颈癌患者的临床资料，年龄27～77岁，平均（43.43±1.26）岁；第1次性生活年龄19～28岁，平均年龄（23.49±2.16）岁。纳入标准：均有妇科疾病的临床症状，表现为阴道异常流血、异味、白带异常者；均有过性生活且无家族性宫颈癌史者；未接受过子宫切除或宫颈锥切除术者；临床资料完整者。排除标准：近3个月内服用过激素药物者；合并卵巢囊肿或子宫肌瘤等其他妇科病变者；妊娠期妇女。本研究已经院内医学伦理委员会审核批准。

1.2 方法 所有研究对象均于检查前3 d禁止性生活和阴道用药，月经期者则待月经停止3～7 d后进行检查。

1.2.1 TCT检测 将特制宫颈刷轻轻插入宫颈处，以顺时针的方向轻轻转动5～6圈，停留约15 s后，将收集到的细胞组织放入液基细胞保存液中保存，并用95%含量的乙醇固定标本，经巴氏染色后利用阴道细胞学的分类与伯塞斯达系统（TBS）[4]进行诊断，可分为5类，正常或炎症、不明意义的不典型鳞状上皮细胞或不典型腺细胞、低度鳞状上皮内病变、高度鳞状上皮内病变、鳞状细胞癌（SCC），以正常或炎症为阴性，其余为阳性。

1.2.2 DNA倍体细胞检测 使用无菌棉签轻拭宫颈口处分泌物，在宫颈口以顺时针方向转动5～6圈，并放入指定样本收集试管保存样本，放至低温箱，采集后需要在12 h内尽快送检，检测环境温度不超过28 ℃，标本经Feulgen染色后，分别检测人乳头瘤病毒（HPV）基因分型，以HPV基因型分布对应判断基因类型。结果可分为3类，1类以正常二倍体细胞为主，未见细胞核DNA指数＞ 2.5倍体异常细胞；2类以可见少量DNA倍体异常细胞，异常细胞数目为1～2个或细胞增殖比例为5%～10%；3类以可见DNA倍体异常细胞，异常细胞数目≥3个或细胞增殖比例＞ 10%，当检查结果为1类时为阴性，其余为阳性[5]。

1.2.3 阴道镜病理活检 研究对象取截石位，轻轻置入阴道镜，通过阴道镜观察宫颈移行上皮和血管的变化情况，对病灶位置取材，在可疑病变部位留取样本，取样位置分别在3、6、9、12点，使用甲醛溶液固定以后送病理检查。结果分为正常或炎症、宫颈上皮内瘤变（CIN）（其中CIN包括CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级）、SCC，并以CINⅠ级为阳性病变阈值[6]。

1.3 观察指标 ①对比3种检测方式的检出情况。②以阴道镜病理活检结果为金标准，对比3种检测方式的检出结果。③对比3种检测方式的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值。灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%，特异度=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%，准确度=（真阳性例数+真阴性例数）/总例数×100%，阳性预测值=真阳性例数/（真阳性例数+假阳性例数）×100%，阴性预测值=真阴性例数/（假阴性例数+真阴性例数）×100%。

1.4 统计学分析 采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计数资料以[例(%)]表示，采用χ2检验，多组间计数资料比较采用χ2趋势检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 检出情况 70例疑似宫颈癌患者中经病理确诊正常或炎症（阴性）22例，CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级、SCC分别为23例、16例、6例、3例，共48例。其中联合检测阴性与阳性（CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC）符 合 率 分 别 为 100.00%、100.00%、93.75%、100.00%、100.00%，均高于DNA倍体细胞检测的95.45%、95.65%、87.50%、83.33%、66.67% 及 TCT 检测的 86.36%、86.96%、81.25%、83.33%、66.67%，但 3组间比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表1。

表1 不同检测方式的检出情况比较[例(%)]

2.2 检出结果 70例疑似宫颈癌患者中阴性22例，阳性48例；经TCT检测发现，阴性27例，阳性43例，漏诊8例；经DNA倍体细胞检测发现，阴性26例，阳性44例，漏诊5例；经联合检测发现，阴性23例，阳性47例，漏诊1例，见表2。

表2 不同检测方式与病理学检查结果比较(例)

2.3 诊断效能 与联合检测比较，TCT检测准确度显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05），且联合检测敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值占比均高于单项检测，准确度高于DNA倍体细胞检测，但组间比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表3。

表3 不同检测方式对宫颈癌的诊断效能比较(%)

3 讨论

宫颈癌原发位置在子宫颈部，是恶性肿瘤的一种，发病年龄多为50岁以上中年女性，但由于当下女性在职场和家庭生活中所受压力较大，导致宫颈癌的发病年龄有年轻化的发展趋势。宫颈癌的发生、发展有一定的过程，在病变早期，上皮组织发生内瘤样病变，而随着疾病进展可出现早期浸润，进而发展为宫颈癌，因此，早期筛查、发现宫颈癌，有利于预防上皮内瘤病变的进展，从而降低宫颈癌的发生。研究表明，宫颈癌自身不具有传染性，但是HPV会通过性接触传染，所以在性生活过程中采取安全防护措施十分必要[7]。

阴道镜病理活检通过直视下观察宫颈病变部位，并可针对异常区域进行组织活检，具有较高的准确率，但其属于有创操作，且对可见组织的检查存在一定的主观性，因此，在一定程度上可影响病情判断[8]。TCT检查主要通过计算机与常规物理技术相结合，利用液基薄层细胞检测技术，将宫颈黏液、炎性细胞、血液及上皮细胞更好地分离，从而观察到宫颈脱落的上皮细胞中是否存在上皮内瘤样病变或是肿瘤，但其只能观察细胞形态特征，而对组织结构特征分辨率较低[9]。正常情况下，人体细胞的DNA数量是固定的，当发生癌变时，细胞可出现异常重组，而DNA倍体细胞检测可利用计算机对样本细胞进行自动分析扫描，通过对病变位置的DNA含量的变化比较，能够更加精准地判断出肿瘤的发生，而且DNA倍体检测还可以观察到人体遗传基因变异的过程，一定程度上避免了主观因素的影响[10]。本研究对70例疑似宫颈癌患者进行了TCT检测、DNA倍体细胞检测和联合检测3种方式，并与最终的病理活检结果做比较，结果显示，联合检测阴性、阳性检出符合率均高于单独检测，但差异均无统计学意义，且TCT检测的准确率可达84.29%，DNA倍体细胞检测的准确率可达91.43%，都可以较好地检测出宫颈癌，但二者联合检测的准确率高达98.57%，可见TCT联合DNA倍体细胞检测能够更加准确地诊断出宫颈癌，而且其均为无创检查，很大程度上降低了患者检查过程的痛苦，对宫颈癌与癌前病变的筛查具有重要意义。

综上，在宫颈癌筛查时，采用TCT联合DNA倍体细胞检测能够更加准确地诊断出宫颈癌与癌前病变，进而及时阻止宫颈癌前病变的进一步发展，同时，也为宫颈癌患者的及早发现提供了有效的诊断依据，而且检查过程无痛苦，受检者更易接受，值得临床上的大力推广与应用。