高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中的有效成分

韩中祥

摘要：探究阿莫西林膠囊中的有效成分。方法：采用高效液相色谱法测定检测阿莫西林胶囊中的有效成分。结果：高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中成分精密度良好，且有关物质准确度高。杂质对照品混合溶液，室温放置4h时，杂质D，E峰面积偏差不稳定，低温12h内，阿莫西林及各杂质峰面积偏差稳定。各成分峰面积与浓度在一定范围内呈线性关系。结论：高效液相色谱法专属性强、灵敏度高、准确度和重复性好，可用于检刚阿莫西林胶囊中有关物质。

关键词：高效液相色谱法;阿莫西林;有效成分

阿莫西林为声内酞胺类抗菌药物，临床上广泛应用于革兰阴性菌、革兰阳性菌等所致的感染性疾病、呼吸系统疾病及泌尿系统疾病。该产品中的杂质种类比较多，为了减少医疗中的不良反应，必须对其杂质进行控制。阿莫西林原料、阿莫西林注射剂、阿莫西林颗粒[s]中的杂质研究已有文献报道。本文采用高效液相色谱法测定测定阿莫西林胶囊中的有效成分。

1仪器与方法

1.1仪器与试剂

数控超声波清洗机购自东莞市科桥超声波设备有限公司，万能高速粉碎机购自上海安亭科学仪器厂，紫外可见光谱仪购自SHIMADZU公司。其中，所用药物主要为阿莫西林胶囊，在应用之前，通过了国家的药品质量检测。取阿莫西林胶囊100g，让其置入50ml的烧杯中进行溶解，摇匀，作为实验的储备液，需要注意的是，要保证储备液的相对浓度达到相应的标准。另外，还需要采用阿莫西林的胶囊，药品的批号和规格等都符合药品监督总局的规定;最后需要高锰酸钾、硫酸、盐酸以及硝酸等成分;除此之外，还需要准备蒸馏水。

1.2分析步骤

（1）制备对照品溶液：①称取适量阿莫西林，置于容量瓶中并加入25m L甲醇摇匀，配制成对照品母液，标好编号。②在10mL容量瓶中，分别加入母液0.5mL、3mL、2mL、1.5mL、2mL、1mL，制成混合对照品溶液。③量取混合对照品溶液1mL，于2 mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，过 0.22μm 微孔滤膜，得到对照品溶液。

（2）制备供试品溶液：①精确称取样阿莫西林0.1 g，加入锥形瓶中，再加入25mL甲醇，称重。②超声波处理30min，冷却后称重，用甲醇补足减失重量，摇匀并过滤。③在25mL容量瓶中加入10 mL过滤液，甲醇定容，摇匀，过0.22μm 微孔滤膜，得到供试品溶液。

（3）色谱测定：用色谱仪测量样品含量，检测波长239，440 nm;流速0.2mL/min;柱温为30℃;进样量2μL。得到混合对照品和样品UPLC色谱图。

2结果

该试验表明本品在各降解条件下，各检测溶液中主峰峰纯度匹配指数均大于980，符合要求。物料回收率均在90%一110%，物料守恒。精密量取10μL，注人液相色谱仪，连续进样6次，记录各杂质的保留时间和峰面积，并计算RSD。各杂质峰面积的RSD均<5.0%，保留时间的RSD均&lt;1.0%，表明该方法精密度良好。

以25μg/mL的杂质对照品混合溶液为储备液，分别精密量取该储备液0.25， 0.5， 1.0， 2.5， 4.0， 5.0mL于10 mL量瓶，稀释至刻度作为线性溶液1-6，该储备液为线性溶液7，分别取各线性溶液注人液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，各成分峰面积与浓度在一定范围内呈线性关系.

室温条件下，与0 min相比，供试品溶液在室温环境中放置2h时，杂质D峰面积的相对平均偏差为35.6%，杂质C峰面积的RD为51.4%，均>20%，已不稳定;低温6h内，供试品溶液中各杂质及单杂、总杂峰面积的RD均<20%;因此有关物质检测时供试品溶液应临用前新鲜配制或低温放置40C， 6h内。杂质对照品混合溶液，室温放置4h时，杂质D，E峰面积偏差分别为2.8%，5.3%，均>2%，不稳定;低温12h内，阿莫西林及各杂质峰面积偏差。均<2%，稳定。

取12.5mg样品置10 mL量瓶中，分别加入4， 5， 6mL25μg/mL的杂质混合储备液，再分别以空白溶剂定容，分别作为80%，100% ，120%的加标回收率溶液，每份回收率溶液平行配制3份。结果各浓度下各杂质的回收率均在90%-108% ， RSD均小于10%，说明此方法检测阿莫西林有关物质准确度高。

讨论

通过高效液相色谱法检测阿莫西林原料药有关物质，方法学研究表明，该法专属性强、灵敏度高、耐用性强、重复性与精密度好，采用加校正因子的阿莫西林对照品法可准确测定阿莫西林胶囊中的各特定杂质含量。

作为光谱抗生素药物的一种，临床上阿莫西林被广泛应用，其又名为羟氨苄青霉素，属β-内酰胺青霉素类抗生素。阿莫西林杀菌作用强，穿透细胞壁的能力也强。口服后药物分子中的内酰胺基立即水解生成肽键，迅速和菌体内的转肽酶结合使之失活，切断了菌体依靠转肽酶合成糖肽用来建造细胞壁的唯一途徑，使细菌细胞迅速成为球形体而破裂溶解，菌体终于因细胞壁损水份不断渗透而胀裂死亡。

作为阿莫西林研究的一个重要方面，阿莫西林制剂的含量的测定方法一直备受关注。阿莫西林是抗生素类药物，是一种新型的广谱半合成青霉素，主要用于敏感菌所致的呼吸道、尿路和皮肤软组织感染的治疗，其杀菌作用优于氨苄西林。阿莫西林现有的测定方法主要有吸光光度法、比色法、荧光法、高效液相色谱法、原子吸收光谱法等。这些方法有的灵敏度低，线性范围窄，有的操作繁琐。本研究通过高效液相色谱法测定阿莫西林克胶囊中的有关物质，方法学验证实验表明，采用自身对照法测定杂质含量，能很好地控制本品中的杂质限度，即采用自身对照法测定本品杂质含量的方法是可行的，且专属性强、灵敏度高、准确度和重复性较好。

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（灌南县药品检验所 江苏连云港 223500）