橄榄叶提取物的安全性毒理学分析

李芷萱

作为可内服的抗菌成分，赋予橄榄叶提取物理想抗菌性的成分主要是环烯醚萜与橄榄苦苷。本文以橄榄叶提取物为研究对象，从毒理学的角度，对其安全性进行了深入探究。

一、植物提取物介绍

本文所分析的橄榄叶提取物，由橄榄干燥叶提取所得，其成分以黄酮和萜类为主，具有良好活性。此外，提取所得羟基酪醇可被用来刺激线粒体合成及功能发挥，并且能够抑制酪氨酸消化和碱基修饰相关反应，这也决定其具备清除自由基的作用，属于典型的无毒级提取物。

二、橄榄叶提取物化学成分

1.脂肪族。已知脂肪族化合物有苯乙醛、壬醛以及橙花叔醇。

2.酚酸化合物。作为酚羟基有机酸的酚酸化合物，其酚酸成分主要包括肉桂酸、香草酸、绿原酸、咖啡酸、没食子酸。

3.黄酮化合物。对橄榄叶进行提取和分离所得黄酮成分，其甘元以芹菜素、木犀草素以及洋芫荽黄素为主，上述苷元的糖链以1个糖和2个糖较为常见。现阶段，研究人员已成功分离出20余种表征不同的黄酮化合物，并在多个领域得到了运用。

4.萜类衍生物。橄榄叶普遍含有大量萜类衍生物，对油橄榄叶而言，最具代表性的萜类化合物为裂环烯醚萜，另外其萜烯含量往往较高。

（1）三萜化合物。橄榄叶含有的三萜成分以五环三萜为主，例如广为人知的山楂酸以及齐墩果酸，均属于齐墩果烷型。

（2）裂环烯醚萜。作为环戊烷单萜所衍生存储化合物，裂环烯醚萜的形成机理为环烯醚萜裂环，由此可见，裂环烯醚萜在环烯醚萜总量中的占比极小。此外，橄榄苦苷也应当引起重视，作为裂环烯醚萜苷代表，该化合物的药理活性极为突出，对其做水解处理，通常可获得游离状态的羟基酪醇。

三、橄欖叶提取物的获取方法

将羟基酪醇含量作为主要考察指标，通过正交实验与单因素实验相结合的方式，对橄榄叶羟基酪醇进行提取的工艺加以确定，首选工艺为超声辅助磷酸，相关参数如下：提取所用磷酸的浓度以2mol/L为宜，液料比应控制在40：1左右，经过60min超声处理后获得5.2mg/g的羟基酪醇。基于正交实验、单因素实验酶法对羟基酪醇进行提取的工艺，酶解时间应当控制在80min左右，pH值以7为最佳，实验全过程均在40℃环境下进行，在酶浓度达到30μg/mL时，获得羟基酪醇的实际含量约为3.7mg/g。

若计划使用乙醇溶剂对多酚物质进行浸提，研究人员应了解以下内容：液料比应在1：35g/mL左右，最佳浸提温度为55℃，且乙醇体积分数不得超过60%。本次实验中，研究人员将浸提时间设定为1.75h，最终获得57.3mg/g的多酚提取物。

将橄榄叶品作为原料、芦丁作为对照，将总黄酮实际提取率作为指标，将料液比、乙醇体积分数和回流时间等参数作为重点考察因素，通过正交实验对提取工艺进行设计，可得出以下数据：最佳液料比为1：20；最佳乙醇体积分数为90%；最佳回流时间为1.5h；最佳提取温度为60℃。在满足上述条件的前提下，对橄榄叶总黄酮进行提取，提取率高达2.3%。

四、橄榄叶提取物的毒理学研究

研究人员以原卫生部颁布的评价食品安全性所适用程序及方法为依据，对大鼠进行了长达90d的喂养实验，期间大鼠正常活动及生长，既不存在死亡病例，同时也不存在拒食等异常行为。每周基于对照组对雄大鼠的体重、食物利用率以及进食总量进行比较，不存在显著性差异。在喂养约45d后，由研究人员对各组大鼠血液进行检测，待实验告一段落，再次对大鼠血液进行检测，通过对比中期检测值和末期检测值，可得出各参数波动正常的结论。另外，小鼠精子畸形实验中未发现精子诱变活性。关于口毒性实验，在经口MTD值不低于15g/kg的前提下，研究人员未发现相关诱变活性。综上所述，橄榄叶提取物满足无毒级提取物标准，不存在潜在致突变的可能。