白酒中氰化物测定时 试剂稳定性实验分析

安金桃 袁旭艳 杨妍

氰化物极具毒性，具有苦杏仁味道，氰化物检测是保证白酒等食品安全性的重要举措。在测定白酒中氰化物时，期间所使用试剂的稳定性对测试结果有着决定性作用。本文通过采取试验的方式，分析影响测定白酒氰化物试剂稳定性的因素。

一、实验准备

全玻璃蒸馏器、可调电炉、容量瓶、光度计、塞比色管、密度为1.6g/mL的磷酸、氢氧化钠溶液、试纸、氨基磺酸、亚硫酸钠溶液。

二、实验步骤

1.实验预处理步骤。稀释与吸收氰化氢。从被测试的样品中适量提取样品，一般取200mL即可，将样品放入蒸馏瓶内，倘若被检测样品中含有较高的氰化物，那么可以酌情降低提取量，加入蒸馏水将其稀释，直至200mL。

把浓度为1%的氢氧化钠溶液加入到容器内，取10mL即可，将其作为吸收液。

把冷凝管的出口位置连接到馏出液导管的上端位置，在容器中的吸收液置入馏出液导管的下端位置，对连接的位置开展详细检查，保证其具有良好的严密性。

在蒸馏瓶中放入Na2-EDTA溶液，放入量控制在10mL即可。

将10mL的磷酸快速加入到容器中，若是样品的碱性程度过大，可以适量增加磷酸，保持溶液的酸碱值不超过2。此时需要即刻将瓶塞塞好。打开冷凝水，调节电炉，按照由低到高的顺序逐渐升高温度，蒸馏加热是以每分钟2mL-4mL的馏出液速度完成。

当接收瓶内部的溶液容量大约为100mL时要终止蒸馏，利用少量的水将馏出液导管进行清洗，将接收瓶取出，加入蒸馏水进行稀释，直至标线位置，此时得到碱性馏出液，留待测量氰化物再用。

2.试剂稳定性测试步骤。在中性条件下，选取的样品中氰化物将会与氯胺T出现反应，进而得到氯化氢，之后再与异烟酸产生化学反应，在经过水解后得到戊烯二醛，最后和吡唑啉酮合成蓝色燃料。

首先绘制校准曲线。（1）将0mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL氰化物溶液加入到塞比色管，再分别加入浓度为0.1%的氢氧化钠溶液，直至10mL。（2）将5mL磷酸盐缓冲溶液加入到各个容器中，将溶液进行均匀搅拌。在最短时间内将氯胺T溶液加入其中，立即将瓶子盖住，混匀，静置3-5min。（3）将5mL的异烟酸-吡唑啉酮溶液加入容器中，将其混匀。在容器中加入蒸馏水进行稀释，直至加到标线位置，将其摇晃均匀。在温度为25℃-35℃的水中静置40min。（4）在638nm的波长下，利用光度计测试，使用10nm比色皿，以零浓度的空白管作为对比，对吸光度展开测量，同时完成校准曲线绘制。

其次测定样品。（1）在具塞比色管中分别提取10.0mL空白试验馏出液和馏出液，之后按照校准曲线的第二步到第四步展开操作，完成吸光度测量。（2）利用校准曲线完成氰化物含量查询。

在上述公式中，ma为氰化物含量，μg;mb为空白试样中的氰化物含量，μg;V为选取的样品体积，mL;V1为样品的体积;V2为比色时样品的体积。

3.试验注意事项。在实验期间，实验人员需要特别注意的问题有四个方面：

（1）若是氰化物基于HCN形式存在的时候，那么比较容易挥发。所以，将缓冲液加入到器皿后，每一步操作都需要在最短的时间内完成，并且要将器皿的盖子盖好。

（2）为了将实验中的空白值降低，实验期间可以选择使用无色N-2甲基甲醛酰胺。

（3）当实验室内的环境温度不高时，磷酸盐缓冲溶液将会被解析出结晶，从而改变溶液的酸碱值。所以，在进行水浴处理的时候，要采取合适的方法将结晶进行溶解，搅拌均匀后方能使用。

（4）当使用浓度较高的氢氧化钠溶液作为洗手液时，缓冲液添加之前需使用酚酞作为指示剂，在溶液内滴加盐酸，直至褪去红色。校准曲线和水样必须为相同浓度的氢氧化钠。

三、实验结果分析

1.氯胺T浓度的影响。在分析白酒中氰化物测定试剂稳定性的时候，将控制氯胺T浓度为0.05%、0.1%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%，对氯胺T浓度影响吸光度的能力展开分析。结果如图1所示：

通过图1的结果可以得知，当氯胺T的浓度值在0.1%-0.2%之间时，结果处于最佳状态。当氯胺T的浓度值过高或者过低，都会在一定程度上对结果产生影响。当处于中性条件下，白酒样品中的氰化物将会与氯胺T发生反应，进而形成氯化氢。吡唑啉酮所合成蓝色染料以及异烟酸开环时，CNCl是重要的物质条件，更是定量信息的第一载体。活性氧是与氰化物发生化学反应，并且产生CNCl的重要物质条件，其供给量不足，那么在溶液中的CN-便不能被全部氯化。若是添加的量超过标准，那么将会造成氰化物被分解，得到次氯酸盐。所以，通过本次实验可以得知，活性氯的多少将会影响到氯胺T的效率，对检测结果产生影响。

2.缓冲溶液酸碱值的影响。在试验分析中，按照规定需要将磷酸盐缓冲溶液的酸碱值控制在7。但是在实际试验过程中，由于受到试剂质量和纯水质量的影响，缓冲溶液酸碱值会出现不同程度的上下波动，所以在标准溶液配置过程中，需要分析缓冲溶液在配置时的浓度比例，探究酸碱值的受影响因素。

在实验分析中得知，当磷酸盐缓冲溶液的酸碱值维系在6.5-7之间时，处于最佳状态，若是酸碱值过高或者过低，都会对实验结果产生影响。当磷酸盐缓冲溶液的酸碱值过低时，此时CNCl将会与异烟酸发生反应，产生戊烯二醛。因为吡啶环上的羧基处于酸性条件时会十分稳定，难以被打开，反应中途会被终止，當介质的酸性增强的时候，这种效果表现得则更加显著。当磷酸盐缓冲溶液的酸碱值过高，那么水解CNCl，形成氰酸根，其化学反应方程式如下所示：CNCl+OH-=CNO-+COl-+H+，此时的吸光度将会伴随着磷酸盐缓冲溶液的酸碱值上升而下降。

3.异烟酸-吡唑啉酮试剂的影响。在配置异烟酸-吡唑啉酮试剂时，国家标准并未作出明确的规定，在试验分析中，会将试剂分别保存，静置数天以后进行合并混合使用。通过实验分析的结果得知，这种方法会影响到烟酸-吡唑啉酮试剂的稳定性。

在配制烟酸-吡唑啉酮试剂之前，其标准曲线斜率值为0.32，并且当烟酸-吡唑啉酮试剂在24小时之内使用的时候，其标准缺陷斜率值基本上保持稳定，但是在第二天以后，烟酸-吡唑啉酮试剂的颜色将会呈现出由浅及深的变化。对标准曲线灵敏度进行检测，发现其呈现出下降趋势。一周以后测试其灵敏度，得知其标准曲线的斜率值下降到0.26，相对误差值为-18.8%。若是在保存烟酸-吡唑啉酮试剂的时候，对其进行分别保存，在使用的时候再取出，将其混合使用，那么在一周时间以后，其标准曲线的斜率值将会下降到0.23，相对误差值为-28.1%，并且烟酸-吡唑啉酮试剂的颜色会加深。

白酒中的氰化物检测关系到食品安全，在检测期间，试剂的稳定性对检测结果有着不可忽视的作用。本文通过实验分析的方法，探究白酒氰化物检测试剂的稳定性。通过实验结果得知，活性氯的多少将会影响到氯胺T的稳定性;酸碱值的高低将会影响到磷酸盐缓冲溶液的检测质量;保存方式和使用时间将会影响到烟酸-吡唑啉酮试剂的稳定性。所以在进行白酒或其他食品中氰化物的检测时，需全面认识检测试剂的性能，合理调配检测试剂溶液，对影响其稳定性的因素作出合理控制，提高检测结果的可靠性。

作者简介：安金桃（1992-），女，陕西旬阳人，大学本科，助理工程师，研究方向为食品检验。